Page 50 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第2期
·192 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年2月

A 3 ** B 250 ** * **
miR⁃497⁃5p 相对表达水平 2 1 （ % ） 细胞活力 200
150
100

0 50
0
NG HG
HG+miR⁃497⁃5p
HG+mimics NC+
HG+mimics NC OE⁃VIM⁃AS1 HG+OE⁃VIM⁃AS1+
mimics+vector
miR⁃497⁃5p mimics
+vector
C **
HG+mimics NC HG+mimics NC+ HG+miR⁃497⁃5p HG+OE⁃VIM⁃AS1+ 30 *
+vector OE⁃VIM⁃AS1 mimics+vector miR⁃497⁃5p mimics
10 7 10 7 10 7 10 7 （ % ） ***
11.77% 8.95% 2.29% 4.08% 5.94% 7.20% 13.21% 9.56% 20
10 6 10 6 10 6 10 6
10 5 10 5 10 5 10 5 细胞凋亡 10
4 10 4 10 4 10 4
10
PI 10 3 10 3 10 3 0
HG+miR⁃497⁃5p
HG+mimics NC+
10 3
mimics+vector
0 69.25% 10.03% 0 89.79% 3.84% 0 69.44% 17.42% 0 67.20% 10.03% +vector
4
6
2
2
5
3
4
6
6
5
4
5
2
3
3
3
2
4
6
5
10 10 10 10 10 10 7 10 10 10 10 10 10 7 10 10 10 10 10 10 7 10 10 10 10 10 10 7 HG+mimics NC OE⁃VIM⁃AS1 HG+OE⁃VIM⁃AS1+
Annexin V miR⁃497⁃5p mimics
D HG+mimics NC+ HG+mimics NC+ HG+miR⁃497⁃5p HG+OE⁃VIM⁃AS1+
vector OE⁃VIM⁃AS1 mimics+vector miR⁃497⁃5p mimics
80 *
（ % ） 60 ** *
h
细胞迁移 20
0 40
0
HG+miR⁃497⁃5p
HG+mimics NC+
mimics+vector
miR⁃497⁃5p mimics
+vector
h HG+mimics NC OE⁃VIM⁃AS1
24 HG+OE⁃VIM⁃AS1+
A：采用qRT⁃PCR检测HG处理后ARPE⁃19细胞中miR⁃497⁃5p的表达；B：CCK8实验检测细胞增殖；C：流式细胞术检测细胞的凋亡情况；
D：伤口愈合实验检测细胞迁移情况。两组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
***
*
**
图3 miR⁃497⁃5p过表达逆转lncRNAVIM⁃AS1过表达对HG处理的ARPE⁃19细胞表型的影响
Figure 3 miR⁃497⁃5p overexpression reverses the effect of lncRNA VIM⁃AS1 overexpression on the phenotype of HG⁃treat⁃
ed ARPE⁃19 cells
显示转染 sh⁃FBXW7 抑制了 FBXW7 蛋白在 ARPE⁃ 少［（19.43±4.02）%，t=4.636，P=0.009，图 5D］。伤口
19 细胞中的表达（0.21±0.08，t=4.590，P=0.010，图 愈合实验结果表明，miR⁃497⁃5p 的敲低促进了 HG
5B）。CCK⁃8检测实验的结果显示miR⁃497⁃5p的敲 处理的 ARPE⁃19 细胞的迁移［（62.30±7.48）%，t=
低促进了 HG 处理的 ARPE⁃19 细胞的细胞活性 4.471，P=0.011］，抑制 FBXW7而能够逆转细胞迁移
［（183.05 ± 22.38）% ，t=6.269，P=0.003］。 抑 制 的增多［（45.42±6.13）%，t=3.024，P=0.039，图 5E］。
FBXW7 可以逆转敲低 miR⁃497⁃5p 导致的细胞活性 因此，敲低miR⁃497⁃5p 促进了 ARPE⁃19 细胞的增殖
增加［（91.02±22.38）%，t=6.128，P=0.004，图 5C］。 和迁移，并通过调节FBXW7的表达抑制细胞凋亡。
此外，如图 5D 所示，转染 miR⁃497⁃5p inhibitor 导致
HG 处理的 ARPE⁃19 细胞凋亡减少［（7.79±1.66）%， 3 讨 论
t=9.309，P < 0.001］。转染 sh⁃FBXW7后则可逆转转 DM 是一种高发的慢性病，其病理和生理的改
染miR⁃497⁃5p inhibitor导致的ARPE⁃19细胞凋亡减 变能够引起一系列并发症，对人类健康构成巨大威