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第45卷第11期 林俊杰，孙君健，王 璐，等. IFN⁃γ通过抑制SRC/Areg信号轴减轻克罗恩病肠纤维化［J］.
2025年11月 南京医科大学学报（自然科学版），2025，45（11）：1608-1615，1625 ·1611 ·

A
Control Areg 2.5 2.5 2.0 **
*** **
Relative COL1A1 protein level Relative COL6A1 protein level protein level 1.0
COL1A1 139 kDa 2.0 2.0 1.5
COL6A1 139 kDa 1.5 1.5 α⁃SMA
α⁃SMA 43 kDa 1.0 1.0 Relative 0.5
GAPDH 36 kDa 0.5 0.5
0 0 0
Control Areg Control Areg Control Areg
B Control Areg 15 *
（%） 10

DAPI/EdU Percentage of EdU positive cells 5

0
Control Areg
A：Intestinal fibroblasts derived from CD patients were treated with Areg for 48 h，and the expression levels of collagen proteins（COL1A1，
COL6A1）and the activation marker α⁃SMA were analyzed by Western blot. B：The proliferation of intestinal fibroblasts derived from CD patients was
**
*
assessed using the EdU assay（scale bar=200 μm）. P < 0.05，P < 0.01，and *** P < 0.001（n=3）.
图1 Areg促进CD患者来源的肠道成纤维细胞活化及增殖
Figure 1 Areg promoted activation and proliferation of intestinal fibroblasts derived from CD patients

现，TGF⁃β可通过促进Treg细胞表达Areg介导CD肠 6 ***
*
纤维化 ［14］ 。为系统评估不同细胞因子对 Areg 表达 5
的调控作用，本研究采用 CD 合并肠纤维性狭窄患
者的人肠道成纤维细胞模型，设置了空白对照组及 4
6种细胞因子处理组（IFN⁃γ、IL⁃17A、IL⁃1β、IL⁃33、 AREG relative expression 3
IL⁃36α、TNF⁃α）。RT⁃PCR结果显示，不同细胞因子 2
对Areg表达的调控呈现差异性：IL⁃1β显著促进肠成 1
纤维细胞Areg的表达，而IFN⁃γ则表现出明显的抑制
0
作用（图2）。这一发现不仅验证了课题组先前的研究 Control IFN⁃γ IL⁃17A IL⁃1β IL⁃33 IL⁃36α TNF⁃α
结果 ［14-15］ ，更揭示了促炎因子在纤维化调控中的复杂
The mRNA expression levels of Areg in intestinal fibroblasts treat⁃
作用。鉴于IFN⁃γ对Areg的特异性抑制作用，推测其
ed with various cytokines（IFN⁃γ，IL⁃17A，IL⁃1β，IL⁃33，IL⁃36α，and
可能通过下调Areg表达来减缓纤维化进程。
*
TNF⁃α）were assessed by RT⁃PCR. P < 0.05 and *** P < 0.001（n=3）.
2.3 IFN⁃γ抑制肠成纤维细胞胶原蛋白表达 图2 IFN⁃γ抑制肠成纤维细胞Areg表达
基于前期研究发现 Areg 可显著促进肠成纤维 Figure 2 IFN ⁃ γ inhibited Areg expression in intestinal
细胞胶原蛋白表达 。本研究进一步探讨IFN⁃γ是 fibroblasts
［14］
否通过调控Areg影响胶原蛋白合成。提取CD合并
肠纤维性狭窄患者的人肠道成纤维细胞，设置空白对 的核心环节，涉及α⁃SMA等标志物的表达以及细胞

照组、TGF⁃β（阳性对照）组、IFN⁃γ组及TGF⁃β+IFN⁃γ 运动能力的改变。通过 Ki67 免疫荧光染色特异性
处理组。RT⁃PCR结果显示，IFN⁃γ不仅抑制Areg表 检测增殖期细胞，以评估 IFN⁃γ对人肠成纤维细胞
达（图 3A），还显著下调α⁃SMA（ACTA2）、COL1A1、 增殖能力的作用。结果显示，IFN⁃γ处理组中 Ki67
COL6A1 和 COL6A3 的 mRNA 水平（图 3B~E），表明 阳性细胞比例显著低于对照组（图 4A、B）。同时，
IFN⁃γ可能通过抑制Areg表达参与调控肠成纤维细 利用免疫荧光检测细胞活化指标α⁃SMA，发现IFN⁃γ
胞胶原蛋白合成。 处理后显著抑制了 CD 肠成纤维细胞中α⁃SMA 的

2.4 IFN⁃γ抑制肠成纤维细胞活化及增殖 表达（图 4A、C），提示 IFN⁃γ可能抑制成纤维细胞
成纤维细胞的活化与增殖是肠纤维化进程中 向肌成纤维细胞的转化。综上，IFN⁃γ通过抑制