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第43卷第5期 赵舒怡,裘冯卓,史明超,等. 自体外周单核细胞治疗肌萎缩侧索硬化疗效及外周淋巴细胞变化观察[J].
                  2023年5月                     南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(5):701-707                        ·705 ·


                10 个,第14天细胞数为(1.24±0.22)×10 个,均低于                (CD8 、CD4 CD25 Foxp3 Treg)之间的相关性,本文
                                                                                        +
                                                                            +
                                                   4
                  4
                                                                                  +
                                                                       +
                PBMC组(P < 0.001)。                                 分析了PBMC组中患者在治疗前、治疗后第5天和第
                2.4.4 PBMC治疗前后CD16 CD56 NK细胞变化                    14天时外周血中CD8 T细胞、CD4 CD25 Foxp3 Treg
                                              +
                                                                                                            +
                                         +
                                                                                     +
                                                                                                 +
                                                                                                      +
                    PBMC 组 患 者 治 疗 前 1 mL 外 周 血 中 CD16       +    细胞数与ALSFRS⁃R评分间的相关性。患者在PBMC
                CD56 NK 细胞数量为(13.20±1.10)×10 个,接受                 治疗后第5天和第14天时,CD8 T细胞数量与ALS⁃
                     +
                                                     4
                                                                                              +
                PBMC 治疗后第 5 天细胞数为(16.60±2.41)×10 个,               FRS⁃R分呈负相关,在观察时间内,随外周血中CD8                    +
                                                          4
                第 14 天细胞数为(15.80±2.86)×10 个;对照组患者                 T细胞数量增加,患者的ALSFRS⁃R分呈下降趋势;在
                                               4
                治疗前 1 mL 外周血中 CD16 CD56 NK 细胞数量为                  PBMC治疗后第5天和第14天时,CD4 CD25 Foxp3               +
                                                                                                    +
                                               +
                                         +
                                                                                                          +
               (12.90±1.56)×10 个,接受对照治疗后第5天细胞数                    Treg细胞数量与ALSFRS⁃R分呈正相关,即随外周血
                               4
                                  4                                     +    +     +
                为(13.00±1.82)×10 个,第 14 天细胞数为(11.30±              中CD4 CD25 Foxp3 Treg细胞数量增加,患者的ALS⁃
                1.74)×10 个。CD16 CD56 NK 细胞数治疗前、治疗                 FRS⁃R 分呈上升趋势。PBMC 治疗后第 5 天和第
                                       +
                        4
                                  +
                后第 5 天和第 14 天两组患者间均无明显差异(P>                       14 天,CD8 T 细胞和 CD4 CD25 Foxp3 Treg 细胞与
                                                                                               +
                                                                                                    +
                                                                            +
                                                                                         +
                0.05);两组患者治疗后第5天和第14天细胞数与治                        ALSFRS⁃R相关性有统计学意义(P < 0.05,图3)。
                疗前相比,均无明显差异(P>0.05,图2D)。
                                                                  3  讨 论
                2.5  外周免疫细胞表型与ALSFRS⁃R评分相关性
                    为了评估 ALSFRS⁃R 评分和 T 细胞亚群变化                        经体外扩增的自体PBMC回输治疗后短时间内
                A                       B                        C                       D
                          PBMC组                    PBMC组                   PBMC组                   PBMC组
                          对照组                      对照组                     对照组                     对照组
                      80                      80       *#           FoxP3 +  20  **##  **##  NK细胞数  20
                   CD4 + 细胞数  ( ×10 4 个/mL )  60  CD8 + 细胞数  ( ×10 4 个/mL )  60  *#  CD25 +  ( ×10 4 个/mL )  15  CD56 +  ( ×10 4 个 )  15
                                                                       10
                                                                                               10
                      40
                                              40
                      20
                       0                      20 0                  CD4 +  细胞数  5 0         CD16 +  5 0
                           0    5   14             0    5   14             0    5    14            0    5    14
                             时间(d)                   时间(d)                    时间(d)                   时间(d)
                                  与治疗前(0 d)比较,P<0.05,P<0.001;与对照组同时间点比较,P<0.05,P<0.001。
                                                *
                                                                               #
                                                                                      ##
                                                       **
                                        图2  ALS患者PBMC组和对照组治疗前后淋巴细胞亚群变化
                Figure 2  Changes of lymphocyte subsets in ALS patients before and after treatment in the PBMC group and the placebo
                        group
                              治疗前                          治疗后第5天                         治疗后第14天
                   ( 分 )  30                      ( 分 )  40                        ( 分 )  35
                   ALSFRS⁃R评分  26     P=0.597     ALSFRS⁃R评分  30      P=0.029      ALSFRS⁃R评分  25      P=0.044
                    28
                                                   35
                                                                                   30
                                      r=-0.149
                                                                      r=-0.562
                                                                                                       r=-0.526
                    24
                                                   25
                    22
                      10   20   30  40   50        20 30  40  50  60  70  80       20 10  20  30  40  50  60
                        CD8 细胞数(×10 个/mL)              CD8 细胞数(×10 个/mL)               CD8 细胞数(×10 个/mL)
                                                                  4
                           +
                                   4
                                                                                                  4
                                                          +
                                                                                          +
                              治疗前                          治疗后第5天                         治疗后第14天
                   ( 分 )  30                       ( 分 )  40                       ( 分 )  35
                    28
                   ALSFRS⁃R评分  26      P=0.337     ALSFRS⁃R评分  30     P=0.015      ALSFRS⁃R评分  25     P=0.040
                                                    35
                                                                                   30
                    24
                                                                      r=0.613
                                                                                                      r=0.536
                                       r=0.266
                                                    25
                    22
                    20
                      0.0  0.5  1.0  1.5  2.0       20 10  12  14  16  18  20      20  8  10  12  14  16  18  20
                        CD4 CD25 FoxP3 细胞数             CD4 CD25 FoxP3 细胞数              CD4 CD25 FoxP3 细胞数
                                                                                              +
                                                                                          +
                                                                   +
                               +
                                                                                                   +
                                    +
                                                          +
                          +
                                                               +
                           (×10 个/mL)                      (×10 个/mL)                      (×10 个/mL)
                                                               4
                               4
                                                                                              4
                                               +
                                                          +
                                                               +
                                                     +
                               图3 PBMC组CD8 和CD4 CD25 FoxP3 Treg细胞数与ALSFRS⁃R评分间的相关性
                  Figure 3  Correlation between CD8 and CD4 CD25 FoxP3 Treg cell counts and ALSFRS⁃R score in the PBMC group
                                              +
                                                      +
                                                                +
                                                           +
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