Page 42 - 南京医科大学自然版
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第46卷第6期
               ·824  ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2026年6月


              疫荧光实验进一步证实,啮齿类PH模型以及PH患                           转染 siRNA 敲低 PASMC 中的 SMOC2 表达,Western
              者的肺小动脉中SMOC2表达增强且与PASMC标志                         blot 结果显示无论是常氧还是低氧条件,siRNA 都
              蛋白α⁃SMA 共定位(图 1C)。此外,低氧处理的                        能下调 SMOC2 表达;SMOC2 低表达升高 PASMC 收
              PASMC 中 SMOC2 蛋白表达量呈时间依赖性上升                       缩标志物α⁃SMA 和 Calponin1 的表达水平,同时降
             (图1D、E)。                                           低增殖标志物 PCNA 的表达水平(图 2A、B)。划
              2.2  SMOC2 敲低抑制低氧诱导 PASMC 的增殖、迁                   痕 实验和 EdU 实验结果显示:敲低 SMOC2 表达
              移及表型转换                                            能显著抑制 PASMC 的细胞迁移(图 2C、D)与增殖
                  为了进一步研究 SMOC2 的生物学功能,通过                      (图2E、F)。


              A                    Mouse                    Rat                      Human
                             Non⁃PH       PH        Non⁃PH        PH          Non⁃PH        PH
                     SMOC2                                                                          -54 kDa
                      β⁃actin                                                                       -43 kDa


              B                       P<0.001                 P<0.001
                                2.0                      2.0                     2.5  P<0.001
                                                                   ▲
                                                                   ▲ ▲ ▲         2.0
                               SMOC2/β⁃actin  1.0       SMOC2/β⁃actin  1.0  ▲   SMOC2/β⁃actin  1.5
                                                                   ▲
                                                         1.5
                                1.5
                                                                                 1.0
                                                         0.5
                                0.5
                                  0                       0                      0.5 0
                                   Non⁃PH  PH               Non⁃PH  PH              Non⁃PH  PH
              C              Mouse                            Rat                            Human
                  α⁃SMA  SMOC2    DAPI   Merge   α⁃SMA   SMOC2   DAPI    Merge   α⁃SMA  SMOC2    DAPI    Merge
               Non⁃PH




               PH
                                                                                                           50 μm

              D                                mPASMC        rPASMC       hPASMC
                                Hypoxia Time(h)
                                             0  12  24 48  0  12  24 48  0  12  24 48
                                      SMOC2                                        -54 kDa
                                       β⁃actin                                     -43 kDa

              E                      P<0.001
                                                              P<0.001                  P<0.001
                              2.0  P=0.017  ▲  ▲  ▲  ▲  ▲  3.0  P=0.002  ▲       2.5  P<0.001  ▲
                                   P<0.001
                             SMOC2/β⁃actin  1.5        SMOC2/β⁃actin  2.0  P=0.025  ▲ ▲ ▲  ▲  ▲  SMOC2/β⁃actin  1.5  P=0.006  ▲ ▲ ▲  ▲  ▲  ▲
                                                                                 2.0
                              1.0
                                                                                 1.0
                                                        1.0
                              0.5
                                0                        0                       0.5 0
                                  0 h 12 h 24 h 48 h       0 h 12 h 24 h 48 h        0 h 12 h 24 h 48 h
                 A,B:Representative immunoblots and relative densitometric analysis of SMOC2 protein expression levels in lung tissues(mouse:Non⁃PH,n=4;
              PH,n=4;rat:Non⁃PH,n=5;PH,n=6;human:Non⁃PH,n=5;PH,n=5). C:Representative immunofluorescence of SMOC2(red)and α⁃SMA(green)in
              pulmonary arteries of mouse,rat and human. Nuclei were counterstained with DAPI(blue),scale bars=50 μm. D,E:Representative immunoblots
              and relative densitometric analysis of SMOC2 protein expression levels in PASMC exposed to hypoxia(3% O2)for the indicated times,normalized to
              β⁃actin(n=3).
                                      图1 SMOC2在肺动脉高压肺组织中高表达并定位于PASMC
                                  Figure 1 SMOC2 was highly expressed in PH and localized in PASMCs
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