Page 20 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第2期
·162 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年2月

A

WT

ApoE -/-

B C -/-
1.5 WT WT ApoE
*
* ApoE -/- Dab1 64 kDa
mRNA相对表达 1.0 p⁃Dab1 64 kDa
PI3K
119 kDa
p⁃PI3K
119 kDa
0.5
Akt 60 kDa
0.0 p⁃Akt 60 kDa
ApoER2 V1d1R Lrp1
GAPDH 37 kDa
A：SGN 区 cofilin 棒染色，使用 cofilin1 抗体（绿）标记 cofilin1，Map2（红）标记神经细胞（×400）；B：qRT⁃PCR 检测耳蜗中 LDLR 受体表达情
况，两组比较，P < 0.05（n=3）；C：PI3K通路相关蛋白及其磷酸化水平检测。
*
图6 ApoE 小鼠耳蜗SGN区cofilin棒染色结果
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Figure 6 Results of cofilin rod staining in SGN region of the ApoE mice cochlea
-/-
Akt 分子及其磷酸化蛋白进行检测时，也发现其在 棘复杂度等起着核心作用 ［10，15］ 。cofilin1是调节细胞
耳蜗中表达量的下降（图6C）。有报道指出PI3K参 内肌动蛋白组装与分解的关键分子之一，其蛋白表
与Limk1⁃cofilin1的调控，ApoE 小鼠PI3K通路激活 达水平对于肌动蛋白组装的调控起重要作用。当
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被抑制可能是耳蜗内 Limk1 与 cofilin1 磷酸化减少 cofilin1 蛋白浓度较低时，更倾向于切断肌动蛋白，
的重要原因之一。 促进肌动蛋白丝尖端解聚。在高浓度情况下，
cofilin1 使肌动蛋白丝成核，以促进其组装 ［16］ 。co⁃
3 讨 论
filin1的活性主要是通过磷酸化状态来调控的，本研
先前研究提示 ApoE 功能缺陷的小鼠会引起耳 究发现cofilin1的磷酸化水平降低，同时具有活性的
蜗内毛细胞缺失、SGN 区细胞凋亡及血管纹毛细血 非 磷 酸 化 状 态 cofilin1 表 达 上 升 。 这 就 提 示 在
管减少等损伤，并可导致听觉功能丧失 ［13］ 。本研究 ApoE 小鼠中存在高浓度的活性 cofilin1，可能导致
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发现，ApoE缺陷还会引起耳蜗带状突触及听神经的 了神经细胞内肌动蛋白的聚合异常。
损伤，并且该损伤发生在 ApoE 功能缺陷的早期。 Limk1是中枢神经系统中磷酸化cofilin1的主要
这验证了听神经的损伤一般出现在听力阈值上升 修饰分子，Limk1 的磷酸化会导致其自身失活，失
或耳蜗细胞死亡之前的研究报道 ［14］ ，提示耳蜗SGN 活后的 Limk1 则不能继续调控 cofilin1 的磷酸化水
区听觉神经的损伤可能是 ApoE 小鼠发生听力损 平 ［17-18］ 。本研究也发现，在ApoE调控的神经细胞生
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失的另一重要原因。 理过程中存在 Limk1 与 cofilin1 基因的异常表达。
在神经系统中，肌动蛋白在神经元轴突及树突 在 ApoE 小鼠中，Limk1 的磷酸化水平降低，同时
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的形成中起重要作用，甚至参与驱动神经元间突触 Limk1的磷酸化是造成活性cofilin1浓度升高的主要
形成以协助神经间连接。肌动蛋白的聚合与解聚 原因。当活性cofilin1浓度过高时，其切断肌动蛋白
在调节突触前神经递质释放、突触可塑性以及树突 丝的效率降低，肌动蛋白丝不断添加到 cofilin 与肌