Page 34 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第2期
·176 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年2月
mRNA相对表达量 3.0 * shDNMT1 - + + - - 18 kDa nm ) ( 450 0.8 * * *
A 4.0 * * B Ti.(μmol/L)- + 40 40 C 1.2 *
+
+
ox⁃LDL -
-
1.0
shNC +
-
+
0.6
2.0
p16
0.4
p16 1.0 0 β⁃actin 42 kDa D 0.2 0
ox⁃LDL - + + + ox⁃LDL - + + + +
Ti.(μmol/L)- - 40 40 Ti.(μmol/L)- - 40 40 40
shNC + + + - shNC + + + - -
shDNMT1 - - - + shDNMT1 - - - + +
shp16 - - - - +
D
ox⁃LDL - + + + +
Ti.(μmol/L) - - 40 40 40
shNC + + + - -
shDNMT1 - - - + +
shp16 - - - - +
( % ) 20 * * *
EdU 15 *
EdU 阳性细胞百分比 10 5
Hoechst ox⁃LDL - + + + +
0
Ti.(μmol/L)- - 40 40 40
shNC + + + - -
shDNMT1 - - - + +
Merge shp16 - - - - +
E ox⁃LDL - + + + + 300 *
Ti.(μmol/L) - - 40 40 40
* *
shNC + + + - - *
细胞数
shDNMT1 - - - + + 200
shp16 - - - - + 100
0
ox⁃LDL - + + + +
Ti.(μmol/L)- - 40 40 40
shNC + + + - -
shDNMT1 - - - + +
shp16 - - - - +
F ox⁃LDL - + + + +
Ti.(μmol/L) - - 40 40 40
shNC + + + - -
shDNMT1 - - - + +
shp16 - - - - +
Q1⁃UL Q1⁃UP Q1⁃UL Q1⁃UP Q1⁃UL Q1⁃UP Q1⁃UL Q1⁃UP Q1⁃UL Q1⁃UP
0.0% 0.6% 0.3% 5.6% 0.0% 2.7% 0.2% 6.2% 0.0% 2.7%
PI
Q1 Q1 Q1 Q1 Q1
Q1⁃LL Q1⁃LP Q1⁃LL Q1⁃LP Q1⁃LL Q1⁃LP Q1⁃LL Q1⁃LP Q1⁃LL Q1⁃LP
98.3% 1.1% 88.6% 5.5% 94.7% 2.6% 87.7% 5.9% 94.2% 3.0%
Annexin V
细胞分别转染shDNMT1、shp16以及相关对照,转染6 h后换液,分别给予替格瑞洛和ox⁃LDL处理。48 h后,细胞进行后续处理。A:qPCR
实验检测p16的mRNA丰度;B:蛋白免疫印迹实验检测p16的蛋白量;C:CCK8实验检测细胞活力;D:EdU实验检测细胞增殖能力(×200)及计量统
计,红色代表EdU阳性细胞,Hoechst代表所有细胞的细胞核,粉色代表EdU阳性细胞与Hoechst标记的细胞的重合;E:小室迁移实验检测细胞迁
移能力(×200)及计量统计,蓝紫色代表迁移到小室外膜的细胞;F:流式凋亡实验检测细胞凋亡情况。β⁃actin为内参。两组比较,P < 0.01。
*
图6 DNMT1/p16通路调控ox⁃LDL诱导的HUVECs损伤
Figure 6 DNMT1/p16 pathway regulated the damage of HUVECs induced by ox⁃LDL