Page 69 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第4期 段伟豪，俞学成，吴璟斌，等. miR⁃27b⁃3p通过靶向SSRP1调控骨肉瘤细胞的生长［J］.
2023年4月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（04）：502⁃509 ·507 ·

2.5 过表达 SSRP1 逆转了 miR⁃27b⁃3p 对骨肉瘤的 形成能力的抑制（图5B、C）。此外，流式细胞术结果
增殖作用 显示，过表达miR⁃27b⁃3p引起的骨肉瘤凋亡效应可
使用 Western blot 测定过表达效率（图 5A）。 以由过表达 SSRP1 部分逆转（图 5D）。结合以上结
CCK⁃8 实验和集落形成实验结果显示，过表达 果，证明了miR⁃27b⁃3p通过靶向抑制SSRP1的表达
SSRP1部分恢复了由miR⁃27b⁃3p过表达引起的集落 来调控骨肉瘤细胞的增殖和凋亡功能。

A B
对照组
2.0 ▲ miR⁃27b⁃3p mimic组
miR⁃27b⁃3p mimic+SSRP1组
miR⁃27b⁃3p mimic+SSRP1组
miR⁃27b⁃3p mimic组 mn ） 1.5 ▲ #
1.0
对照组 （ 450 ▲ # *
D
0.5 ▲ *
SSRP1 81 kDa *
0
GAPDH 36 kDa
0 24 48 72 96 120
时间（h） 400
C （ 个 ） 300 ##
对照组 miR⁃27b⁃3p mimic组 miR⁃27b⁃3p mimic+SSRP1组 200
集落数目 100 ***

0 对照组
miR⁃27b⁃3p mimic组
miR⁃27b⁃3p mimic+

D SSRP1组
20 ***
对照组 miR⁃27b⁃3p mimic组 miR⁃27b⁃3p mimic+SSRP1组
Q1 Q2 Q1 Q2 Q1 Q2
10 5 1.20% 7.94% 10 5 6.80% 13.90% 10 5 6.16% 10.30% （ % ） 15 ###

10 4 10 4 10 4 细胞凋亡率 10
PI PI PI 5
10 3 10 3 10 3
0
miR⁃27b⁃3p mimic+
0 0 0 对照组
Q4 Q4 Q4 Q3 Q4 Q3
89.90% 0.95% 75.00% 4.31% 82.00% 1.50% miR⁃27b⁃3p mimic组
0 10 3 10 4 10 5 0 10 3 10 4 10 5 0 10 3 10 4 10 5 SSRP1组
FITC FITC FITC
A：Western blot检测SSRP1的过表达效率；B：过表达SSRP1后部分恢复了miR⁃27b⁃3p对骨肉瘤细胞增殖的抑制；C：过表达SSRP1后部分
恢复了miR⁃27b⁃3p对骨肉瘤细胞集落形成能力的抑制；D：过表达SSRP1后部分恢复了miR⁃27b⁃3p对骨肉瘤细胞细胞凋亡的促进。与对照组
比较，P < 0.05， P < 0.001；与miR⁃27b⁃3p mimic组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
###
***
#
##
*
图5 过表达SSRP1表达部分逆转了miR⁃27b⁃3p对骨肉瘤细胞的抑制作用
Figure 5 Overexpression of SSRP1 partially reversed the inhibitory of miR⁃27b⁃3p on OS cells
瘤的发生发展密切相关 ［13-14，21］ 。目前，大量研究表
3 讨 论
明miR⁃27b⁃3p在多种恶性肿瘤中广泛下调，通过抑
骨肉瘤是青少年最常见的原发恶性骨肿瘤，由 制肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等能力发挥抑癌作
于缺乏有效的治疗方法，致死率和致残率居高不 用。在胃癌中，miR⁃27b⁃3p 显著下调，并通过靶向
下。近年来，大量研究证实，miRNA 已经成为许多 调节细胞周期G1到S期的转换1基因（GSPT1）抑制
类型肿瘤的新的生物标志物和治疗靶点 ［20］ 。而在 胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭 ［22］ 。miR⁃27b⁃3p也被
骨肉瘤发病机制的研究中，miRNA已被证实与骨肉 报道在乳腺癌细胞和组织中明显低表达，调节核受