Page 27 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第12期 彭丹丹，李 言. MicroRNA⁃190调控衰老相关的脂肪能量代谢稳态［J］.
2021年12月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（12）：1728-1734 ·1733 ·

A B C
PRDM16 3′UTR 2.0
miR⁃190⁃5p： 3′…UGGAUUAUAUAGUUUGUAUAGU…5′ 1.5 Ctrl
miR⁃190 1.5 *
human： 5′…AAAACACUUGCCUGAAUACAUAUCACGUAU…3′ *
mouse： 5′…GAAGCACUUGCUUAAAUACAUAUCACGUAU…3′ 1.0 PRDM16相对表达量 1.0
rat： 5′…GAAGCACUUGCUCAAAUACAUAUCACGUAU…3′ RLU *
dog： 5′…AAAGCACUUGCCCAAAUACAUAUCACCCGU…3′ 0.5 0.5
D E
Ctrl miR⁃190 Ant⁃Ctrl Ant⁃190 0
0
PRDM16 95 kDa PRDM16 95 kDa WT Mutant Ctrl miR⁃190 Ant⁃Ctrl Ant⁃190
Tubulin 55 kDa Tubulin 55 kDa
A：PRDM16上miR⁃190的结合位点；B：荧光素报告基因实验验证miR⁃190对293T细胞（WT）和结合位点突变质粒（Mutant）中PRDM16的
作用（与Ctrl比较，P < 0.05，n=6）；C：过表达或敲减miR⁃190对脂肪细胞中PRDM16的RNA表达水平的影响（两组比较，P < 0.05，n=6）；D：过
*
*
表达miR⁃190对脂肪细胞中PRDM16蛋白表达水平的影响；E：敲减miR⁃190对脂肪细胞中PRDM16蛋白表达水平的影响。
图5 PRDM16是miR⁃190的靶基因
Figure 5 PRDM16 is the target gene of miR⁃190

A C
Ctrl Aged Aged+Ant⁃190
0.8 * ** * Ctrl
（ kcal/h） 0.6 * Aged
Aged+Ant⁃190
能量消耗 0.4 iWAT

0.2

0
Light Dark
B
5 000 * * Ctrl
（ kg/hr ） 4 000 * * Aged iBAT
Aged+Ant⁃190
3 000
耗氧量mL/ 2 000

1 000
0
Light Dark
D E
1.5 1.5
Ctrl
* * * * ** ** * ** Aged
* ** ** * 1.0 * * ** * Aged+Ant⁃190
相对表达量 0.5 相对表达量 0.5
1.0

0 0
UCP1 PRDM16 DIO2 CIDEA UCP1 PRDM16 DIO2 CIDEA
A：衰老小鼠敲减miR⁃190对能量消耗的影响；B：衰老小鼠敲减miR⁃190对耗氧量的影响；C：敲减miR⁃190对衰老小鼠脂肪组织形态的影
响（HE，×40）；D：衰老小鼠敲除miR⁃190对褐色脂肪组织中产热基因的影响；E：衰老小鼠敲除miR⁃190对白色脂肪组织中产热基因的影响（两
组比较，P < 0.05，P < 0.01（n=6）。
**
*
图6 miR⁃190敲减对衰老小鼠的影响
Figure 6 Influence of miR⁃190 knock⁃down on aging mice
代谢稳态的调控，miR⁃190通过抑制PRDM16的表达 合，说明 miR⁃190 与衰老呈正相关性。由于在衰老
导致脂肪细胞产热降低从而导致了能量代谢紊乱。 进程中，产热减少，因此进一步向褐色脂肪细胞和
本研究首先通过RT⁃PCR发现衰老小鼠的褐色 白色脂肪细胞中过表达 miR⁃190，并对相关产热基
脂肪组织和白色脂肪组织中miR⁃190的表达水平均 因进行RT⁃PCR，结果表明过表达miR⁃190均会导致
是升高的，并且体外衰老模型的结果也与之相吻 产热基因的表达降低，说明 miR⁃190 抑制脂肪细胞