Page 76 - 南京医科大学自然版

第45卷第11期
·1606 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年11月

A B
Temperature stability in 10 min Temperature stability at 37 ℃
2.5
Nb34 （%） 100 Nb34
Nb42
Nb42
（450 nm） 2.0 Nb45 Relative activity 75 Nb45
1.5
Nb48
Nb48
50
1.0
D
0.5 25
0 0
RT 40 ℃ 60 ℃ 80 ℃ 90 ℃ 95 ℃ 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Temperature Time（d）
C D
Temperature stability at 95 ℃ 125 pH stability of Nbs
（%） 125 Nb34 nm） 100 Nb34
100
Nb42
Nb42
Relative activity 75 Nb48 （450 D 75 Nb48
Nb45
Nb45
50
50
25
25
0 0
0 min 10 min 30 min 1 h 2 h 6 h 12 h 18 h 24 h 3 5 pH 9 11
7
Time
Four types of nanobodies were incubated at different temperatures or pH values，and the affinity of the treated nanobodies to WT⁃RBD was detected
by ELISA. A：Nanobodies were incubated at RT，40，60，80，90 and 95 ℃ for 10 min respectively. B：Nanobodies were incubated at 37℃ for 0，1，2，3，4，
5，6，7，8，9 and 10 days. C：Nanobodies were incubated at 95 ℃ for 0，10 min，30 min，1 h，2 h，6 h，12 h，18 h and 24 h. D：Nanobodies were incubated
at different pH values for 2 h. The OD values at 450 nm was determined by ELISA（n=3）.
图7 实验验证Nb的热稳定性和pH稳定性
Figure 7 Experentally verify the thermal stability and pH stability of the nanobodies

现有文献显示，传统抗体在中和SARS⁃CoV⁃2方 冠状病毒仍然具有一定的战略意义，简易的抗体筛选
面具有较大潜力，然而这些抗体的缺点也较为显著， 策略对于易突变病毒的防控也具有借鉴意义。
如开发成本高、组织渗透能力有限、特异性较低等。 利益冲突声明：
组织中被动扩散的速率与分子大小成反比，Nb分子 所有作者声明无利益冲突。
量小，因此其组织通透性较高，易于进入病变部位。 Conflict of Interests：
并且，Nb具有高亲和力和较多的结合表位，相比传统 The authors declare that they have no competing interests.
作者贡献声明：
抗体，它们与病毒的结合更加敏感。此外，Nb具有优
汪佰成、倪晶怡、刘馨月负责实验操作、数据分析并准备
越的热稳定性和pH稳定性，这就说明其应用不会受
文章初稿。季晨博负责文章的修订。季晨博和龚雪负责整
［26］
限于临床运输和保存 。与传统单克隆抗体相比，Nb 个课题的构思并提供总体方向。
还具有较低的生产成本和较高的产量，这也是它们的 Author’s Contributions：
独特优势。总而言之，Nb具有优越的物理特性，使其 WANG Baicheng，NI Jingyi，and LIU Xinyue conducted
在防治传染病方面具有相当可观的前景。 the experiments，analyzed the data，and prepared the manuscript.

本研究所描述的4种Nb 可以结合SARS⁃CoV⁃2 JI Chenbo was involved in revising the manuscript. JI Chenbo
及其变体的RBD结合域，其中Nb45还可以在体外中 and GONG Xue conceived the study and provided overall direc⁃
和Omicron突变株假病毒。然而，现有的中和试验具 tion for the project.
有局限性，需要评估更多突变株以及假病毒株。另 ［参考文献］
外，根据预测结构显示，与4种Nb相互作用的RBD位 ［1］ GAI J W，MA L L，LI G H，et al. A potent neutralizing
点均属于保守位点，这些结论都可能有助于防治 nanobody against SARS⁃CoV⁃2 with inhaled delivery po⁃
SAR S⁃CoV⁃2及其变体。尽管COVID⁃19大流行已结 tential［J］. Med Comm（2020），2021，2（1）：101-113
束，本研究获得的保守抗体对于未来应对变化多样的 ［2］ World Health Organization. Number of COVID⁃19 cases