Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第2期
·160 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年2月

Ctbp2 蛋白表达进行分析，发现其在 ApoE 小鼠中 SGN 区的单位面积细胞数量减少，统计结果显示，
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的表达明显下降（图 3C、D）。以上结果说明耳蜗带 WT 组小鼠每 10 000 μm 所含细胞数为（33.4±7.3）
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状突触数量的减少可能是造成 ApoE 小鼠听觉信 个，大于ApoE 小鼠的（24.5±4.5）个，并且两者的差
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-/-
号传导功能异常的原因之一。 异具有统计学意义（P < 0.05，图 4A、B）。神经元细
-/-
2.4 ApoE 小鼠SGN形态结构分析 胞骨架可以通过神经丝（neurofilament，NF）进行标
为了研究 ApoE 小鼠在发生带状突触丢失的 记，细胞骨架的表达情况可以用来鉴定神经元是否
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同时是否伴随着 SGN 的损伤，对 SGN 区细胞数量、 存在变性情况，判断神经元功能是否受损。在
神经元细胞骨架进行了检查。通过HE染色对小鼠 ApoE 耳蜗内NF数量显著减少，听觉神经元出现变
-/-
耳蜗的SGN区所含细胞进行标记，发现ApoE 小鼠 性情况（图4C）。这些结果提示，ApoE 小鼠耳蜗带
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-/-
A 顶回 中回 底回

WT

ApoE -/-

B C -/- D
20 *** WT WT ApoE 0.5 ** WT
ApoE -/- Ctbp2 48 kDa 0.4 ApoE -/-
带状突触数量/IHC 10 5 GAPDH 37 kDa Ctbp2/GAPDH 0.3
***
***
15
0.2

0 0.1
0.0
顶回 中回 底回
A：耳蜗带状突触染色结果，带状突触使用Ctbp2抗体（绿）标记（×1 000）；B：耳蜗顶、中、底回带状突触数量分析（计算3只小鼠的40~50个
IHC所含平均带状突触数量）；C：蛋白质印迹法检测Ctbp2在小鼠耳蜗中的表达情况；D：以GAPDH做为内参，定量分析Ctbp2下降情况。两组
比较，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
**
***
-/-
图3 ApoE 小鼠带状突触数量检测
Figure 3 Detection of the number of cochlear ribbon synapses in ApoE mice
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A -/- B
μm 2 ） ApoE -/-
WT ApoE 50 * WT
000 40
30
（ 个/10 20
细胞密度 10

0
C WT ApoE -/-

A：耳蜗SGN区域HE染色（×400）；B：SGN区域细胞密度统计，两组比较，P < 0.05（n=4）；C：小鼠耳蜗基底膜神经元细胞骨架染色，神经元
*
细胞骨架由NF⁃H（红）抗体标记，细胞核由DAPI（蓝）标记（×1 000）。
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图4 ApoE 小鼠SGN结构检测分析
Figure 4 Analysis of SGN structure in ApoE mice
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