Page 38 - 南京医科大学自然版

第44卷第7期
·922 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年7月

归算法筛选得到4个候选枢纽基因分别为GPR183、 达 HDAC9，Western blot 证实过表达效率（图 6A）。
HDAC9、LRRC25、NADK（图4D、E）。 Western blot 显示，与对照组（oe⁃ctrl）相比，过表达
2.5 SAE小胶质细胞炎性活化核心基因的表达验证 HDAC9（oe⁃HDAC9）组中 LPS 诱导的小胶质细胞促
为了验证生信分析结果，构建 LPS 刺激 BV2 小 炎因子IL⁃1β、iNOS 的表达显著增强（图6A）。进一
鼠小胶质细胞活化的体外细胞模型；与对照组比较， 步，过表达 HDAC9 可上调 LPS 诱导 BV2 细胞 JAK1
LPS 刺激组小胶质细胞炎性细胞因子 Il⁃1β、Tnf⁃α、 及 STAT3 磷 酸 化 水 平（p ⁃ JAK1、p ⁃ STAT3），提 示
Inos 的 mRNA 表达水平显著升高，提示模型构建成 HDAC9可能促进小胶质细胞JAK1⁃STAT3通路磷酸
功（图 5A~C）。小胶质细胞内 Hdac9 和 Gpr183 基因 化激活（图6B）。
的mRNA表达在LPS刺激后24 h后显著下降，Lrrc25
3 讨 论
表达上升（图5D~F），与生信分析结果一致；而Nadk
的mRNA表达差异无统计学意义（图5G）。 SAE 可累及超过 50%的脓毒症患者，临床表现

2.6 过表达HDAC9促进小胶质细胞中促炎因子的 为急性精神或意识异常、慢性认知功能受损，与脓
表达以及JAK1⁃STAT3信号通路磷酸化 毒症不良预后密切相关 ［15］ 。小胶质细胞炎性活化
为探索 HDAC9 在小胶质细胞炎症激活中的潜 导致的中枢神经系统急性炎症应答是 SAE 的重要
在作用，本研究通过慢病毒载体在BV2细胞中过表 病理基础 ［16］ 。本研究采用生物学信息学技术筛选

A B

MXRA8
VGLL4 FAM107B
SLC26A11 FAM198B
314 18 1 254 PANX1
KMO NADK CEBPB GPX1 LAT2 LRRC25

GRINA PRKAG1 HDAC9 BLNK GPR183 PSTPIP2

Module genes of GSE65682 DEGs of GSE103156

C
LRRC25 GPR183
GPX1
GRINA

PRKAG1 HDAC9 CEBPB LAT2 BLNK

NADK

D E
4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 3 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 0 4 4 4 4 3 1
Binomial deviance 1.0 Coeffcients 3 2 1
1.5

0.5
0.0 0
-5 -4 -3 -2 -1 -5 -4 -3 -2 -1
Log（λ） Log（λ）
A：Venn diagram demonstrates the identification of the common genes resulting from the intersection of 1 272 DEGs before and after microglial acti⁃
vation of GSE103156 and 332 genes related to GSE65682 sepsis. B：Constructing a protein⁃protein interaction network by using the STRING database.
C：Cytoscape screening for TOP10 genes. D，E：Lasso regression analysis. Binomial deviation as a function of the tuning penalization parameter λ（D），
coefficients as a function of the λ parameter（E）.
图4 SAE小胶质细胞炎性活化核心基因的筛选与鉴定
Figure 4 Screening and identification of the core genes for microglial inflammatory activation in SAE