Page 57 - 《南京医科大学学报》2026年第1期

第46卷第1期 郁心怡，戴 艳，史梦琦，等. 多聚胞嘧啶结合蛋白2在大别班达病毒感染中的作用及
2026年1月 机制［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2026，46（1）：47-54，67 · 51 ·

A 2.5 *** B C 2.5 ***
Relative expression of PCBP2 mRNA 1.5 PCBP2 OE - + 41 kDa Relative expression of PCBP2/β⁃Actin 1.5
2.0
2.0
PCBP2
1.0
1.0
β⁃Actin
42 kDa
0.5
0 0.5 0
Control PCBP2 OE PCBP2 OE - +
D 1.5 *** E F 1.5 ***
Relative expression of PCBP2 mRNA 1.0 PCBP2 -/- - + 41 kDa Relative expression of PCBP2/β⁃Actin 1.0

PCBP2
β⁃Actin
42 kDa
0.5
0.5
0 0
Control PCBP2 -/- PCBP2 -/- - +
OE
-/-
Validation of PCBP2⁃overexpressing（PCBP2 ，A-C）and PCBP2⁃knockdown（PCBP2 ，D-F）in THP⁃1 stable cell lines. Quantitative data were
***
obtained by densitometry of Western blot and normalized to β⁃Actin， P < 0.001（n=3）.
图2 PCBP2稳转细胞系的构建与验证
Figure 2 Construction and validation of PCBP2 stable cell line

实，与对照组相比，PCBP2 组中PCBP2表达显著上
OE
3 讨 论
调，PCBP2 组中PCBP2表达显著降低。
-/-
［5］
2.3 PCBP2 通过调控 SLC7A11/GPX4 通路影响铁 SFTS 的发病率和病死率呈逐年上升趋势 ，阐
死亡 明SFTS发病机制以制定新的治疗策略、寻找潜在治
进一步探讨PCBP2对铁死亡的调控作用，基于 疗靶点，对改善患者的预后具有重要意义。
ROS 和 Fe 在铁死亡中扮演核心角色 ［15］ ，检测了细 研究显示，PCBP2 参与调控多种病毒的复制、
2+
胞内总ROS和Fe 水平，并与50 nmol/L Fer⁃1预处理 识别和清除过程 ［16-17］ 。本研究首次发现DBV感染能
2+
12 h 的样本进行对比。结果显示，与对照组相比， 特异性靶向PCBP2并显著下调宿主细胞PCBP2的表
PCBP2 敲 低 组 总 ROS 和 Fe 水 平 显 著 升 高 ，而 达水平。而且还发现PCBP2基因敲低可抑制DBV复
2 +
PCBP2 过表达组则降低；加入 Fer⁃1 后，3 组整体水 制，而PCBP2基因过表达则促进DBV复制。这提示
平均下降，但各组间差异趋势不变（图3A~D）。 PCBP2 在宿主抗 DBV 感染过程中发挥了重要作
Western blot 分析显示，铁死亡标志物 SLC7A11 用。在其他病毒研究中也有类似现象：PCBP2 过表
和 GPX4 在 PCBP2 过 表 达 组 中 表 达 增 加 ，而 在 达促进口蹄疫病毒复制 ［18］ ；在丙肝病毒感染中
PCBP2敲低组中表达降低，经50 nmol/L Fer⁃1的预处 PCBP2能够抑制Ⅰ型干扰素通路，促进病毒复制 。
［19］
理12 h后，各组蛋白表达水平均有所恢复（图3E~H）。 铁死亡与多种病原体感染（特别是病毒感染）
2.4 PCBP2通过铁死亡调控DBV复制 密切相关 ［20-21］ 。本研究发现，DBV 感染后不论是细
为明确PCBP2是否通过铁死亡影响DBV复制， 胞铁死亡最显著的特征——线粒体形态学（如线粒
检测了病毒的TCID50。与单纯DBV感染的THP⁃1对 体萎缩、线粒体嵴减少或消失、线粒体膜密度增加、

照组相比，PCBP2敲低组TCID50水平降低，而PCBP2 线粒体外膜破裂）还是生化特征（如铁离子积累、
过表达组增加。铁死亡抑制剂（Fer⁃1和Lip⁃1）可部 ROS聚集）都发生了显著改变。铁死亡抑制剂Fer⁃1
分逆转 PCBP2 敲低导致的病毒抑制，而诱导剂 或 Lip⁃1 能逆转 PCBP2 敲低对病毒复制的抑制作
（RSL3 和 erastin）则削弱 PCBP2 过表达引起的病毒 用，而铁死亡诱导剂RSL3或erastin则能抵消PCBP2
促进效应（图4A、B）。 过表达对病毒复制的促进作用。这表明铁死亡参

免疫荧光检测DBV NP蛋白显示，Fer⁃1或Lip⁃1 与了DBV感染后的发病机制。
处理组中NP的表达水平增加（图4C、D），而RSL3或 本研究发现PCBP2表达与铁死亡呈负相关，且
erastin处理组中的NP表达水平降低（图4E、F）。 PCBP2 是通过胱氨酸/谷氨酸逆向转运体信号通路