Page 19 - 南京医科大学学报自然科学版

第44卷第1期 孙建宇，郭 华，张云云，等. 间歇性缺氧大鼠早期动脉粥样硬化中血管生成性T淋巴细胞的
2024年1月 表达变化［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（01）：012-016 · 13 ·

there was no statistical difference in EPC levels［（0.040±0.028）% vs.（0.028±0.012）%，P > 0.05］；H E staining results showed that
the IMT of rats thoracic aorta in the IH group was significantly increased compared to the RA group［（121.275 ± 30.896）μm vs.
（84.075±7.452）μm，P < 0.05］；ELISA results showed that the Hcy level in the IH group was significantly higher compared to the RA
group［（6.2±0.6）μmol/L vs.（5.5±0.6）μmol/L，P < 0.05］，but there were no statistical differences in HDL⁃C，LDL⁃C，TC，and TG
levels. Conclusion：Early atherosclerosis occurs in the blood vessels of CIH rats and the levels of Tang elevated，suggesting that the
level of Tang is related to the occurrence and development of early atherosclerosis.
［Key words］ angiogenic T lymphocyte；chronic intermittent hypoxia；atherosclerosis
［J Nanjing Med Univ，2024，44（01）：012⁃016］

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（obstructive （体重 210~230 g）购买于常州卡文斯实验动物有限
sleep apnea hypopnea syndrome，OSAHS）是动脉粥样 公司。实验于南京医科大学附属无锡人民医院实
硬化性疾病的独立危险因素，在动脉粥样硬化性心 验动物中心进行。实验过程严格按照《实验动物的
脏病患者中的发生率高达 40%~80% 。慢性间歇 饲养和使用指南（第八版）》要求执行。此实验获得
［1］
性缺氧（chronic intermittent hypoxia，CIH）是 OSAHS 南京医科大学附属无锡人民医院动物保护伦理委
重要的病理生理学特征 ，引起血液循环中氧合水 员会的批准（实验伦理号：220214501）。
［2］
平出现周期性变化，引发脂质代谢紊乱、氧化应激 FITC 荧光 Anti⁃CD3 抗体、FITC 荧光 Anti⁃CD31
和免疫炎症改变，并通过其相互作用，最终导致动 抗体、FITC 荧光 Anti⁃CD34 抗体（Santa Cruz 公司，
脉粥样硬化的发生。 美国），CD133 抗体（Abcam 公司，美国），FITC 标
动脉粥样硬化的起始改变是内皮损伤和功能 记山羊抗兔 IgG（Biosharp 公司，北京），高密度脂
障碍，随后受损组织分泌一系列促血管生成因子趋 蛋 白 胆 固 醇（high ⁃ density lipoprotein cholesterol，
化成血管细胞至损伤部位修复内皮损伤以及形成 HDL⁃C）、低密度脂蛋白胆固醇（low⁃density lipoprotein
［3］
新生血管 。血管生成性 T 淋巴细胞（angiogenic T cholesterol，LDL⁃C）、甘油三酯（triglycerides，TG）、
lymphocyte，Tang）是 T 淋巴细胞亚群之一，也是一 总 胆 固 醇（total cholesterol，TC）、同 型 半 胱 氨 酸
类成血管细胞，其主要细胞表面标志物包括 CD3、 （homocysteine，Hcy）酶联免疫试剂盒（上海酶联
CD31、CXCR4，通常被标记为 CD3 CD31 T 淋巴细 生物）。
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胞。研究表明，Tang 可通过分泌促血管生成因子 1.2 方法
白细胞介素⁃8（interleukin⁃8，IL⁃8）、基质金属蛋白 1.2.1 实验分组及CIH大鼠模型制备
酶⁃9（matrix metalloproteinases⁃9，MMP⁃9）和粒细胞 16只SD大鼠标号称重后随机分为2组：正常饲
集落刺激因子（granulocyte⁃colony stimulating factor， 养组（RA组）和间歇性缺氧组（IH组），每组8只。饲
G⁃CSF）促进内皮祖细胞（endothelial progenitor cell， 养条件为：每4只大鼠饲养在1个鼠笼中，大鼠可自
EPC）增殖、分化，参与损伤血管内皮修复或新生血 由取食足够的灭菌饲料及干净饮用水，室温保持在
［5］
［4］
管形成 。Weil 等 研究发现，心脑血管疾病患者 20~24 ℃，室内保持相对安静，噪音小于 50 dB，室
外周血中 Tang 水平降低。迄今尚未有 CIH 暴露下 内照明 12 h 调整 1 次，保持通风换气。因自然界中
Tang 对早期动脉粥样硬化发生发展影响的相关性 大鼠习性为昼伏夜出，本实验在大鼠白天睡眠时将
研究。 IH 组大鼠放入 CIH 仓（无锡市怀信生物公司）进行
本研究拟通过建立 CIH 大鼠动脉内皮损伤模 间歇性缺氧实验 8 h，其余时间则放回正常动物房
型，观察CIH暴露下大鼠血管病变及外周血Tang表 内，与RA组大鼠在相同环境下饲养。每日上午8点
达水平的变化，为进一步寻求OSAHS相关性动脉粥 将 IH 组大鼠置于 CIH 仓中，在电脑控制仪上将循
样硬化性疾病的干预及治疗策略提供线索。 环模式设置为：每 2 min 1 个循环，40 s 内氧气浓度
降到 8%之后稳定 20 s，然后氧气浓度在 40 s 内恢
1 材料和方法
复到 21%之后维持 20 s。将 CIH 仓内氧气浓度维
1.1 材料 持在 8%时，经大鼠耳朵测量其血氧饱和度，能够
16 只成年雄性健康 Sprague Dawley（SD）大鼠 降低至 80%以下，可以模拟重度 OSAHS 患者夜间