Page 25 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第8期              梁海波,邓晓凤,臧 敏,等. Pumilio家族基因诱导性敲除小鼠模型的构建[J].
                  2023年8月                     南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(8):1055-1060                      ·1059 ·


                A         对照组                  他莫昔芬组            B          对照组                  他莫昔芬组










                  C          BrdU/DAPI             TUNEL/DAPI         D          P<0.05               P<0.05
                                                                            13                    8
                                                                           BrdU阳性细胞数  12         凋亡细胞数  6 4
                    对照组                                                     11                    2




                                                                            10                    0
                                                                               对照组 他莫昔芬组            对照组 他莫昔芬组
                    他莫昔芬组






                   A:3周小鼠他莫昔芬注射结束第21天和对照小鼠睾丸截面的Pum1免疫组化结果(×20);B:3周小鼠他莫昔芬注射结束第21天和对照小
                鼠睾丸截面的HE结果(×20);C:3周小鼠他莫昔芬注射结束第21天和对照小鼠睾丸截面的增殖信号BrdU和凋亡信号TUNEL的结果(×20);D:3
                周小鼠注射他莫昔芬后21 d和对照小鼠睾丸截面增殖信号BrdU(P=0.043 1)和凋亡信号TUNEL(P=0.042 4)的统计结果。
                               图3 3周小鼠他莫昔芬注射21 d后的小鼠精子发生障碍并且细胞凋亡增多、增殖减慢
                Figure 3  The 3 weeks old mice 21 days after tamoxifen injection exhibited a abnormal spermatogenesis and an increasing
                        apoptotic and decreased proliferation cells


                        A
                                       大脑         胸腺        心脏        肝脏        脾脏        睾丸
                         他莫昔芬        -   +  +  -   +  +  -   +  +   -  +  +   -  +  +   -  +  +
                                                                                                    557 bp
                                                                                                    453 bp

                        B
                                               14 d                              5 d
                         他莫昔芬      胸腺    心脏     肝脏    脾脏    睾丸      胸腺     心脏    肝脏    脾脏    睾丸
                                   -  +  -  +   -  +  -  +  -  +    -  +  -  +  -  +   -  +  -  +
                                                                                                  -150 kDa
                             Pum1
                                                                                                  -75 kDa
                            Gapdh                                                                 -37 kDa
                C         对照组                   他莫昔芬组           D          对照组                   他莫昔芬组











                   A:成年小鼠注射他莫昔芬后35 d Pum1在脑、胸腺、心、肝、脾和睾丸的DNA水平明显敲除;B:成年小鼠注射他莫昔芬后14 d和35 d PUM1
                在胸腺、心、肝和睾丸的蛋白水平明显降低;C:成年小鼠注射他莫昔芬后35 d和对照小鼠睾丸截面的Pum1免疫组化结果(×40);D:成年小鼠
                注射他莫昔芬后35 d和对照小鼠睾丸截面的HE结果(×40)。
                                    图4   成年小鼠注射他莫昔芬后PUM1仍有敲降效果但不影响精子形成
                Figure 4  PUM1 knock down effect at molecular levels and testis histology was presented by genotyping,Western blot,PUM
                        immunohistochemistry and hematoxylin⁃eosin staining
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