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第44卷第12期
               ·1650 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2024年12月


              cell lines（U373，U87，and U251），with the highest expression in U373 cells. In U373 cells，transfection with pIRES2⁃SAMD13 and
              shSAMD13 successfully overexpressed and silenced SAMD13，respectively，which promoted and inhibited cell proliferation and
              invasion，respectively. Moreover，SAMD13 overexpression significantly enhanced ERK1/2 phosphorylation，while silencing SAMD13
              reduced it，with no significant effects on Akt1 or STAT3 phosphorylation. The ERK1/2 inhibitor markedly suppressed the U373 cell
              proliferation and invasion induced by SAMD13 overexpression，but did not affect SAMD13 expression. Conclusion：SAMD13 is highly
              expressed in both glioma tissues and cells，and its upregulation promotes glioma cell proliferation and invasion by activating ERK1/2 .
             ［Key words］ glioma；SAMD13；ERK1/2；proliferation；invasion
                                                                          ［J Nanjing Med Univ，2024，44（12）：1649⁃1656］





                  胶质瘤是一类起源于神经胶质细胞的肿瘤，是                          nases 1/2，ERK1/2）和信号转导和转录激活因子 3
              中枢神经系统最常见的原发性肿瘤，约占恶性肿瘤                           （signal transducer and activator of transcription 3，
              的80%。根据病理类型和恶性程度，胶质瘤可分为                           STAT3）的磷酸化激活也与包括胶质瘤在内的多种
              Ⅰ~Ⅳ级，其中Ⅳ级是最具有侵袭性的类型。胶质                            肿 瘤 细 胞 的 增 殖 和 侵 袭 密 切 相 关        ［10- 15］ ，但 是
              瘤具有强大的增殖和浸润性生长能力，通常会侵犯                            SAMD13 能否调控上述分子的磷酸化修饰，目前尚
              多个脑叶，甚至扩展到深层脑结构，还可通过胼胝                            不清楚。因此，本研究检测胶质瘤组织和多种细胞
              体波及对侧大脑半球。额叶是胶质瘤最常见的发                             系中 SAMD13 的表达情况，开展 SAMD13 基因的过
              病部位。目前，临床上治疗胶质瘤的方法主要包括                            表达和沉默实验，研究 SAMD13 对于胶质瘤细胞增
              手术、放疗、化疗、肿瘤电场治疗及其他综合治疗。                           殖和侵袭的影响，并进一步探究SAMD13对于Akt1、
              然而，由于其恶性程度高，且易转移复发，胶质瘤患                           ERK1/2和STAT3活性的调控作用，筛选SAMD13下
              者的预后普遍较差。因此，迫切需要找到有效的分                            游的重要靶分子。
              子靶点，以延长患者生存期并改善预后                 ［1-3］ 。
                                                                1  材料和方法
                  无菌α基序结构域蛋白（sterile alpha motif do⁃
              main⁃containing protein，SAMD）家族是一类包含有             1.1  材料
              无菌α基序（sterile alpha motif，SAM）结构域的蛋白                   总Akt1（t⁃Akt1）、磷酸化Akt1（p⁃Akt1，Ser473）、
              质家族。SAM 结构域是一种高度保守的蛋白质相                           总 ERK1/2（t⁃ERK1/2）、磷酸化 ERK1/2（p⁃ERK1/2，
              互作用模块，广泛存在于多种真核生物蛋白质中，                            Thr202/Tyr204）、总 STAT3（t ⁃ STAT3）和 磷 酸 化
              参与多种细胞功能，如信号转导、细胞周期调控、细                           STAT3（p⁃STAT3，Tyr705）抗体（Cell Signaling Tech⁃
              胞凋亡等。近些年来，SAMD家族在肿瘤进展中，尤                          nology 公司，美国）；SAMD13 抗体（Abcepta 公司，美
              其是在介导肿瘤细胞增殖和侵袭方面的作用备受                             国）；β⁃actin 抗体和 HRP 标记山羊抗兔和山羊抗鼠
              关注。例如，在肝癌细胞中SAMD1缺失会导致细胞                          二抗（武汉 ABclonal 公司）；CCK⁃8 试剂盒和 U0126
                               ［4］
              增殖能力显著下调 。在小细胞肺癌和前列腺癌细                           （ERK1/2 抑制剂）（上海 MCE 公司）；人胶质瘤细胞
              胞中，SAMD5 的表达显著上调，并与肿瘤细胞的增                         系（U87、U373 和 U251）购自上海细胞库；胎牛血清
              殖和患者预后相关         ［5-6］ 。在胶质瘤中存在SAMD9的            （fetal bovine serum，FBS）（Wisent 公司，加拿大）；
              高表达，PARP14可以通过诱导SAMD9表达，促进胶                       DMEM 培 养 基（Gbico 公 司 ，美 国）；Lipofectamine
                          ［7］
              质瘤细胞增殖 。此外，SAMD12的表达与骨肉瘤的                         2000（Thermo Fisher Scientific 公司，美国）；RIPA 裂
              进展有一定关系，研究发现SAMD12的耗竭会损害多                         解液（上海碧云天生物科技有限公司）；RNA提取试
                                      ［8］
              种骨肉瘤细胞的侵袭能力 。然而 SAMD 家族中                          剂（VeZol）、逆转录试剂盒、PCR 试剂盒和 ECL 化学
              SAMD13研究较少，虽然有文献报道SAMD13表达与                       发光试剂盒（南京诺唯赞生物科技有限公司）；Tran⁃
                                         ［9］
              肝细胞癌患者的预后显著相关 ，但目前尚不清楚其                           swell小室（Corning公司，美国）。
              是否可以调控肿瘤细胞的增殖和侵袭。                                 1.2  方法
                  一些信号分子和转录因子，如 Akt 丝氨酸/苏氨                      1.2.1 数据库分析
              酸激酶 1（Akt serine/threonine kinase 1，Akt1）、细胞           使用基于基因表达水平值的交互式分析平台

              外信号调节激酶1/2（extracellular signal⁃regulated ki⁃    （gene expression profiling interactive analysis，GEPIA）
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