Page 32 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第2期
·174 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年2月

A B
1.2 ox⁃LDL - + + + （ % ） 20
* * *
1.0 Ti.（μmol/L）- - 40 40 *
nm ） 0.8 * * pcDNA⁃p16 - + + - - 15
pcDNA⁃NC +
+
-
（ 450 0.6 EdU阳性细胞百分比 10
D 0.4 EdU 5
0.2
0 0
ox⁃LDL - + + + ox⁃LDL - + + +
Ti.（μmol/L） - - 40 40 Hoechst Ti.（μmol/L） - - 40 40
pcDNA⁃NC + + + - pcDNA⁃NC + + + -
pcDNA⁃p16 - - - + pcDNA⁃p16 - - - +
Merge

C ox⁃LDL - + + + 300
Ti.（μmol/L） - - 40 40 *
pcDNA⁃NC + + + - * *
pcDNA⁃p16 - - - + （ 个 ） 200
细胞数 100

0
ox⁃LDL - + + +
Ti.（μmol/L） - - 40 40
pcDNA⁃NC + + + -
pcDNA⁃p16 - - - +
D
ox⁃LDL - + + +
Ti.（μmol/L） - - 40 40
pcDNA⁃NC + + + -
pcDNA⁃p16 - - - +
Q1⁃UL Q1⁃UP Q1⁃UL Q1⁃UP Q1⁃UL Q1⁃UP Q1⁃UL Q1⁃UP
0.2% 1.1% 0.2% 5.4% 0.4% 2.6% 0.4% 6.1%

PI Q1 Q1 Q1 Q1

Q1⁃LL Q1⁃LP Q1⁃LL Q1⁃LP Q1⁃LL Q1⁃LP Q1⁃LL Q1⁃LP
97.0% 1.7% 86.0% 8.5% 92.7% 4.3% 86.4% 7.0%

Annexin V
细胞分别转染pcDNA⁃NC和pcDNA⁃p16，转染6 h后换液，分别给予替格瑞洛和ox⁃LDL处理。48 h后，细胞进行后续处理。A：CCK8实验
检测细胞活力；B：EdU实验检测细胞增殖能力（×200）及计量统计，红色代表EdU阳性细胞，Hoechst代表所有细胞的细胞核，粉色代表EdU阳
性细胞与Hoechst标记的细胞的重合；C：小室迁移实验检测细胞迁移能力（×200）及计量统计，蓝紫色代表迁移到小室外膜的细胞；D：流式凋
亡实验检测细胞凋亡情况。两组比较，P < 0.01。
*
图4 p16过表达抑制替格瑞洛对HUVECs活力、增殖、迁移及凋亡的影响
Figure 4 Overexpression of p16 inhibited the role of ticagrelor on the vitality，proliferation，migration and apoptosis of the
HUVEC

现与对照组相比，DNMT1敲除可以有效降低p16启 DNMT1/p16信号通路的影响，通过Real⁃time PCR和

动子区的甲基化水平（图 5G）。综上所述，DNMT1 Western blot 实验分别检测 p16 表达情况，发现 shD⁃
可抑制HUVEC中p16的表达。 NMT1可以部分逆转替格瑞洛对ox⁃LDL诱导的HU⁃

2.7 替格瑞洛通过调控 DNMT1/p16 信号通路影响 VEC p16表达的抑制（P < 0.01，图6A、B）。
ox⁃LDL诱导的HUVEC损伤 为研究 DNMT1/p16 信号通路对替格瑞洛功能
为研究替格瑞洛对 ox⁃LDL 诱导的 HUVEC 中 的影响，通过CCK8、EdU、Transwell等实验分别检测