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第44卷第5期 张博为,韩卓莹,马天云,等. CTAGE15与食管鳞状细胞癌(ESCC)患者预后相关并抑制ESCC细胞的
2024年5月 恶性表型[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2024,44(5):634-642 ·635 ·
ESCC patients,and a higher GTAGE15 expression was correlated with a better survival. The qRT⁃PCR results revealed significantly
high expression of CTAGE15 in ESCC tissues and cells,compared with normal esophageal epithelial tissues and cells. In addition,the
expression of CTAGE15 was significantly associated with T stage and N stage of ESCC patients,and a higher GTAGE15 expression was
associated with an earlier T stage and N stage. Knockdown of CTAGE15 enhanced the proliferation,migration,and invasion abilities of
ESCC cells(P < 0.05). Conclusion:CTAGE15 expression is positively associated with the prognosis of ESCC patients,and it inhibits
the proliferation,migration and invasion abilities of ESCC cells.
[Key words] CTAGE15;pseudogenes;esophageal squamous cell carcinoma;prognosis
[J Nanjing Med Univ,2024,44(05):634⁃642]
据统计,2020年全球食管癌发病率居世界第8位, 人ESCC 细胞 KYSE⁃150、KYSE⁃30、KYSE⁃410、
新发病例数约 60.4 万,死亡病例数约 54.4 万,其中 TE⁃1(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库),
一半以上的新发病例和死亡病例发生在我国(新发 人正常食管上皮细胞 HEEC(北京龙跃生物科技发
[1]
病例数32.4万,死亡病例数30.1万) 。早期食管癌 展有限公司)。DMEM培养基(Gibco公司,美国)、胎
患者及时接受治疗后,5年生存率可达90%以上,但 牛血清(fetal bovine serum,FBS)(Hyclone 公司,美
由于缺乏典型症状和体征,大多数患者就诊时往往已 国),氨苄青霉素(Hyclone 公司,美国),小干扰RNA
[2]
是中晚期,预后较差,5年总体生存率仅30%左右 。 (small interfering RNA,siRNA)由滁州通用生物(安
寻找新的治疗方法和治疗靶点来改善食管癌患者 徽)有限公司设计并生产。SDS⁃PAGE试剂(上海生
的预后仍然是目前亟待解决的关键问题。皮肤T 细 工公司)。BCA Protein Assay Kit、GAPDH抗体(上海
胞淋巴瘤相关抗原 15(cutaneous T cell lymphoma 碧云天公司)。Lipofectamine TM 3000 试剂(Thermo
associated antigen 15,CTAGE15)作为CTAGE家族成 Fisher Scientific公司,美国)。
[3]
员,是一个假基因 。假基因被定义为与另一个基 1.2 方法
因相似但有缺陷的基因组序列,它们存在于几乎 1.2.1 公共数据库分析
所有生命形式中,虽然通常被认为缺乏功能,但越 下载癌症基因图谱(The Cancer Genome Atlas
来越多的假基因被发现有重要的生物学作用 。 Program,TCGA)中 82 例随访信息完整及临床病理
[4]
CTAGE 家族中多个成员的表达与多种肿瘤的进展 和基本资料完善的 ESCC 患者数据,按照 CTAGE15
及预后显著相关,但CTAGE15在肿瘤相关领域尚未 表达量中位数分为高表达组(n=41)和低表达组(n=
见报道。为此本研究探讨 CTAGE15 在食管鳞状细 41),分析 CTAGE15 表达对患者总生存期及疾病特
胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中 异性生存期的影响。
表达与患者临床预后及病理分期的关系,同时初步 1.2.2 临床样本分析
探讨该假基因对ESCC的影响。 将 120 例 ESCC 患者的食管鳞癌及癌旁样本提
取 RNA 后 逆 转 录 为 cDNA,进 行 qRT ⁃ PCR 检 测
1 材料和方法
CTAGE15 表达量。相关引物由滁州通用生物(安
1.1 材料 徽)有限公司提供。CTAGE15:上游5′⁃ACCATTGG⁃
收集的 ESCC 临床样本来自 2016 年 12 月— GTCAGCGTTCAT⁃3′;下游5′⁃GAAGCACAGGTGAG⁃
2017 年 12 月在南京医科大学附属淮安第一医院确 AGTCCC⁃3′;内参 GAPDH:上游 5′⁃TCATTGACCT⁃
诊为ESCC收治入院并行食管癌根治术的患者。纳 CAACTACATGGTTT⁃3′;下游 5′⁃GAAGATGGTGAT⁃
入标准:①患者就诊之前均无其他恶性肿瘤病史; GGGATTTC⁃3′。PCR程序:95 ℃预变性2 min;95 ℃
②患者术前未行任何放疗、化疗或其他肿瘤治疗手 变性 15 s,60 ℃退火 20 s,72 ℃延伸 30 s,重复 40 个
段;③临床病例完善、随访资料完整;④经病理诊断 循环。最后收集并处理数据,结果用2 -ΔΔCt 法计算。
确为ESCC。共收集 120例ESCC患者的食管鳞癌及 按照 CTAGE15 表达量的中位数将 120 例 ESCC
癌旁组织,患者术前签署知情同意书,本研究已通 患者分为高、低两组(各 60 例),分析其与患者临床
过淮安市第一人民医院伦理审核(伦理编号:KY- 病理因素,如性别、年龄、T分期、N分期、M分期和分
2023-054-01)。 化程度等因素之间的关系,及其对患者预后(5年总