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第43卷第5期 陈天乐，姜 波，余 威，等. ZL006衍生物的设计、合成及神经保护活性研究［J］.
2023年5月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（5）：691-700，713 ·699 ·

胞培养板置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养24 h。 物在低剂量时依旧保持着一定活性。其中，化合物
用培养基稀释药物至所需工作液浓度（10.0 μmol/L， 5e 和 27a 表现出与 ZL006 相当的细胞保护活性，在
1.0 μmol/L，0.1 μmol/L），每孔加入 50 μL 相应的含 10 μmol/L的给药浓度下，化合物 5e的细胞保护率为
药培养基预孵育30 min后，于每孔（低对照孔除外） （51.24 ± 0.74）% ，化 合 物 27a 的 细 胞 保 护 率 为
加入谷氨酸（工作浓度5 mmol/L），将96孔细胞培养 （48.42 ± 1.01）%；而化合物 23 在 10 μmol/L 浓度下
板置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养24 h，再将96孔 表 现 出 略 优 于 ZL006 的 细 胞 保 护 活 性（54.34 ±
板进行 LDH 染色，λ=490 nm，测定吸光度。代入公 0.59）%，在 1 μmol/L 浓度下，化合物 23 则表现出

式：细胞损伤率=（D 实 验-D 低 对 照）/（D 高 对 照-D 低 对 照）× 远高于阳性对照化合物 ZL006（1）的细胞保护活
100%；细胞保护率=（模型组损伤率-实验组损伤 性［（29.58 ± 0.48）% vs.（16.43 ± 1.01）%］。此外，
率）/模型组损伤率×100%，计算得细胞保护率。 目标化合物 5e、27a 和 23 在 25 μmol/L给药浓度下，
对SH⁃SY5Y细胞均表现出较低的毒性（25 μmol/L时
2 结 果
3.55%、2.42%、2.85%），这提示该类化合物可作为安
大部分目标化合物在谷氨酸诱导的 SH⁃SY5Y 全有效的神经保护剂进行后续研究（表1）。
细胞损伤模型中表现出一定的保护活性，部分化合 根据细胞保护活性测试结果可知，将左侧疏水

表1 目标化合物对SH⁃SY5Y的细胞保护和抗增殖活性
Table 1 Thecytoprotective and antiproliferation activities against SH⁃SY5Y of target compounds（x ± s，n=3）
毒性（%） 细胞保护率（%） 毒性（%） 细胞保护率（%）
化合物 化合物
25 μmol/L 10.0 μmol/L 1.0 μmol/L 0.1 μmol/L 25 μmol/L 10.0 μmol/L 1.0 μmol/L 0.1 μmol/L
5a 4.76 22.43 ± 0.98 08.01 ± 0.42 7.37 ± 1.97 18c 4.15 12.50 ± 1.02 — —
5b 3.63 31.73 ± 0.98 05.12 ± 1.55 — 19 3.97 16.35 ± 0.73 00.97 ± 1.74 —
5c 3.81 03.20 ± 2.80 00.35 ± 1.92 4.62 ± 1.92 20 2.68 38.14 ± 0.44 14.75 ± 1.74 —
5d 3.63 12.45 ± 3.40 — — 23 2.85 54.34 ± 0.59 29.58 ± 0.48 1.93 ± 0.89
5e 3.55 51.24 ± 0.74 07.11 ± 0.89 — 25a 8.06 14.99 ± 2.37 — —
5f 2.85 22.06 ± 1.77 08.18 ± 1.92 — 25b 6.71 08.23 ± 4.07 11.17 ± 5.65 2.94 ± 2.10
5g 4.50 12.82 ± 0.70 08.33 ± 0.84 5.76 ± 2.95 25c 2.85 08.95 ± 3.67 03.20 ± 2.88 0.65 ± 1.46
9 2.42 14.08 ± 1.83 02.46 ± 1.13 — 27a 2.42 48.42 ± 1.01 10.13 ± 1.01 —
16 2.08 01.42 ± 2.21 04.62 ± 0.30 — 27b 2.25 07.91 ± 1.01 06.96 ± 1.01 1.90 ± 2.95
18a 2.85 28.07 ± 0.14 — — 29 2.85 00.35 ± 2.95 — —
18b 1.55 — — — 1 — 53.80 ± 1.73 16.43 ± 1.01 5.70 ± 1.30

端苯环上 C⁃2 位羟基移除（化合物 9）或替换成其他 27b）活性显著降低，这提示该处不宜引入体积过大
基团（化合物 16）活性显著下降；当 C⁃5 位氯原子替 的基团，而将连接链的氨基封闭后活性也显著降低
换为溴原子（化合物5a）或甲基（化合物5c）时，活性 （化合物29）。初步的构效关系分析（图9）为后续化
明显降低，提示C⁃2位的羟基和C⁃5位氯原子是活性 合物结构优化提供了参考，进一步的化合物优化正
必需基团；C⁃3 位为卤素取代时活性保持（化合物 在进行中。
5e），而当卤素移除时，活性显著下降；将水杨酸结构
3 讨 论
的羟基和羧基颠倒后（化合物 18a）活性显著下降，
将水杨酸结构的羧基进行酯化（化合物 18b、18c）、 基于本课题组前期报道的PSD95⁃nNOS解耦联
酰胺化（化合物 19、20）以及环化（化合物 25a~25c） 剂ZL006，对其进行结构分析，对其进行3部分结构
都使活性下降，令人惊喜的是当羧酸替换为磺酸取 修饰，合理设计并合成了 21 个全新结构的衍生物，
代基时（化合物23）时，细胞保护活性尤其在低浓度 并进行了初步构效关系研究。其中化合物 23 对谷
时优于先导化合物 1，提示该位置引入具有负电中 氨酸诱导损伤的 SH⁃SY5Y 细胞表现出较好的保护
心的基团有利于活性提升；在连接链的 C 上引入甲 活 性［10 μmol/L 时（54.34 ± 0.59）% ，1 μmol/L 时
基活性保持（化合物27a），但当引入乙基时（化合物 （29.58 ± 0.48）%］，并且表现出较好的安全性。研