Page 60 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第4期
·498 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年4月
A C
NEAT1⁃WT 5′⁃gcACC⁃⁃⁃⁃UUU⁃⁃⁃⁃GCUGGUGCUg⁃3′ CSPG4⁃WT 5′⁃gaAGCUAUUUAACAUGGUGCUg⁃3′
miR⁃29c⁃3p 5′⁃auUGGCUAAAGUUUACCACGAu⁃3′ miR⁃29c⁃3p 5′⁃auUGGCUAAAGUUUACCACGAu⁃3′
NEAT1⁃MUT 5′⁃gcACC⁃⁃⁃⁃UUU⁃⁃⁃⁃⁃GCUCGUCCUg⁃3′ CSPG4⁃MUT 5′⁃gaAGCUAUUUAACAUCGUCCUg⁃3′
B D
1.5 miR⁃NC 1.5 miR⁃NC
miR⁃29c⁃3p mimic
荧光素酶相对活性 1.0 * 荧光素酶相对活性 1.0 *
miR⁃29c⁃3p mimic
0.5
0.5
0 0
NEAT1⁃WT NEAT1⁃MUT CSPG4⁃WT CSPG4⁃MUT
A:miR⁃29c⁃3p与lnc⁃NEAT的靶向预测结果;B:miR⁃29c⁃3p与lnc⁃NEAT的双荧光素酶报告基因检测结果;C:miR⁃29c⁃3p与CSPG4的靶向
预测结果;D:miR⁃29c⁃3p与CSPG4的双荧光素酶报告基因检测结果;与miR⁃NC相比,P < 0.05;n=6。
*
图4 靶基因预测和细胞中的荧光素酶活性
Figure 4 The target gene prediction and luciferase activity in cells
A si⁃NC组
si⁃NEAT1组
si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC组 C
0.8
si⁃NEAT1+miR⁃29c⁃3p inhibitor组 &Δ
( g ) 0.6 * *
肿瘤重量 0.4
B ● si⁃NC组 ■ si⁃NEAT1组 0.2
si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC组
▲ 0
si⁃NEAT1+miR⁃29c⁃3p inhibitor组
si⁃NEAT1+miR⁃29c⁃3p inhibitor组
▲
600 si⁃NC组 si⁃NEAT1组
( mm 3 ) 400 ● ▲ ● ▲ &Δ * si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC组
肿瘤体积 200 ● ▲ ■ ▲● ■ ▲ ■
▲
▲
■
0
1 2 3 4 5
时间(周)
A:裸鼠肿瘤图像;B:肿瘤体积;C:肿瘤重量;与 si⁃NC 组相比,P < 0.05;与 si⁃NEAT1 组相比,P < 0.05;与 si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC 组相
*
&
比,P < 0.05;n=5。
∆
图5 敲低NEAT1对裸鼠移植瘤生长的影响
Figure 5 Effect of knockdown of NEAT1 on the growth of xenografted tumors in nude mice
2.9 敲低 NEAT1 对裸鼠移植瘤中 Ki⁃67 阳性表达
3 讨 论
的影响
与si⁃NC组相比,si⁃NEAT1组肿瘤组织中Ki⁃67 MM 是最具侵袭性的皮肤恶性肿瘤类型,其转
阳性表达显著降低(P < 0.05);与 si⁃NEAT1 组、 移能力和病死率高,严重影响人类健康。阐明复杂
si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC 组相比,si⁃NEAT1+miR⁃29c⁃ 的分子机制对寻找治疗MM的新型生物靶点至关重
3p inhibitor 组肿瘤组织中 Ki⁃67 阳性表达显著升高 要。lncRNA 通过调节肿瘤相关基因或通路充当癌
(P < 0.05,图7)。 基因或肿瘤抑制基因 。本研究阐明了 lnc⁃NEAT1
[9]