Page 94 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 94

第43卷第5期
               ·676 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2023年5月


                A                                                                    B   4      *     *
                                                                                        ( U/mg prot)  3



                                                                                        活性  2 1
                                                                                        ALP
                                                                                         0
                                                                                           Control  H2O2 H2O2+PB








                      成骨诱导7 d ALP染色图(A,上排为实场拍摄图,下排放大4倍)及ALP活性定量检测(B)。两组比较,P < 0.001(n=3)。
                                                                                           *
                                               图5 MC3T3⁃E1细胞ALP活性的检测
                                              Figure 5  ALP activity of MC3T3⁃E1 cells



              A                                                                     B   150
                                                                                        ( % )  100  ***  *  ***
                                                                                        矿化物沉积比例  50





                                                                                          0
                                                                                             Control  H2O2 H2O2+PB








                 成骨诱导21 d茜素红染色图(A,上排为实场拍摄图,下排放大4倍)及茜素红半定量检测(B)。两组比较,P < 0.05, P < 0.001(n=3)。
                                                                                               ***
                                                                                        *
                                              图6 MC3T3⁃E1细胞外基质矿化的检测
                                     Figure 6 Extracellular matrix mineralization of MC3T3⁃E1 cells

              A              **       B                       C              **       D
                   1.5                     2.0       ***           1.5                      1.5
                 mRNA  1.0  ***            1.5     *             mRNA  1.0  ***             1.0
                 RUNX⁃2  相对表达量  0.5      ALP mRNA  相对表达量  1.0    Col⁃Ⅰ  相对表达量  0.5       OCN mRNA  相对表达量  0.5
                                           0.5
                   0.0                     0.0                     0.0                      0.0
                       Control H2O2 H2O2+PB    Control H2O2 H2O2+PB    Control H2O2 H2O2+PB    Control H2O2 H2O2+PB
                成骨诱导7 d,Runx⁃2基因(A)、ALP基因(B)、Col⁃Ⅰ基因(C)及OCN基因(D)表达情况。两组比较,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001(n=3)。
                                                                                         **
                                                                                                ***
                                                                                   *
                                            图7 qRT⁃PCR检测成骨相关指标的基因表达
                              Figure 7  Gene expression of osteogenesis⁃related markers evaluated by qRT⁃PCR
             清除 ROS 并抑制核因子κB(nuclear factor kappa⁃B,            干细胞的成骨分化。研究报道,细胞内ROS通过激
             NF⁃κB)信号通路      [19] 。而 NF⁃κB 信号通路途径中各             活丝裂原激活蛋白激酶(mitogen⁃activated protein
             种成分的缺失均可导致骨骼发育异常,研究也已经                             kinase,MAPK)和 磷 酸 肌 醇 ⁃ 3 ⁃ 激 酶/Akt(phos⁃
             证实,NF⁃κB 信号转导介导的 RANK 配体可以诱导                       phoinositide⁃3⁃kinase/Akt,PI3K/Akt)途径增加间充质
             破骨细胞生成       [20] 。另外,细胞内ROS水平升高可刺                 干细胞中的胰岛素样生长因子结合蛋白表达,从而降
                                                                                                     [21]
             激细胞凋亡信号,增加脂肪分化,减少骨髓间充质                             低细胞成骨标志基因如Runx⁃2、OCN的表达 。
   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99