Page 120 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第5期
·702 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年5月

cases）received only 20% human albumin（100 mL）. The revised ALS Functional Rating Scale（ALSFRS⁃R）was scored before and on
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the day 5 and day 14 after the treatment. The number of CD4 T cells，CD8 T cells，CD4 CD25 Foxp3 Treg cells，and CD16 CD56 +
NK cells in peripheral blood were measured. Results：①The ALSFRS⁃R scores in PBMC group were significantly higher on the 5th day
（30.1 ± 3.4 points）and the 14th day（26.5 ± 2.0 points）after treatment than that before treatment（25.3 ± 1.4 points）（P < 0.05）. There
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was no significant difference in ALSFRS⁃R score before and after treatment in the control group（P > 0.05）；②CD8 T cells and CD4 +
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CD25 Foxp3 Treg cells in PBMC group were increased on the 5th and 14th day after treatment，which were significantly higher than
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those in control group and PBMC group before treatment（P < 0.05）. There was no statistical significance in CD4 T cells and CD16 +
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CD56 NK cells before and after treatment in PBMC group and compared with the control group（P > 0.05）. Also there was no
statistical significance in all the changes of the above in control group before and after treatment（P > 0.05）；③At the 5th and 14th day
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after PBMC treatment，the number of CD8 T cells was negatively correlated with the ALSFRS⁃R score（P < 0.05）；The number of CD4
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CD25 Foxp3 Treg cells was positively correlated with the ALSFRS ⁃ R score（P < 0.05）. Conclusion：The reinfusion therapy of
autologous PBMC expanded in vitro can improve the clinical symptoms of ALS patients in a short time，and the changes in the number
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of CD8 T cells and CD4 CD25 Foxp3 Treg cells in peripheral blood are correlated to the clinical progression of the disease.
［Key words］ amyotrophic lateral sclerosis；lymphocytesubsets；peripheral blood mononuclear cell；revised amyotrophic lateral sclero⁃
sis functional rating scale；immunity
［J Nanjing Med Univ，2023，43（05）：701⁃707］
肌萎缩侧索硬化（amyotrophic lateral sclerosis， 其在治疗前后不同时间点临床症状与外周血淋巴
ALS）是一种成人致命的神经退行性疾病，涉及皮层、 细胞亚群间的变化关系。细胞亚群方面主要观察
脑干和脊髓的上、下运动神经元进行性丢失，通常在 了 CD4 T 细胞、CD8 T 细胞、CD4 CD25 Foxp3 Treg
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症状出现后的3~5年内因呼吸肌麻痹死亡 ［1-2］ 。ALS 细胞、CD16 CD56 自然杀伤（natural killer，NK）细胞
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发病机制未明，神经炎症被归为ALS 病情发展的重 的数量变化，现将结果报道如下。
要原因，其中外周免疫系统起到关键作用。有研究
1 对象和方法
表明，ALS 患者外周血中的CD4 T 淋巴细胞水平降
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低，其中调节性 T 细胞（T regulatory cell，Treg）的比 1.1 对象
［3］
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例与 ALS 的疾病进展呈负相关 ；外周血中 CD8 T 本研究选取了 2019 年 10 月—2021 年 8 月在南
细胞的数量变化存在争议，可能与个体变异性有 京医科大学附属逸夫医院神经内科和南京中医药
关 ［4-6］ 。然而，外周免疫系统在ALS进展中的具体作 大学附属南京医院神经内科诊治的病例，分别来自江
用尚不清楚，并且最近发现ALS 患者血液和脑脊液 苏、安徽、福建、上海、浙江等地，起病年龄32~69岁。
中免疫和细胞因子谱的结果并不完全一致 ［7-11］ 。在 所有病例经过至少2名具有3~5年ALS诊疗经验的
ALS小鼠模型中，Treg的减少助长了神经炎症过程， 神经内科主治医师诊断，均严格按照 EI Escorial 诊
降低了运动神经元的存活率且加速其死亡，被动进 断标准进行确诊。最终入选65例患者，根据随机表
行 Treg 细胞输入可抑制神经炎症和延长小鼠存活 领取随机号码，随机分为两组：接受回输体外扩增
时间；从ALS 患者中分离功能失调的Treg 细胞在体 自体细胞的 PBMC 组（PBMC 1×10 个/kg 体重+20％
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外扩增时加入白细胞介素⁃2（interleukin⁃2，IL⁃2）和 人体白蛋白100 mL，n=33）及对照组（20％人体白蛋
雷帕霉素刺激可以恢复 Treg 细胞功能 ［12］ ；近日，美 白100 mL，n=32）。分别在治疗前和治疗后第5、14天

国食品药品监督管理局（Food and Drug Administra⁃ 收集每位受试ALS患者的血液各5 mL。此外，记录
tion，FDA）授 予 一 种 自 体 扩 增 的 Treg 细 胞 疗 法 年龄、性别、疾病分期、体重指数（body mass index，
（ALS001）为ALS的孤儿药。以上提示，Treg细胞有 BMI）、疾病持续时间（从第 1 个症状到样本收集日
可能为ALS的治疗带来希望。 期之间的时间）、修订版 ALS 功能评定量表（revised
为了进一步探索外周免疫在 ALS 疾病进展中 ALS functional rating scale，ALSFRS⁃R）分数以及是否
的作用，本研究选取在体外扩增的自体外周血单核 使用利鲁唑治疗。本研究经南京中医药大学附属南
细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）回输 京医院医学伦理委员会批准（伦理号：2019⁃LS⁃
治疗后短期内临床症状显著改善的ALS 患者，观察 ky012），并知情同意，所有方法均按照相关指南和法