Page 30 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第3期
·320 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年3月

results showed that the proliferation ability of A549 and H1650 cells in si⁃CCT2 group was significantly lower than that in the si⁃
NC group 48 hours after siRNA transfection（P < 0.05）. The results of cell scratch test showed that the migration rate of A549 and
H1650 cells in the si⁃CCT2 group was lower than that in the si⁃NC group 24 hours after siRNA transfection（P < 0.05）. Conclusion：
The expression levels of CCT2 in lung adenocarcinoma cells and tissues increases. Knocking down its expression can inhibit the
proliferation and migration of A549 and H1650 lung adenocarcinoma cells.
［Key words］ lung adenocarcinoma；CCT2；proliferation；migration
［J Nanjing Med Univ，2023，43（03）：319⁃325］

肺腺癌是非小细胞肺癌的主要组织学类型，近 海吉玛公司），Lipo⁃fectamine 2000（英杰生命技术
TM
年来，肺腺癌的发病率增长明显快于肺鳞癌，约占 有限公司，美国），CCK⁃8 溶液、RIPA 裂解液及 BCA
肺癌的40% 。由于肺腺癌起病隐匿，大部分肺腺癌 试剂（上海碧云天公司），兔抗 CCT2、GAPDH 抗体、
［1］
［2］
患者确诊时已经处于晚期，5 年生存率不足 20% 。 鼠抗兔二抗（Abcam公司，美国）。
尽管目前肺腺癌的化疗、放疗、靶向治疗和免疫治 1.2 方法
疗研究进展迅速，但 5 年生存率仍然相对较低 。 1.2.1 数据库分析
［3］
因此，最重要的是研究肺腺癌发生、发展的潜在机 GEPIA 网站（http：//gepia2.cancer⁃pku.cn/#help）
制，探寻诊断和治疗的基因靶标。 包括癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas，

含伴侣素的无尾复合多肽（the chaperonin con⁃ TCGA）数据库和基因型⁃组织表达（Genotype⁃Tissue
taining tailless complex polypeptide，CCT）蛋白是一类 Expression，GTEx）数据库，这两个数据库分别含有
含 T 复合多肽 1（T⁃complex polypeptide，TCP⁃1）的伴 癌症患者的基因表达数据和正常人体组织的基因
侣蛋白，是真核细胞胞质中唯一的伴侣素分子，参与 表达数据。使用该网站对 TCGA 数据库和 GTEx 数
约10%的蛋白质折叠 。分子伴侣家族是一类在细 据库中483例肺腺癌患者的数据和正常组织数据进
［4］
胞内能够协助其他多肽进行折叠、组装、转运、降解 行汇总分析，比较肺腺癌组织和正常组织中 CCT2
的蛋白，并在 DNA 的复制、转录、细胞骨架功能、细 表达的差异，并使用 Kaplan⁃Meier 方法分析肺腺癌
［5］
胞内信号转导等方面发挥着重要功能 。CCT属于 患者的总生存率。
Ⅱ型伴侣素，是目前真核细胞胞浆中发现的唯一伴 1.2.2 免疫组化检测
侣素，伴侣素与包括癌症在内的多种疾病有关 。 选取 2018 年 3 月—2019 年 12 月江阴市人民医
［6］
CCT2（chaperonin containning TCP1，subunit2）是CCT 院病理科收集的 72 例Ⅰ~Ⅳ期肺腺癌手术标本，本
家族中的一个分子亚型，越来越多的研究报道CCT2 研究经过江阴市人民医院伦理委员会审核批准。
在乳腺癌中异常表达，介导乳腺癌细胞增殖，并决定 入选标准：①患者未进行放化疗；②患者没有其他
乳腺癌患者的预后 。在大肠癌中，乏氧环境促进 恶性肿瘤。根据国际抗癌联盟 TNM 分期第八版对
［7］
［9］
CCT2 与胶质瘤相关癌基因同源物⁃2（glioma associ⁃ 患者进行分期 。所有标本均经4% 甲醛溶液固定，
ated oncogene homolog 2，GLI⁃2）相互作用，调节蛋白 常规石蜡包埋，4 μm 厚切片。每个标本切片3张，分
质的折叠，影响患者的预后，抑制CCT2可抑制肿瘤 为阳性对照和空白对照。组织切片在 70 ℃烘箱中
细胞的增殖和侵袭 ，但 CCT2 在肺癌中尚未见报 烘烤，置于二甲苯、乙醇中分别脱蜡，切片放入柠檬
［8］
道。本研究通过免疫组化检测肺腺癌细胞和肺腺癌 酸盐缓冲液（pH 6.0）用电磁炉进行抗原修复，加一
组织中CCT2的表达，并分析其与肺腺癌临床病理学 抗（CCT2，1∶250），4 ℃湿盒内过夜，加与一抗相对应
特征的关系，研究CCT2对肺腺癌发生、发展及预后的 的二抗，37 ℃孵育 30 min，DAB 显色，苏木精复染，
影响，为寻找肺腺癌治疗的新靶点提供新思路。 1%盐酸分化，碳酸锂返蓝，乙醇梯度脱水，二甲苯脱
水，烤箱烘干，中性树胶封片。由两位资深病理医
1 材料和方法
师在双盲法下独立计数，根据染色程度进行评
1.1 材料 分。-：细胞基本不着色；+：细胞染色阳性百分比≤
®
Trizol 试剂、逆转录试剂盒、SYBR Green Mix 10%或细胞染色呈弱阳性且所占百分比≤30%；++：
（南京维诺赞生物科技有限公司），CCT2 siRNA（上 细胞染色强度中等到强阳性，阳性染色细胞百分比