Page 60 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 60

第43卷第4期
               ·498 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2023年4月


              A                                                  C
                  NEAT1⁃WT 5′⁃gcACC⁃⁃⁃⁃UUU⁃⁃⁃⁃GCUGGUGCUg⁃3′          CSPG4⁃WT  5′⁃gaAGCUAUUUAACAUGGUGCUg⁃3′
                  miR⁃29c⁃3p 5′⁃auUGGCUAAAGUUUACCACGAu⁃3′            miR⁃29c⁃3p 5′⁃auUGGCUAAAGUUUACCACGAu⁃3′
                 NEAT1⁃MUT 5′⁃gcACC⁃⁃⁃⁃UUU⁃⁃⁃⁃⁃GCUCGUCCUg⁃3′         CSPG4⁃MUT  5′⁃gaAGCUAUUUAACAUCGUCCUg⁃3′

              B                                                  D
                            1.5   miR⁃NC                                      1.5   miR⁃NC
                                                                                    miR⁃29c⁃3p mimic
                          荧光素酶相对活性  1.0  *                                   荧光素酶相对活性  1.0  *
                                  miR⁃29c⁃3p mimic

                                                                              0.5
                            0.5
                             0                                                 0
                               NEAT1⁃WT  NEAT1⁃MUT                               CSPG4⁃WT  CSPG4⁃MUT
                 A:miR⁃29c⁃3p与lnc⁃NEAT的靶向预测结果;B:miR⁃29c⁃3p与lnc⁃NEAT的双荧光素酶报告基因检测结果;C:miR⁃29c⁃3p与CSPG4的靶向
              预测结果;D:miR⁃29c⁃3p与CSPG4的双荧光素酶报告基因检测结果;与miR⁃NC相比,P < 0.05;n=6。
                                                                        *
                                             图4 靶基因预测和细胞中的荧光素酶活性
                                    Figure 4 The target gene prediction and luciferase activity in cells




                    A                    si⁃NC组
                                      si⁃NEAT1组
                             si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC组                        C
                                                                                0.8
                       si⁃NEAT1+miR⁃29c⁃3p inhibitor组                                               &Δ
                                                                               ( g )  0.6  *    *
                                                                               肿瘤重量  0.4


                    B                    ●  si⁃NC组  ■  si⁃NEAT1组                0.2
                                           si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC组
                                         ▲                                        0
                                                                                      si⁃NEAT1+miR⁃29c⁃3p inhibitor组
                                           si⁃NEAT1+miR⁃29c⁃3p inhibitor组
                                          ▲
                                    600                                            si⁃NC组 si⁃NEAT1组
                                   ( mm 3 )  400        ● ▲  ● ▲  &Δ *               si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC组
                                   肿瘤体积  200  ● ▲  ■ ▲●  ■   ▲ ■
                                                        ▲
                                                  ▲
                                            ■
                                     0
                                            1     2     3    4     5
                                                  时间(周)
                 A:裸鼠肿瘤图像;B:肿瘤体积;C:肿瘤重量;与 si⁃NC 组相比,P < 0.05;与 si⁃NEAT1 组相比,P < 0.05;与 si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC 组相
                                                             *
                                                                                  &
              比,P < 0.05;n=5。
                 ∆
                                             图5   敲低NEAT1对裸鼠移植瘤生长的影响
                           Figure 5  Effect of knockdown of NEAT1 on the growth of xenografted tumors in nude mice

              2.9  敲低 NEAT1 对裸鼠移植瘤中 Ki⁃67 阳性表达
                                                                3 讨     论
              的影响

                  与si⁃NC组相比,si⁃NEAT1组肿瘤组织中Ki⁃67                      MM 是最具侵袭性的皮肤恶性肿瘤类型,其转
              阳性表达显著降低(P < 0.05);与 si⁃NEAT1 组、                  移能力和病死率高,严重影响人类健康。阐明复杂

              si⁃NEAT1+inhibitor⁃NC 组相比,si⁃NEAT1+miR⁃29c⁃       的分子机制对寻找治疗MM的新型生物靶点至关重
              3p inhibitor 组肿瘤组织中 Ki⁃67 阳性表达显著升高                要。lncRNA 通过调节肿瘤相关基因或通路充当癌
             (P < 0.05,图7)。                                     基因或肿瘤抑制基因 。本研究阐明了 lnc⁃NEAT1
                                                                                   [9]
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