Page 46 - 南京医科大学自然版
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第46卷第6期
·828 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2026年6月
功能。结果显示,miR⁃125a 或miR⁃150 过表达可显 氧 诱 导 的 PASMC 增 殖 标 志 物 PCNA 蛋 白 ,促 进
著抑制PASMC迁移和增殖(图5A~D)。Western blot PASMC 收缩表型标志物α⁃SMA、Calponin1 表达(图
实验分析显示,过表达miR⁃125a 或miR⁃150抑制低 5E、F)。
A Normoxia Hypoxia
NC miR⁃125a mimic miR⁃150 mimic NC miR⁃125a mimic miR⁃150 mimic
h
0
h
24
1 000 μm
● NC
B C D ● NC
miR⁃125a mimic P<0.001 ■ miR⁃125a mimic P<0.001
■
▲ miR⁃150 mimic NC miR⁃125a mimic miR⁃150 mimic ▲ miR⁃150 mimic
P<0.001 P<0.001
P<0.001 P<0.001
30 40
P<0.001 Normoxia (%) P<0.001
(%) 20 P<0.001 ▲ ▲ 30 P<0.001 ▲ ▲ ▲ ▲ ▲
Migration rate 10 ▲ ▲ ▲ ▲ Hypoxia EdU positive cells 20 ▲ ▲ ▲ ▲ ▲
10
400 μm
0 0
Normoxia Hypoxia Normoxia Hypoxia
E Normoxia Hypoxia F
miR⁃125a mimic miR⁃125a mimic ● NC ● NC ● NC
miR⁃150 mimic
miR⁃150 mimic
miR⁃125a mimic
miR⁃125a mimic
miR⁃125a mimic
■
■
■
NC NC ▲ miR⁃150 mimic ▲ miR⁃150 mimic ▲ miR⁃150 mimic P=0.005
P<0.001 P=0.005
α⁃SMA -42 kDa 2.0 3.0 P=0.006 2.0 P=0.001
P<0.001
P<0.001
Tubulin P<0.001
-55 kDa 1.5 P=0.003 ▲ ▲ P<0.001 1.5 P<0.001
a⁃SMA/Tubulin 1.0 ▲ Calponin1/Tubulin ▲ P=0.005 PCNA/Tubulin 1.0 ▲
▲
Calponin1 -32 kDa ▲ ▲ 2.0 P<0.001 ▲ P=0.005 P<0.002 ▲ ▲
▲
Tubulin -55 kDa 0.5 1.0 ▲ ▲ ▲ ▲ ▲ ▲
PCNA -36 kDa 0.5
0 0 0
Tubulin -55 kDa Normoxia Hypoxia Normoxia Hypoxia Normoxia Hypoxia
A,B:Representative images(A)and quantification(B)of wound⁃healing assay in PASMC transfected with miR⁃125a,miR⁃150 mimic,or negative
control(NC),followed by exposure to normoxia or hypoxia for 24 h. Scale bar=1 000 μm. C,D:Representative images(C)and quantification(D)of EdU
(red)staining in PASMC transfected with miR⁃125a,miR⁃150 mimic or NC,followed by hypoxia or normoxia exposure. Scale bar=400 μm. E,F:Repre⁃
sentative immunoblots(E)and relative densitometric analysis(F)of α⁃SMA,Calponin1,and PCNA protein levels in PASMC(n=3).
图5 miR⁃125a和miR⁃150抑制PASMC迁移和增殖
Figure 5 miR⁃125a and miR⁃150 suppressed the migration and proliferation of PASMC
2.6 miR⁃125a 与 miR⁃150 调控 SMOC2 抑制 PASMC (图6A、B)以及EdU实验(图6C、D)结果显示,SMOC2
迁移和增殖 重 组 蛋 白 可 部 分 逆 转 miR ⁃ 125a 与 miR ⁃ 150 对
为 进 一 步 阐 明 miR ⁃ 125a 和 miR ⁃ 150 抑 制 PASMC 迁移和增殖的抑制作用。进一步 Western
PASMC 表型转换依赖 SMOC2,利用 SMOC2 重组蛋 blot 实验分析显示,SMOC2 重组蛋白部分逆转 miR⁃
白处理PASMC,检测其表型转换的情况。划痕实验 125a 和 miR⁃150 过表达介导的 PASMC 增殖标志物

