Page 105 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第5期 李玮琪,马永洁,黄新惠,等. 莱菔硫烷对ox⁃LDL诱导血小板活化的抑制作用[J].
2023年5月 南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(5):684-690 ·687 ·
A 40 B 3 C 30
( % ) 30 ( ng/mL) 2 ( ng/mL) 20
CD62P表达量 20 **# 1 浓度 **# *** CCL5浓度 10 *# ***
##
##
10
0 PF4 0 0
静息组 对照组 1.0 2.5 5.0 静息组 对照组 1.0 2.5 5.0 静息组 对照组 1.0 2.5 5.0
SFN(μmol/L)
SFN(μmol/L)
SFN(μmol/L)
与对照组比较,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001;与1.0 μmol/L SFN组比较,P < 0.05,P < 0.01(n=3)。
***
**
##
*
#
图1 不同浓度的SFN对50 μg/mL ox⁃LDL诱导的血小板表面CD62P的表达(A)以及PF4和(B)CCL5(C)释放的影响
Figure 1 Effects of SFN of different levels on platelet CD62P expression(A)and PF4(B)and CCL5 release induced(C)by
ox⁃LDL(50 μg/mL)
度的 SFN 比 1.0 μmol/L 浓度对 Src 和 Syk 磷酸化水 (P < 0.001,图2E),说明SFN抑制总ROS生成受Src/
平和 ROS 生成的抑制作用更加显著(P < 0.05),但 Syk 信号通路的调控作用。以上结果说明 SFN 可
2.5 μmol/L 和 5.0 μmol/L 两浓度间差异无统计学意 抑制 ox⁃LDL 诱导的血小板 Src/Syk/ROS 信号通路
义(P > 0.05)。ROS 的清除剂 N⁃乙酰半胱氨酸 的活化。
(NAC)对 ox⁃LDL 诱导 ROS 生成的抑制作用比 SFN 2.3 SFN经Src/Syk/ROS信号通路调控ox⁃LDL诱导
(5.0 μmol/L)更为显著(P < 0.05,图 2D),但两者联 的血小板活化的影响
合使用时未见协同效果(P > 0.05)。此外,Src家族 Src家族蛋白激酶抑制剂PP2可显著抑制ox⁃LDL
激酶激活剂MLR⁃1023(1.0 μmol/L)可完全逆转 SFN 诱导的血小板CD62P的表达、PF4和CCL5释放(P <
对 ox⁃LDL 诱导的血小板总 ROS 生成的抑制作用 0.001,图3A~C),且PP2的抑制效果与5.0 μmol/L 浓
静息组 对照组 1.0 2.5 5.0 静息组 对照组 1.0 2.5 5.0
A B
SFN(μmol/L)
SFN(μmol/L)
p⁃Src 60 kDa p⁃Syk 72 kDa
GAPDH 37 kDa GAPDH 37 kDa
3.0 3.0
Src磷酸化相对表达 ( p⁃Src/GAPDH) 1.5 *# *** Syk磷酸化相对表达 ( p⁃Syk/GAPDH) 1.5 *# *#
2.0
2.0
##
1.0
1.0
0.5
0.5
0
静息组 对照组 1.0 2.5 5.0 0 静息组 对照组 1.0 2.5 5.0
SFN(μmol/L)
SFN(μmol/L)
C D E
8 ) 8 8 △△△
( ×10 4 6 ( ×10 4 ) 6 ( ×10 4 ) 6 △△△
2 荧光强度 4 **# *** ROS荧光强度 4 *** ROS荧光强度 4 ***
###
0 ROS 2 0 ***△ ***△ 2 0
静息组 对照组 1.0 2.5 5.0 静息组 对照组 NAC 静息组 对照组 MLR⁃1023
SFN+NAC
5 μmol/L SFN
5 μmol/L SFN
SFN+MLR⁃1023
SFN(μmol/L)
A:Src磷酸化相对表达情况;B:Syk磷酸化相对表达情况;C:ROS生成情况;D:NAC作用后ROS生成情况;E:MLR⁃1023作用后ROS生成
情况。与对照组比较,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001;与 1.0 μmol/L SFN 组比较,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001;与 5 μmol/L SFN 组比较,
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**
*
***
##
#
P < 0.05, P < 0.001(A、B:n=3;C、D:n=4)。
△ △△△
图2 不同浓度的SFN对50 μg/mL ox⁃LDL诱导的血小板Src/Syk/ROS信号通路活化的影响
Figure 2 Effects of SFN of different levels on ox⁃LDL(50 μg/mL)induced platelet Src/Syk/ROS signalling pathway