Page 20 - 南京医科大学自然版

第44卷第4期
·458 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年4月

A
-/-
WT p53 +/- 1α（OH）ase -/- 1α（OH）ase p53 +/-

T⁃col

500 μm 500 μm 500 μm 500 μm

B C D E
15 25 *

X⁃ray Micro CT （%） 10 * # （%） 20 ##
Tibial BV/TV 5 * Femoral BV/TV 10 ***
15
**

0 5 0
WT p53 +/- ase -/- -/- p53 +/- WT p53 +/- ase -/- -/- p53 +/-
（OH）
（OH）
1α （OH） ase 1α （OH） ase
1α 1α
A：Representative micrographs of total collagen（T⁃col）staining of the tibias（×50）. B：Representative X⁃ray radiographs of the femurs. C：Represen⁃
tative images of micro⁃CT⁃scanned sections of 3D reconstructions of the femurs. D：Statistical diagram of tibia bone volume relative to total volume（BV/
*
***
**
TV，%）. E：The femur bone volume relative to total volume（BV/TV，%）. Compared with the WT group，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001；compared
-/-
##
#
with the 1α（OH）ase group，P < 0.05，P < 0.01（n=5）.
图2 p53半剂量缺失对1，25（OH）D3缺乏小鼠骨矿化和骨容量的影响
2
Figure 2 Effects of half⁃dose deletion of p53 on bone mineralization and volume in 1，25（OH）D3 deficient mice
2
够改善1，25（OH） 2D3缺乏小鼠的骨矿化降低和骨容 析了 10 周龄高钙磷饮食 WT、p53 、1α（OH）ase 和
+/-
-/-
量减少。 1α（OH）ase p53 小鼠破骨细胞骨吸收的变化。结
-/-
+/-
+/-
2.3 p53半剂量缺失对1，25（OH） 2D3缺乏小鼠成骨 果显示：与WT小鼠相比，p53 小鼠TRAP阳性破骨
细胞骨形成的影响 细胞无显著变化，1α（OH）ase 小鼠则显著增多。
-/-
为探索 p53 半剂量缺失改善 1，25（OH） 2D3缺乏 而与1α（OH）ase 小鼠相比，1α（OH）ase p53 小鼠
-/-
-/-
+/-
小鼠的骨骼矿化和骨容量减少是否与成骨细胞骨 TRAP 阳性破骨细胞（图 4A、B）显著减少。这些结
形成增加有关，通过 HE、ALP 和 Col⁃Ⅰ免疫组织化 果证明 p53 半剂量缺失能够减少 1，25（OH） 2D3缺乏
学染色，比较分析了10周龄高钙磷饮食WT、p53 、 引起的破骨细胞骨吸收。
+/-
1α（OH）ase 和 1α（OH）ase p53 小鼠成骨细胞骨 2.5 p53半剂量缺失对活性维生素D缺乏小鼠骨组
-/-
-/-
+/-
形成的变化。结果显示：与WT小鼠相比，p53 小鼠 织氧化损伤的影响
+/-
成骨细胞数量、ALP 和 Col⁃Ⅰ阳性面积有所增加， 为研究p53半剂量缺失改善活性维生素D缺乏
1α（OH）ase 小鼠则显著降低，而与1α（OH）ase 小鼠 引起的骨质疏松是否与抗氧化能力增强有关，利用
-/-
-/-
相比，1α（OH）ase p53 小鼠成骨细胞数量（图 3A、 DCF⁃DA标记、流式细胞检测和Western blot，比较分
+/-
-/-
D）、ALP（图3B、E）和Col⁃Ⅰ（图3C、F）阳性面积均显 析了 10 周龄高钙磷饮食 WT、p53 、1α（OH）ase 和
-/-
+/-
著增加。这些结果证明 p53 半剂量缺失能够改善 1α（OH）ase p53 小鼠骨髓细胞活性氧（reactive
-/-
+/-
1，25（OH） 2D3缺乏引起的成骨细胞骨形成减少。 oxygen species，ROS）和骨组织抗氧化酶 SOD1 蛋白
2.4 p53半剂量缺失对1，25（OH） 2D3缺乏小鼠破骨 表达水平的变化。结果显示：与WT小鼠相比，p53 +/-
细胞骨吸收的影响 小鼠 ROS 水平降低、SOD1 蛋白表达水平增加。而
为研究 p53 半剂量缺失改善 1，25（OH） 2D3缺乏 与1α（OH）ase 小鼠相比，1α（OH）ase p53 小鼠活
-/-
-/-
+/-
引起的骨骼矿化和骨容量减少是否与破骨细胞骨 性氧 ROS 水平（图 5A、B）显著降低、SOD1 蛋白表达
吸收有关，利用TRAP组织化学染色的方法，比较分 水平（图5C、D）显著增加。这些结果证明p53半剂量