Page 22 - 南京医科大学自然版

第44卷第4期
·460 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年4月

A B
WT p53 +/-
30 *
（#/mm 2 ） 20 #

N.Oc/T.Ar 10

TRAP 1α（OH）ase -/- 1α（OH）ase p53 +/-
-/-
0
WT p53 +/- ase -/- -/- p53 +/-
（OH）
1α （OH） ase
1α

A：Representative micrographs of tibial sections were stained histochemically for tartrate⁃resistant acid phosphatase（×400）. B：Quantitative analysis
of the number of osteoclasts per tissue area（N.Oc/T.Ar，#/mm ）. Compared with the WT group，P < 0.05；compared with the 1α（OH）ase group，
⁃/⁃
*
2
#
P < 0.05（n=5）.
图4 p53半剂量缺失对1，25（OH）D3缺乏小鼠破骨细胞骨吸收的影响
2
Figure 4 Effects of half⁃dose deletion of p53 on bone resorption by osteoclasts in 1，25（OH）D3 deficient mice
2
A B C +/- D
WT 1α（OH）ase -/- 5 000 1.5 *
-/-
p53 +/- 1α（OH）ase p53 +/- ** -/- -/- p53 #*
4 000
（OH）
#* （OH） ase ase 1.0
ROS 3 000 * WT p53 +/- 1α 1α SOD1 relative levels
2 000 18 kDa 0.5 *
Count 1 000 SOD1
0 β⁃actin 43 kDa 0
WT p53 +/- ase -/- -/- p53 +/- WT p53 +/- ase -/- -/- p53 +/-
0 1α （OH） ase 1α （OH） ase
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 （OH） （OH）
FL1⁃1∶∶ROS 1α 1α
A：Representative graphs of flow cytometry analysis of bone marrow cells for DCF⁃DA. B：ROS levels were assessed by mean fluorescence intensity
analysis. C：Western blot of bone extracts for the expression of SOD1. D：The SOD1 protein relative levels to β⁃actin were assessed by densitometric
**
#
-/-
*
analysis. Compared with the WT group，P < 0.05，P < 0.01；compared with the 1α（OH）ase group，P < 0.05（n=5）.
图5 p53半剂量缺失对活性维生素D缺乏小鼠骨组织氧化损伤的影响
Figure 5 Effects of half⁃dose deletion of p53 on oxidative damage to bone tissue in 1，25（OH）D3 deficient mice
2
鼠模型。 剂量缺失能够明显增加活性维生素D缺乏小鼠的骨
活性维生素 D 生物学效应的发挥既有 VDR 介 容量及骨矿化程度。骨量的增加可能与成骨细胞
导的直接作用，也可有细胞外钙磷介导的间接作 骨形成增加有关，也可能与破骨细胞骨吸收的减少
用，而活性维生素 D 调节骨矿化的经典作用是通过 有关。因此检测了各组小鼠成骨细胞骨形成和破
提高细胞外钙磷水平 ［22］ 。1α（OH）ase基因敲除小鼠 骨细胞骨吸收的变化。结果显示1α（OH）ase 小鼠
-/-
表现为血清低钙低磷且无活性维生素 D，为了排除 表现为骨形成明显降低，破骨细胞骨吸收显著增
钙磷的影响，给予各组小鼠高钙高磷饮食。结果发 加，p53 半剂量缺失能增加活性维生素 D 缺乏小鼠
现，高钙磷饮食喂养后，WT和p53 小鼠血清钙、磷、 骨形成，也能降低破骨细胞骨吸收。
+/-
1，25（OH） 2D3和PTH水平在正常范围内；1α（OH）ase -/- 大量的研究证实活性维生素D具有保护正常细
小鼠、1α（OH）ase p53 小鼠的血清钙、磷和PTH可 胞免受氧化应激攻击的作用。补充活性维生素D能
-/-
+/-
以被高钙磷饮食矫正至正常水平，仅表现为无血清 够显著提高红细胞的 SOD 和过氧化氢酶活性 ［23］ 。
1，25（OH） 2D3。此模型观察了活性维生素 D 缺乏对 氧化应激抑制骨形成，导致骨损伤，而抗氧化剂补
骨质疏松的影响。结果发现：活性维生素 D 缺乏小 充能够促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化，抑
鼠骨容量和矿化程度较WT小鼠明显减少，但p53半 制破骨细胞活性，从而预防骨质疏松的发生 ［24］ 。研