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第43卷第2期 汤序军，王红顺，姚 俊，等. ApoE敲除导致小鼠耳蜗螺旋神经元功能损伤的相关性分析［J］.
2023年2月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（2）：156-163，168 ·159 ·

逐渐累及中低频区域。 2.3 ApoE 小鼠耳蜗带状突触数量分析
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2.2 ApoE 小鼠ABR检测波Ⅰ振幅及延迟期分析 在耳蜗 IHC 底部存在连接 SGN 中听神经纤维
与 WT 组相比，ApoE 小鼠的 ABR 波Ⅰ呈现较 的突触结构，由于其在空间上呈现带状分布，故被称
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低的振幅，以及较长的延迟期（图2A）。波Ⅰ的振幅 为带状突触。每个SGN只与1个IHC存在突触联系，
分析显示，在3周龄小鼠中，ApoE 小鼠在各个频率 而每个IHC与10~30个神经元存在树突联系 。IHC
［8］
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区域均有振幅缩短的趋势，并且在 8、16、32 kHZ 处 上的大量带状突触组合可以对持续、分级的听觉刺
的缩短具有统计学意义（P < 0.05）。在12周龄小鼠 激进行反应，将听觉信号准确、连续及敏感地传入
的波Ⅰ振幅分析中发现，ApoE 小鼠在各个频率区 听神经，所以突触的数量对于听觉信号的传导起重
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域的振幅缩短均具有统计学差异（P < 0.05）。当小 要作用。本研究使用 C 端连接蛋白（C⁃terminal⁃
鼠 24 周龄时，其振幅平均值在两组小鼠中均下降， binding protein，Ctbp2）对 IHC 底部的带状突触数量

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但 ApoE 小鼠的振幅下降更加明显，并且除 4 kHZ 进行检测。Ctbp2是目前已知的带状突触上唯一的
处无明显差异外，其余各频率区域差异具有统计学 结构蛋白，常被认为参与构成带状突触结构的细胞
［9］
意义（P < 0.05，图2B）。波Ⅰ的延迟期分析显示，相 骨架，Ctbp2可作为带状突触的标志分子 。在12 周
较于 WT 组，ApoE 小鼠的 ABR 波Ⅰ延迟期在各个 龄小鼠耳蜗基底膜中，分别进行顶、中、底回 Ct⁃
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周龄、各个频率区域均有显著上升，且差异均具有 bp2 免疫荧光染色（图 3A），计算各回中单一 IHC 底

统计学意义（P < 0.05，图2C）。在波形分析中，波Ⅰ 部所含有的平均带状突触数量。在 WT 组中，顶回
的振幅与耳蜗带状突触对于听觉信号的接收能力 单个 IHC 含有（12.7±1.6）个突触，中回含有（14.5±
有关，而延迟期表示听觉信号由 IHC 经过带状突 1.9）个突触，底回含有（12.4±1.1）个突触。而在
触传递进入听神经的时间长度。这些结果提示 ApoE 小鼠中，顶、中、底回的平均带状突触数量分
⁃/⁃
ApoE 小鼠耳蜗螺旋神经节处带状突触及听神经 别为（8.7±1.6）、（10.9±2.1）及（9.0±1.8）个。与WT组
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可能存在结构与功能上的异常，导致听觉信号传 相比，ApoE 小鼠耳蜗带状突触数量存在显著下降，
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导障碍。 差异有统计学意义（P < 0.001，图 3B）。对耳蜗内
A
（ μV ） Ⅰ Ⅰ Ⅱ Ⅱ Ⅲ Ⅲ Ⅳ Ⅳ Ⅴ WT
振幅 2 0 基线 ApoE -/-

0 2 4 6 8
时间（ms）
B 3周龄 WT 12周龄 WT 24周龄 WT
（ μV ） 4 3 * * ApoE -/- （ μV ） 4 3 *** ** * ApoE -/- （ μV ） 4 3 ApoE -/-
ABR波Ⅰ振幅 2 1 ** ABR波Ⅰ振幅 2 1 * * ABR波Ⅰ振幅 2 1 *** * ** **

0
4 8 16 24 32 0 4 8 16 24 32 0 4 8 16 24 32
频率（kHZ） 频率（kHZ） 频率（kHZ）
C 3周龄 12周龄 24周龄
（ ms ） 2.5 ** ** * WT -/- （ ms ） 2.5 * WT -/- （ ms ） 2.5 ** ** WT -/-
ApoE
ApoE
ApoE
ABR波Ⅰ廷迟期 1.5 * * ABR波Ⅰ廷迟期 1.5 * * ** * ABR波Ⅰ廷迟期 1.5 * ** ***
2.0
2.0
2.0
1.0
4 8 16 24 32 1.0 4 8 16 24 32 1.0 4 8 16 24 32
频率（kHZ） 频率（kHZ） 频率（kHZ）
A：ABR波形趋势图（12周龄，90 dB，8 kHZ纯音刺激），黑色实线表示波峰至基线距离，即波Ⅰ振幅，黑色虚线表示波Ⅰ峰值至波群起始点
时长，即波Ⅰ延迟期；B：不同周龄的两组小鼠在纯音刺激下各频率的90 dB位置波Ⅰ振幅比较；C：不同周龄的两组小鼠在纯音刺激下各频率
的90 dB位置波Ⅰ延迟期比较。两组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=6）。
**
*
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图2 ApoE 小鼠ABR检测波Ⅰ振幅及延迟期分析
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Figure 2 ABR wave Ⅰ amplitude and latency analysis in ApoE mice
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