Page 68 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第4期
·506 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年4月

A Wild⁃type（WT）SSRP1 3′⁃UTR：5′⁃UUUCAUUUUGUAUUUCUGGUCUGUGAAAAU⁃3′
miR⁃27b⁃3p 3′⁃UTR： 3′⁃CGUCUUGAAUCGGUGACACUU⁃5′

Mutated（MUT）SSRP1 3′⁃UTR：5′⁃UUUCAUUUUGUAUUUCUGGUGACACUUAAU⁃3′
B C
1.5 1.5
对照组
mir⁃27b⁃3p mimic组
荧光素酶相对活性 1.0 SSRP1相对表达量 1.0

0.5
0.5
***
***
0 0
WT MUT 对照组 miR⁃27b⁃3p mimic组
A：在线数据库预测出 SSRP1 与 miR⁃27b⁃3p 的结合位点；B：将含有 SSRP1 野生型（WT）或 SSRP1 突变型（MUT）的荧光素酶报告质粒与
miR⁃27b⁃3p模拟物共转染，检测荧光素酶活性；C：RT⁃qPCR检测miR⁃27b⁃3p过表达后SSRP1 mRNA水平的变化。与对照组比较， P < 0.001（n=3）。
***
图3 SSRP1是miR⁃27b⁃3p的靶基因
Figure 3 SSRP1 is target gene of miR⁃27b⁃3p

A B 对照组
2.0 ▲ si⁃SSRP1⁃1组
si⁃SSRP1⁃2组
si⁃SSRP1⁃2组
对照组 si⁃SSRP1⁃1组 mn ） （ 450 1.5 ▲ **
1.0

SSRP1 81 kDa D 0.5 * * **
GAPDH 36 kDa
0
0 24 48 72 96 120
时间（h）
300
（ 个 ） 200
C
对照组 si⁃SSRP1⁃1组 si⁃SSRP1⁃2组
集落数目 100 *** ***

0
对照组
si⁃SSRP1⁃1组
si⁃SSRP1⁃2组
D
对照组 si⁃SSRP1⁃1组 si⁃SSRP1⁃2组
Q1 Q2 Q1 Q2 Q1 Q2
10 5 10 5 10 5
1.94% 7.67% 5.24% 20.10% 5.14% 21.40%
30 *** ***
10 4 10 4 10 4 （ % ） 20
细胞凋亡率 10
PI 3 PI 3 PI 3
10 10 10

0 Q4 Q3 0 Q4 Q3 0 Q4 Q3 0
si⁃SSRP1⁃2组
87.80% 2.62% 69.50% 5.18% 68.20% 5.33% 对照组
0 10 3 10 4 10 5 0 10 3 10 4 10 5 0 10 3 10 4 10 5 si⁃SSRP1⁃1组
FITC FITC FITC
A：Western blot检测SSRP1的干扰效率；B：干扰SSRP1后骨肉瘤细胞的增殖能力被抑制；C：干扰SSRP1显著降低骨肉瘤细胞集落形成能
力；D：干扰SSRP1后显著提高了骨肉瘤细胞凋亡率。与对照组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
*
**
***
图4 干扰SSRP1表达抑制骨肉瘤细胞的增殖并促进其凋亡
Figure 4 Silencing of SSRP1 inhibited cell proliferation and accelerated cell apoptosis in OS cells