Page 146 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第6期
·888 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年6月

予阿昔洛韦抗病毒、头孢地嗪抗感染、甘露醇脱水 发现其父亲该位点无变异，其母亲该位点杂合变异
降颅压、维生素 B1、辅酶 Q10、果糖二磷酸钠、左卡 （图5），可分析出该家系遗传系谱图（图6）。查询人
尼汀等治疗，治疗后血乳酸下降至3.8 mmol/L，患儿 类基因突变数据库 HGMD（Human Gene Mutation
抽搐、行走不稳等症状好转后出院。患儿出院后定 Database，http：//www.hgmd.org）、Clinvar 数据库，无
期于本院神经内科复诊，继续口服维生素 B1、辅酶 该位点致病性分析结果，查阅文献数据库未有该位
Q10、左卡尼汀及生酮饮食治疗，仍独走稍不稳，语 点的相关性报道，c.223G>C为未报道过的新变异位
言发育迟缓，只会说短叠词，复查头颅MRI（2022年 点。同时进行跨物种氨基酸保守性分析提示该位
9 月 5 日）提示两侧基底节区异常信号明显好转（图 点在长臂猿、狨猴、非洲爪蛙等多物种间高度保守
4）。近期随访发现患儿运动及认知能力较前改善， （图 7），说明该氨基酸可能具有重要的生物化学功
独走稳，语言可以说短句。 能，在此区域发生变异可能会引起蛋白质结构与功
本研究获得本院伦理委员会批准（伦理号： 能异常。采用 PyMOL 软件分析对比野生型与突变
202210189⁃1），在获得患儿父母知情同意后，治疗期 型蛋白的三级结构，发现此变异可引起PDHA1基因
间抽取2例患儿及其父母外周静脉血各2 mL，分别 编码蛋白结构明显改变，突变型蛋白中75位谷氨酸
保存于 EDTA⁃K2抗凝管中，委托北京迈基诺医学检 （Glu）突变成谷氨酰胺（Gln），突变后导致其无法通
验所对2例患儿应用高通量测序进行全外显子组基 过氢键与 94 位半胱氨酸（Cys）结合，故会影响其功
因检测及线粒体基因组测序，从而发现可能存在的 能活性（图8）。检索HGMD数据库、PubMed及Clin⁃
致病突变，再通过 Sanger 测序对患儿及父母双方可 var 数据库，参考相关文献，根据美国医学遗传学与
疑致病突变位点进行验证。应用高通量测序在2例 基因组学学会（the American College of Medical Ge⁃
患儿的X染色体上PDHA1基因（NM_000284）的第 netics and Genomics，ACMG）2015 年发布的基因变
3外显子发现一错义突变c.223G>C（p.E75Q），223号 异解读标准和指南进行致病性判读，c.223G>C判定
核苷酸鸟嘌呤 G 变为胞嘧啶 C，该变异导致第 75 位 为疑似致病性变异，PM1+PM2+PM5+PP3（PM1：该变
氨基酸由谷氨酸变为谷氨酰胺，为可疑致病性突 异位于突变热点区域；PM2：在正常人群数据库中为
变，检索相关文献提示与PDHC E1⁃α亚单位缺陷相 低频变异；PM5：相同位置的突变在文献数据库/
关，将2例患儿与其父母样本进行Sanger测序验证， Clinvar 数据库已有报道，但氨基酸变化不同；PP3：

A A B B C C
T2WI（A）、T2WI Flair（B）、DWI（C）提示患儿基底节区多发斑片状高信号。
图3 例2患儿入院时头颅MRI检查图像

A A B B C C
T2WI（A）、T2WI Flair（B）、DWI（C）提示原患儿基底节区多发斑片状高信号消失。
图4 例2患儿复诊时头颅MRI检查图像