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南京医科大学学报（自然科学版） 第45卷第6期
·766 · Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences） 2025年6月

·基础研究·

黄芩苷激活自噬抑制炎症促进牙髓干细胞成牙/骨分化

崔 闯 ，孙思怡 ，秦梓一 ，沙 颖 ，徐 海 ，江 飞 ，张光东 1*
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南京医科大学附属口腔医院综合诊疗科，牙体牙髓病科，口腔疾病研究与防治国家级重点实验室培育建设点，江苏省口腔转
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化医学工程研究中心，江苏 南京 210029
［摘 要］ 目的：通过验证黄芩苷（baicalin，BA）在炎症环境下的抗炎效果并探究其对人牙髓干细胞（human dental pulp stem
cell，hDPSC）成牙/骨分化的影响，为牙髓炎的活髓保存治疗提供参考。方法：选取人早期炎症牙髓组织制作冰冻切片并进行
苏木素⁃伊红（hematoxylin⁃eosin，HE）染色，免疫组化染色检测白细胞介素（interleukin，IL）⁃1β表达，免疫荧光染色检测IL⁃1β、诱
导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）的表达。将人单核细胞白血病细胞系THP⁃1分化的巨噬细胞在脂多
糖（lipopolysaccharide，LPS）及干扰素⁃γ（interferon⁃γ，IFN⁃γ）的诱导下极化为 M1 亚群，再用 50 μmol/L 的 BA 处理后，利用免疫
荧光、实时逆转录聚合酶链反应（reverse transcription⁃polymerase chain reaction，RT⁃PCR）和Western blot分析iNOS、IL⁃1β及IL⁃8
的表达变化，利用Western blot检测LC3B、Beclin⁃1及P62的表达变化以观察巨噬细胞自噬，并在使用自噬抑制剂3⁃MA阻断自
噬后检测 IL⁃1β及 IL⁃8 的表达变化。随后，提取不同条件处理的巨噬细胞上清液制备条件培养液作用于 hDPSC 并进行矿化
诱导，采用碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）染色、茜素红（alizarin red S，ARS）染色、RT⁃PCR 及 Western blot 分析 ALP、
牙本质涎磷蛋白（dentin sialophosphoprotein，DSPP）、Runt相关转录因子2（runt⁃related transcription factor 2，RUNX2）、骨桥蛋白
（osteopontin，OPN）及Ⅰ型胶原（typeⅠcollagen，COL⁃1）的表达，以观察炎症环境下 BA 对 hDPSC 成牙/成骨分化能力的影响。
结果：早期牙髓炎组织炎症区周围 IL⁃1β和 iNOS 的表达明显升高。LPS 和 IFN⁃γ诱导后，巨噬细胞由 M0 向 M1 极化，iNOS、
IL⁃1β及IL⁃8表达明显增加。当加入50 μmol/L BA共同孵育24 h后，巨噬细胞极化程度明显降低，IL⁃1β、IL⁃8的mRNA水平明

显下降；同时，与M1组相比，加入BA后LC3B⁃Ⅱ、Beclin⁃1表达升高，P62表达被抑制；3⁃MA阻断自噬后，IL⁃1β及IL⁃8的mRNA
水平显著升高。M1巨噬细胞的上清液作用于hDPSC并进行矿化诱导7~21 d后，hDPSC的ALP活性降低，钙盐沉积减少，ALP、
DSPP、RUNX2、OPN及COL⁃1的表达减少。BA处理后的M1巨噬细胞上清液加入hDPSC后，ALP活性显著升高，钙盐沉积明显
增多，ALP、DSPP、RUNX2、OPN及COL⁃1的表达明显增加。结论：在炎症微环境下，BA可能是通过激活细胞自噬抑制牙髓炎
症反应，促进hDPSC的成牙/骨分化能力。
［关键词］ 黄芩苷；M1巨噬细胞；THP⁃1；成牙/骨分化；牙髓干细胞
［中图分类号］ R781.3 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2025）06⁃766⁃11
doi：10.7655/NYDXBNSN250241

Baicalin activates autophagy，inhibits inflammation and promotes odontogenic/osteogenic
differentiation of dental pulp stem cells

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CUI Chuang ，SUN Siyi ，QIN Ziyi ，SHA Ying ，XU Hai ，JIANG Fei ，ZHANG Guangdong 1*
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1 Department of General Dentistry，Department of Endodontics，the Affiliated Stomatological Hospital of Nanjing
Medical University，State Key Laboratory Cultivation Base of Research，Prevention and Treatment for Oral Diseases，
Jiangsu Province Engineering Research Center of Stomatological Translational Medicine，Nanjing 210029，China
［Abstract］ Objective：This study aims to verify the anti⁃inflammatory effect of baicalin（BA）in an inflammatory environment and
explore its influence on the odontogenic/osteogenic differentiation of human dental pulp stem cells（hDPSC），providing a reference for
the vital pulp therapy of pulpitis. Methods：Select the early inflammatory pulp tissue of the human teeth for making frozen sections and
conducting HE staining，interleukin（IL）⁃1β immunohistochemical staining，as well as IL⁃1β and inducible nitric oxide synthase（iNOS）
immunofluorescence staining. Human monocyte leukemia cells（THP⁃1）were differentiated into macrophages and polarized to the M1

［基金项目］ 国家自然科学基金（82270955）；南京市卫生科技发展专项资金（YKK24293）
通信作者（Corresponding author），E⁃mail：egd_zhang@njmu.edu.cn（ORCID：0000⁃0001⁃7923⁃1482）
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