Page 40 - 南京医科大学自然版
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第44卷第4期
               ·478 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2024年4月


                               A                *                  B              ***
                                           ***                                   **
                                    0.3                                0.3
                                   nm)  0.2                           nm)  0.2
                                   (490  D  0.1                       (490  D  0.1


                                     0                                  0
                                         0  0.1 1.0 10.0 100.0              0  0.1  1.0 10.0 100.0
                                           TCDCA(μmol/L)                    LPS+TCDCA(μmol/L)
                 A:The effect of different concentrations of TCDCA on the activity of macrophages. B:The effect of different concentrations of TCDCA on the activity
                                   *
                                         **
                                                ***
              of LPS⁃stimulated macrophages. P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001(n=3).
                                                  图1  MTT法检测巨噬细胞活性
                                        Figure 1  The activity of macrophages detected by MTT
              标志,CD206是巨噬细胞M2型极化的标志。RT⁃qP⁃                      p⁃p65/p⁃65和p⁃IκBα/IκBα在LPS组中显著增加。与
              CR 检测结果显示,与 LPS 组相比,LPS+TCDCA 组                   LPS组相比,LPS+TCDCA组中p⁃p65/p⁃65和p⁃IκBα/
              TNF⁃α、IL⁃1β和 IFN⁃γ显著下调,IL⁃10 显著上调,                IκBα显著降低。该结果提示,TCDCA可通过NF⁃κB
              CD80 显著下调,CD206 显著上调(图 2)。Western                 信号通路来减轻LPS诱导的细胞炎症。
              blot 结果显示 LPS+TCDCA 组 IL⁃1β和 IL⁃6 较 LPS 组         2.4  TCDCA缓解LPS刺激的肠道炎症性损伤
              显著下调(图 3)。该结果提示 TCDCA 具有一定的                            小肠中上段组织实体图如图 5 所示。对小肠
              抗炎活性。                                             组织石蜡切片进行 HE 染色、PAS 染色和阿尔新
              2.3  TCDCA对Raw264.7细胞中NF⁃κB信号通路的                  蓝⁃核固红染色评估小肠组织样本的组织病理学
              调控                                                特征。
                  采用Western blot检测p65、p⁃p65、IκBα和p⁃IκBα              HE 染色结果如图 6 所示,LPS 组小肠绒毛间可
              的表达,实验结果如图 4 所示。与对照组相比,                           见明显新生血管及血管性渗出,同时,在LPS组可以


                      A      60    *** ***         B      50    *** ***          C     2.0      ***
                          Relative mRNA expression  of TNF⁃α 50  Relative mRNA expression  IL⁃1β  of  40 5  Relative mRNA expression  of IFN⁃γ  1.5
                                                          45
                                                          35
                             40
                                                          30
                                                                                       1.0
                                                          25
                             30
                             10
                                                                                       0.5
                              5
                              0
                                                                  LPS
                                     LPS
                                Control  LPS+TCDCA         0 Control  LPS+TCDCA         0 Control  LPS+TCDCA
                                                                                              LPS
                      D       3    *** ***          E     1.5    *  **           F     1.5  *** ***
                          Relative mRNA expression  of IL⁃10  0.1 2 1  Relative mRNA expression  of CD80  1.0  Relative mRNA expression  of CD206  1.0

                                                                                       0.5
                                                          0.5
                              0
                                                                                              LPS
                                                                  LPS
                                     LPS
                                Control  LPS+TCDCA         0 Control  LPS+TCDCA         0 Control  LPS+TCDCA
                                                 *      **     ***
                                                  P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001(n=3).
                      图2  TCDCA对LPS刺激作用下巨噬细胞中炎症相关因子及巨噬细胞M1、M2极化标志物表达量的影响
              Figure 2  The effect of TCDCA on the expression of inflammatory related factors and polarization markers M1 and M2 in
                      macrophages under LPS stimulation
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