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第43卷第2期 陆文烨，宋梦星，吴 芬，等. 大鼠心肌纤维化模型MR T2WI成像的实验研究［J］.
2023年2月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（2）：164-168 ·165 ·

心肌纤维化所致心功能不全是严重影响老年 液、氯化钠溶液（广州碧尧德生物科技有限公司）；
［1］
心血管病治疗及康复的重要因素 。心肌纤维化在 苏木素伊红染色试剂盒（珠海贝索生物技术有限公
病理学上是局部及系统性疾病逐步影响到心肌的 司）；TN⁃X抗体（Santa Cruz公司，美国）；MMP⁃9抗体
不可逆性损伤 。心肌纤维化的传统诊断是通过心 （Abcam 公司，美国）；CD68（Affinity 公司，美国）；石
［2］
肌穿刺后经病理组织学观察来确定的。然而，这种 蜡切片机（RM2016，Leica 公司，德国）；载玻片及盖
穿刺检查不但对心肌有损伤，而且穿刺后并发症的 玻片（江苏世泰实验器材公司）；显微镜（H550S，
发生率为0.6%~0.8% ［3-4］ 。所以，非侵入性心肌纤维 NIKON公司，日本）。
化的诊断方法具有重要的临床应用价值。 1.2 方法

心脏核磁共振成像（cardiac magnetic resonance 1.2.1 MR T2WI成像
imaging，CMR）检查是非侵入性心脏检查较理想的 模型组共分为 3 组，每组 12 只，分别于建模后
方法 ，CMR 检查不但能准确显示心脏的结构及功 第5天、第7天及第9天进行心脏MR 检查。对照组
［5］
能，还能提供准确的心肌组织学及功能变化的特 10 只为建模后第 7 天行 MR 检查。心脏 MR 采用 7T
征，是临床心脏疾病诊断、治疗效果评估的理想检 磁共振扫描仪（Bruker PharmaScans，德国），大鼠线
查方法。近年来，临床常用 MR 对比剂延迟强化 圈，接心电门控以及呼吸门控，通过气体麻药量调节
（late gadolinium enhancement，LGE）来检测局灶性心 心率约300次/min，呼吸频率维持约35次/min。主要
肌纤维化。然而，LGE 检测心肌纤维化的特异性及 参数：视角 3 cm × 3 cm；矩阵 256 × 256；TE3.5 ms；
敏感性仅分别为 67%及 87%，LGE 主要反映的是心 TR130 ms；扫描层厚 1 mm；翻转角 30°。MRI 图像
肌梗死后的局部瘢痕组织形成、坏死及炎症。而磁 分 析 为 手 动 选 择 感 兴 趣 区 域（region of interest，
共振T2加权成像（T2 weighted imaging，T2WI）的高 ROI），对比信噪比（contrast noise ratio，CNR）计算：
信号可以反映心肌梗死发生时的局部心肌细胞 ［CNR=（SIivs-SIinf）/SInoise］，SIinf：心肌纤维化区
水肿和急性损伤，而T2WI低信号则反映心肌梗死后 域的信号强度，SIivs：室间隔的信号强度，SInoise：
局部心肌组织的纤维化改变，由高信号逐步向低信号 背景噪声。扫描完，麻醉处死大鼠，取出心脏。
的变化，反映的是心肌细胞含水量逐步减低，细胞由 1.2.2 心脏病理学检查分析
水肿向纤维化改变的病理学过程；因此，增加心脏 新鲜组织固定于4%多聚甲醛24 h以上。将组织
T2WI成像检测对心肌纤维化的评估具有更加重要的 从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织
研究价值 ［6-8］ 。本研究建立理想的心肌纤维化实验动 修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒
物模型，开展心肌纤维化MR T2WI成像表现及病理 内。脱水后将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。
学改变的基础实验研究，进而提高MR T2WI在心肌 将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片，片厚
纤维化检测中的应用基础。 4 μm。光学显微镜下观察心脏组织结构变化。石蜡
切片进行 Masson 三色染色，Image⁃pro plus图像处理
1 材料和方法
软件分析并计算 Masson 染色阳性（胶原呈蓝色）面积
1.1 材料 百分比，即左室心肌胶原容积分数（collagen volume
选择 6 周龄、体重（230±10）g 的雄性 SPF 级 SD fraction，CVF）。每张切片随机选取高倍镜（×400）下
大鼠（北京维通利华实验动物技术有限公司）50只， 5个视野作图像分析，以 CVF 均值作为该样本的测量
模型组（40 只），皮下注射异丙肾上腺素，每日剂量 值。CVF 越大，表示胶原含量越多。
［9］
为 5 mg/kg，连续注射 10 d 。对照组（10 只），皮下 1.3 统计学方法
注射生理盐水，连续注射 10 d。两组均饲养于 SPF 采用 SPSS 22.0 统计软件，使用均数±标准差（x
级环境中，3 只/笼，环境温度维持于 20~22 ℃，相对 ± s）表示计量资料，组间MR信号及左室心肌胶原容
湿度为 55%~60%，每日光照 12 h。建模过程中，模 积分数改变行单因素方差分析，P＜0.05 为差异有
型组于打药第 1 天死亡 2 只，第 2、3 天分别死亡 统计学意义。
1 只，合计死亡 4 只，剩余模型组 36 只，死亡率
2 结 果
10%；对照组10只，死亡0只。
盐酸异丙肾上腺素（江苏艾康生物医药研发有 2.1 MR检查
限公司）；多聚甲醛（国药集团化学试剂）；PBS 缓冲 MR 成像 T2WI 显示：与对照组（图 1A）相比，建