Page 94 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第5期
·676 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年5月
A B 4 * *
( U/mg prot) 3
活性 2 1
ALP
0
Control H2O2 H2O2+PB
成骨诱导7 d ALP染色图(A,上排为实场拍摄图,下排放大4倍)及ALP活性定量检测(B)。两组比较,P < 0.001(n=3)。
*
图5 MC3T3⁃E1细胞ALP活性的检测
Figure 5 ALP activity of MC3T3⁃E1 cells
A B 150
( % ) 100 *** * ***
矿化物沉积比例 50
0
Control H2O2 H2O2+PB
成骨诱导21 d茜素红染色图(A,上排为实场拍摄图,下排放大4倍)及茜素红半定量检测(B)。两组比较,P < 0.05, P < 0.001(n=3)。
***
*
图6 MC3T3⁃E1细胞外基质矿化的检测
Figure 6 Extracellular matrix mineralization of MC3T3⁃E1 cells
A ** B C ** D
1.5 2.0 *** 1.5 1.5
mRNA 1.0 *** 1.5 * mRNA 1.0 *** 1.0
RUNX⁃2 相对表达量 0.5 ALP mRNA 相对表达量 1.0 Col⁃Ⅰ 相对表达量 0.5 OCN mRNA 相对表达量 0.5
0.5
0.0 0.0 0.0 0.0
Control H2O2 H2O2+PB Control H2O2 H2O2+PB Control H2O2 H2O2+PB Control H2O2 H2O2+PB
成骨诱导7 d,Runx⁃2基因(A)、ALP基因(B)、Col⁃Ⅰ基因(C)及OCN基因(D)表达情况。两组比较,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001(n=3)。
**
***
*
图7 qRT⁃PCR检测成骨相关指标的基因表达
Figure 7 Gene expression of osteogenesis⁃related markers evaluated by qRT⁃PCR
清除 ROS 并抑制核因子κB(nuclear factor kappa⁃B, 干细胞的成骨分化。研究报道,细胞内ROS通过激
NF⁃κB)信号通路 [19] 。而 NF⁃κB 信号通路途径中各 活丝裂原激活蛋白激酶(mitogen⁃activated protein
种成分的缺失均可导致骨骼发育异常,研究也已经 kinase,MAPK)和 磷 酸 肌 醇 ⁃ 3 ⁃ 激 酶/Akt(phos⁃
证实,NF⁃κB 信号转导介导的 RANK 配体可以诱导 phoinositide⁃3⁃kinase/Akt,PI3K/Akt)途径增加间充质
破骨细胞生成 [20] 。另外,细胞内ROS水平升高可刺 干细胞中的胰岛素样生长因子结合蛋白表达,从而降
[21]
激细胞凋亡信号,增加脂肪分化,减少骨髓间充质 低细胞成骨标志基因如Runx⁃2、OCN的表达 。