Page 25 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第8期 梁海波,邓晓凤,臧 敏,等. Pumilio家族基因诱导性敲除小鼠模型的构建[J].
2023年8月 南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(8):1055-1060 ·1059 ·
A 对照组 他莫昔芬组 B 对照组 他莫昔芬组
C BrdU/DAPI TUNEL/DAPI D P<0.05 P<0.05
13 8
BrdU阳性细胞数 12 凋亡细胞数 6 4
对照组 11 2
10 0
对照组 他莫昔芬组 对照组 他莫昔芬组
他莫昔芬组
A:3周小鼠他莫昔芬注射结束第21天和对照小鼠睾丸截面的Pum1免疫组化结果(×20);B:3周小鼠他莫昔芬注射结束第21天和对照小
鼠睾丸截面的HE结果(×20);C:3周小鼠他莫昔芬注射结束第21天和对照小鼠睾丸截面的增殖信号BrdU和凋亡信号TUNEL的结果(×20);D:3
周小鼠注射他莫昔芬后21 d和对照小鼠睾丸截面增殖信号BrdU(P=0.043 1)和凋亡信号TUNEL(P=0.042 4)的统计结果。
图3 3周小鼠他莫昔芬注射21 d后的小鼠精子发生障碍并且细胞凋亡增多、增殖减慢
Figure 3 The 3 weeks old mice 21 days after tamoxifen injection exhibited a abnormal spermatogenesis and an increasing
apoptotic and decreased proliferation cells
A
大脑 胸腺 心脏 肝脏 脾脏 睾丸
他莫昔芬 - + + - + + - + + - + + - + + - + +
557 bp
453 bp
B
14 d 5 d
他莫昔芬 胸腺 心脏 肝脏 脾脏 睾丸 胸腺 心脏 肝脏 脾脏 睾丸
- + - + - + - + - + - + - + - + - + - +
-150 kDa
Pum1
-75 kDa
Gapdh -37 kDa
C 对照组 他莫昔芬组 D 对照组 他莫昔芬组
A:成年小鼠注射他莫昔芬后35 d Pum1在脑、胸腺、心、肝、脾和睾丸的DNA水平明显敲除;B:成年小鼠注射他莫昔芬后14 d和35 d PUM1
在胸腺、心、肝和睾丸的蛋白水平明显降低;C:成年小鼠注射他莫昔芬后35 d和对照小鼠睾丸截面的Pum1免疫组化结果(×40);D:成年小鼠
注射他莫昔芬后35 d和对照小鼠睾丸截面的HE结果(×40)。
图4 成年小鼠注射他莫昔芬后PUM1仍有敲降效果但不影响精子形成
Figure 4 PUM1 knock down effect at molecular levels and testis histology was presented by genotyping,Western blot,PUM
immunohistochemistry and hematoxylin⁃eosin staining