Page 37 - 南京医科大学自然版
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第45卷第5期         杨铖铖，倪    斌，郑 明，等. 艾拉莫德抑制巨噬细胞向肌成纤维细胞转分化减缓慢性移植肾
                  2025年5月               间质纤维化［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2025，45（5）：619-626                    ·623 ·


                              A                                              B
                                         Vehicle             IGT                  30    ***  ***
                                                                               Relative fluoresence  （fold of vehicle）  20
                                                                                          ***
                                  M0                                              10
                                                                                 intensity
                                                                                   0
                                                                                     M0   MMT
                                                                                      M0+IGT
                                                                                          MMT+IGT
                                  MMT





                         C               Vehicle                   IGT           D
                               10 5                     10 5
                                  Q2⁃UL        Q2⁃UR       Q2⁃UL        Q2⁃UR        （%）  80  ***  ***
                                  （3.00%）     （0.51%）      （25.30%）    （2.09%）       60      ***
                               α⁃SMA 10 4               10 4                         F4/80 + α⁃SMA + cells  40
                            M0                          α⁃SMA                        20
                               10 3                     10 3                          0
                                                                                         M0+IGT
                                                                                              MMT+IGT
                                  Q2⁃LL       Q2⁃LR        Q2⁃LL        Q2⁃LR            M0   MMT
                                  （65.18%）   （31.31%）      （65.08%）    （7.53%）
                               10 2                     10 2
                                  -10 5  0  10 5  10 6  10 7  -10 5  0  10 5  10 6  10 7  E  1 300
                                         F4/80                     F4/80
                                                                                              ***
                               10 5                     10 5
                                  Q2⁃UL       Q2⁃UR        Q2⁃UL       Q2⁃UR                   ***  ***
                                 （13.76%）    （69.84%）     4 （8.05%）   （27.22%）       （pg/mL） 1 200
                                                                                      1 100
                                 4
                            MMT  α⁃SMA 10               α⁃SMA  10                    ColⅠ  1 000
                                                                                       800
                                                                                       600
                               10 3                     10 3                           400
                                                                                       200
                                                                                        0
                                  Q2⁃LL       Q2⁃LR        Q2⁃LL       Q2⁃LR               M0   MMT
                                 （3.90%）     （12.50%）      （10.83%）   （53.90%）             M0+IGT  MMT+IGT
                               10 2                     10 2
                                  -10 5  0  10 5  10 6  10 7  -10 5  0  10 5  10 6  10 7
                                         F4/80                     F4/80
                   A：Immunofluorescence staining of F4/80 and α⁃SMA in cells from different groups（×400）. B：Semi⁃quantitative fluorescence intensity of co⁃ex⁃
                                                            ***
                pressed F4/80 and α⁃SMA in transplanted kidneys from each group（ P < 0.001，n=7）. C：Proportion of cells co⁃expressing F4/80 and α⁃SMA in cells
                                                                                                    ***
                from different groups. D：Semi⁃quantitative proportion of cells that simultaneously expressed F4/80 and α⁃SMA in different groups（ P < 0.001，n=7）.
                                                                          ***
                E：Secretion levels of ColⅠ in the culture medium supernatant of cells from different groups（ P < 0.001，n=7）.
                                                  图3 IGT可在体外抑制MMT进程
                                             Figure 3 IGT inhibited the MMT process in vitro

                2.4  IGT可能通过激活铁死亡通路抑制MMT、减轻                       MMT 细胞模型行 Western blot 检测，结果显示，相比
                移植肾的间质纤维化形成                                       MMT 组，MMT+IGT 组 TFR 蛋白表达水平明显升高
                    收集MMT组和MMT+IGT组的细胞进行RNA的                     （P < 0.05，图4C、D）。
                提取与纯化收集，RNA样本委托公司进行转录组学                           2.5  IGT诱导经历MMT的巨噬细胞发生铁死亡，改
                测序。结果如图4A所示，差异表达基因共537个，其                         善CAD小鼠的移植肾间质纤维化
                中 ，基 因 表 达 上 调 有 233 个 ，包 含 H6pd、Rusc2、               为了探明在动物模型中，IGT 是否也发挥着抑
                Gm4631、Slc16a6、Ankrd28等；下调基因有304个，包               制铁死亡的作用。取 CAD 组小鼠和 CAD+IGT 组小
                含 lfi208、lsg15、Tgtp2、Mndal、Gvin2 等；差异基因富          鼠的移植肾，于电镜下观察巨噬细胞内线粒体情
                集在铁死亡相关信号通路、NOD 样受体信号通路、                          况。结果表明，CAD+IGT组移植肾中巨噬细胞出现
                趋化因子信号通路等。在排名前10的信号通路中，                           线粒体萎缩、线粒体膜密度增加、线粒体嵴减少等
                铁死亡相关信号通路富集程度最大（图 4B）。对                           铁死亡表现（图5A）。同样，提取移植肾标本蛋白行
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