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第44卷第4期 贺雪珂，姜志胜，杨中州，等. Coq4基因全敲除小鼠胚胎发育的表型分析［J］.
2024年4月 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（04）：462-468 ·465 ·

+/-
表1 Coq4 小鼠杂交后代各基因型概率统计 腔、羊膜腔 3 个特征性腔。此外，来源于胚外外胚
Table 1 Genotypic frequency of progeny from Coq4 +/- 层的绒毛膜结构也随之出现。然而在这个阶段，
mice intercrosses
尽管 Coq4 胚胎确实显示出胚胎的 3 层结构，但胚
-/-
Genotype Number Percentage（%） 外结构变形，绒毛膜板、胚外体腔、胎盘外腔均发
Coq4 +/+ 052 030
育异常，epc 区域也显著减少（图 6C、D）。
Coq4 +/- 121 070
综上所述，Coq4 胚胎在原肠胚形成阶段发育
-/-
Coq4 -/- 000 000
停滞，并在器官形成阶段死亡。组织形态学观察结
Total 0173 100
果表明Coq4基因对小鼠早期胚胎的发育至关重要。
固定、切片并用HE染色对胚胎进行进一步组织学观 2.3 Coq4敲除小鼠滋养层细胞侵袭能力减弱
察。结果显示，E7.5 Coq4 胚胎在胚外外胚层以及胚 为了进一步表征 Coq4 胚胎的形态缺陷，使用
-/-
-/-
胎胚层还未分化的阶段开始出现异常（图 5B、C）。 滋养层细胞特异性标志物Tpbpa对E8.5胚胎的切片
Coq4 胚胎于E8.5和E9.5才逐渐出现绒毛膜板、尿囊 进行免疫荧光染色。Tpbpa在epc中表达，然后延伸
-/-
等E7.5 WT型胚胎出现的发育结构（图5E、F、H、I）。 到海绵滋养层细胞中。E8.5 时 HE 结果显示 8 个胚
E10.5和E11.5 Coq4 胚胎组织几乎不可见，并且组织 胎中有2个胚胎异常发育，免疫荧光结果显示WT胚
-/-
明显破碎（图5K、L、N、O）。上述结果表明Coq4 胚胎 胎中Tpbpa阳性细胞主要定位于epc上。相比之下，
-/-
出现严重的发育迟缓。 Coq4 胚胎的Tpbpa阳性细胞表达量明显减少，且不
-/-
接着本研究重点对 E8.5 之前的胚胎进行观 均匀地散布于胚胎周围（图 7A、B）。这一结果再次
察。在 E6.5 阶段，正常胚胎开始进行原肠胚形成， 表明Coq4敲除导致小鼠胎盘发育不良。
胚胎显示出良好的胚外外胚层、胚胎外胚层和内
3 讨 论
胚层结构，此时 Coq4 胚胎也表现出相同的结构
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（图 6A、B）。E7.5 时 WT 胚胎内胚层、中胚层、外胚 本研究证明了 Coq4 在小鼠早期胚胎发育过程
层 3 层结构建立，并伴随着出现胎盘外腔、胚外体 中发挥着重要作用，完全的Coq4基因缺失导致绒毛

E7.5 E8.5
placenta embryo placenta embryo

WT

A D G J

Coq4 -/- B E H K

C F I L
-/-
A，G：Scintigraphy of WT placenta（A：×63；G：×25）.D，J：Scintigraphy of WT embryo（D：×63；J：×25）.B，C，H，I：Scintigraphy of Coq4 placenta
-/-
（×63）.E，F，K，L：Scintigraphy of Coq4 embryo（×63）.
图3 E7.5及E8.5时WT组和Coq4 组胚胎组织的形态学分析
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Figure 3 Morphological analysis of embroynic tissues in WT group and Coq4 -/- group at E7.5 and E8.5