Page 40 - 南京医科大学自然版
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第44卷第4期
·478 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年4月
A * B ***
*** **
0.3 0.3
nm) 0.2 nm) 0.2
(490 D 0.1 (490 D 0.1
0 0
0 0.1 1.0 10.0 100.0 0 0.1 1.0 10.0 100.0
TCDCA(μmol/L) LPS+TCDCA(μmol/L)
A:The effect of different concentrations of TCDCA on the activity of macrophages. B:The effect of different concentrations of TCDCA on the activity
*
**
***
of LPS⁃stimulated macrophages. P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001(n=3).
图1 MTT法检测巨噬细胞活性
Figure 1 The activity of macrophages detected by MTT
标志,CD206是巨噬细胞M2型极化的标志。RT⁃qP⁃ p⁃p65/p⁃65和p⁃IκBα/IκBα在LPS组中显著增加。与
CR 检测结果显示,与 LPS 组相比,LPS+TCDCA 组 LPS组相比,LPS+TCDCA组中p⁃p65/p⁃65和p⁃IκBα/
TNF⁃α、IL⁃1β和 IFN⁃γ显著下调,IL⁃10 显著上调, IκBα显著降低。该结果提示,TCDCA可通过NF⁃κB
CD80 显著下调,CD206 显著上调(图 2)。Western 信号通路来减轻LPS诱导的细胞炎症。
blot 结果显示 LPS+TCDCA 组 IL⁃1β和 IL⁃6 较 LPS 组 2.4 TCDCA缓解LPS刺激的肠道炎症性损伤
显著下调(图 3)。该结果提示 TCDCA 具有一定的 小肠中上段组织实体图如图 5 所示。对小肠
抗炎活性。 组织石蜡切片进行 HE 染色、PAS 染色和阿尔新
2.3 TCDCA对Raw264.7细胞中NF⁃κB信号通路的 蓝⁃核固红染色评估小肠组织样本的组织病理学
调控 特征。
采用Western blot检测p65、p⁃p65、IκBα和p⁃IκBα HE 染色结果如图 6 所示,LPS 组小肠绒毛间可
的表达,实验结果如图 4 所示。与对照组相比, 见明显新生血管及血管性渗出,同时,在LPS组可以
A 60 *** *** B 50 *** *** C 2.0 ***
Relative mRNA expression of TNF⁃α 50 Relative mRNA expression IL⁃1β of 40 5 Relative mRNA expression of IFN⁃γ 1.5
45
35
40
30
1.0
25
30
10
0.5
5
0
LPS
LPS
Control LPS+TCDCA 0 Control LPS+TCDCA 0 Control LPS+TCDCA
LPS
D 3 *** *** E 1.5 * ** F 1.5 *** ***
Relative mRNA expression of IL⁃10 0.1 2 1 Relative mRNA expression of CD80 1.0 Relative mRNA expression of CD206 1.0
0.5
0.5
0
LPS
LPS
LPS
Control LPS+TCDCA 0 Control LPS+TCDCA 0 Control LPS+TCDCA
* ** ***
P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001(n=3).
图2 TCDCA对LPS刺激作用下巨噬细胞中炎症相关因子及巨噬细胞M1、M2极化标志物表达量的影响
Figure 2 The effect of TCDCA on the expression of inflammatory related factors and polarization markers M1 and M2 in
macrophages under LPS stimulation