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第43卷第8期 刘 瑾，黄 昀，李超普，等. VPS13A在3T3⁃L1脂肪细胞分化过程中的表达及调控研究［J］.
2023年8月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（8）：1041-1046 ·1045 ·

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Ilochest Bodipy Ilochest Bodipy sg⁃NC sg⁃VPS13Λ

sg⁃NC sg⁃VPS13Λ
C 0 d 8 d
sg⁃NC sg⁃VPS13Λ sg⁃NC sg⁃VPS13Λ
VPS13Λ 360 kDa
43 kDa
CEBPα
CEBPβ 36 kDa

PPARγ 55 kDa
CALNEIN
90 kDa
A：稳定敲降VPS13A基因的3T3⁃L1细胞分化后第8天（脂肪细胞BODIPY染色，×600）；B：稳定敲降VPS13A基因的3T3⁃L1细胞分化后第8天
（脂肪细胞油红染色，×400）；C：稳定敲降VPS13A基因的3T3⁃L1细胞分化8 d后Western blot检测VPS13A、CEBPα、CEBPβ、PPARγ的表达水平。
图4 敲降VPS13A促进3T3⁃L1细胞分化
Figure 4 VPS13A knockdown promotes differentiation of 3T3⁃L1 cells

成了一个重大的公共卫生问题 。近年来肥胖患病 脂肪生成的更多了解有望成为治疗各种疾病的新途
［9］
率显著升高 ［10］ 。脂肪组织中脂肪细胞数量的增加 径，包括代谢紊乱、脂肪营养不良、肥胖和罕见病等，
主要在发育早期确定，在成年期达到稳定数量基本 这可能通过某些调节脂肪生成的基因影响。
不再变化 ［11］ 。分化后的脂肪细胞直径可达到数百 真核生物中的细胞器具有不同的脂质组成。
微米且能够储存大量中性脂。啮齿类动物中的研 细胞器的生长和扩增需要直接或间接地从其合成
究表明，在长期能量过剩的情况下，新的脂肪细胞 位点 ER 靶向传递脂质。证据表明，非囊泡脂质转
可以从前体脂肪细胞中分化出现，并有助于脂肪组 运代表了大量脂质的主要运输途径 ［15］ 。VPS13A 是
织的扩张 ［12］ 。脂肪生成特指成纤维细胞样祖细胞 继氧化甾醇结合蛋白相关蛋白5/8（oxysterol binding
积累营养成为成熟脂肪细胞的过程。可以将其视 protein related proteins5/8，ORP5/8）和 PDZ 结构域包
为两步过程。在第一步中，成纤维细胞样祖细胞形 含蛋白8（PDZ domain containing protein 8，PDZD8）之
成脂肪前体细胞，这一步骤不会引起细胞形态的明 后第4种具有脂质结合结构域的哺乳动物蛋白 ［16-17］ ，
显改变。第二步指特定的脂肪前体细胞经历生长 已有研究表明 VPS13A 定位于细胞内内质网⁃脂滴
停滞，积累脂质并形成功能性的，胰岛素反应性的 接触部位，并且VPS13A敲降后细胞内脂滴增多，提
成熟脂肪细胞。脂肪前体细胞在接触抑制阻碍其 示VPS13A在脂肪生成中具有重要作用。
生长时，会激活 PPARγ、CEBPα和 CEBPβ的主要调 具有生理作用的细胞系可以作为动物或人类
节因子，在分化完成后，成熟脂肪细胞表达早期脂 研究的替代方案 ［18］ ，其中3T3⁃L1细胞是一种成熟脂
肪细胞分化的所有标志物 ［13］ 。PPARγ是脂肪形成 肪细胞培养模型 ［19］ 。本研究首先用 Western blot 及
的关键转录调节因子，调节脂肪从发育到代谢的基 Q⁃PCR明确了3T3⁃L1细胞分化过程中VPS13A的表
本进程，它对于脂肪细胞分化是必不可少的 ，但是 达变化，用 3T3⁃L1 细胞诱导分化为脂肪细胞，分别
［14］
PPARγ的生理配体仍旧未知。一般认为，脂肪组织的 收取不同分化天数的细胞检测 VPS13A 的表达水
增生是健康和适应性的，能够维持正常的代谢水平。 平，结果显示在细胞分化的第 2 天，VPS13A 的表达
总体而言，干预脂肪生成是肥胖的有效治疗措施。对 水平较第 0 天相比下调，上述研究结果显示脂肪细