Page 11 - 南京医科大学自然版

第46卷第7期 曹丹丹，倪思琦，王迎伟，等. JNK上调HOXB4基因表达对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响［J］.
2026年7月 南京医科大学学报（自然科学版），2026，46（7）：953-962 ·957 ·

细胞的增殖（图 2F）和侵袭（图 2G、H）均显著强于 光显微镜观察GFP表达，并通过RT⁃PCR 和 Western
pIRES2⁃EGFP转染组。 blot检测HOXB4的表达量。结果显示，shHOXB4⁃i1
2.3 沉默HOXB4基因抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭 转染组 HOXB4 的 mRNA（图 3A、B）和蛋白（图 3C、
将针对 HOXB4 基因不同靶点的 3 种 shRNA 质 D）表 达 水 平 明 显 低 于 shCTR、shHOXB4 ⁃ i2 和
粒（shHOXB4⁃i1、shHOXB4⁃i2、shHOXB4⁃i3）及其对 shHOXB4⁃i3 转染组，表明 shHOXB4⁃i1 为最佳沉默
照质粒（shCTR）分别转染 U87 细胞，48 h 后通过荧 效率靶点。因此采用shHOXB4⁃i1开展实验，同时将

A GFP White light B C
U87 U251 U87 U251
4 ** 5 4 **
pIRES2⁃HOXB4
pIRES2⁃EGFP Relative HOXB4 mRNA levels 2 Relative HOXB4 1 mRNA 2
U87 pIRES2⁃HOXB4 pIRES2⁃EGFP 3 3 levels

HOXB4 163 bp HOXB4 163 bp 1 0 0
pIRES2⁃HOXB4
pIRES2⁃HOXB4
U251 GAPDH 496 bp GAPDH 496 bp pIRES2⁃EGFP pIRES2⁃EGFP

D U87 U251 E 3 U87 4 U251
pIRES2⁃EGFP pIRES2⁃HOXB4 pIRES2⁃EGFP pIRES2⁃HOXB4 Relative HOXB4 protein levels 2 ** Relative HOXB4 protein levels 3 2 **

HOXB4 34 kDa HOXB4 34 kDa 1 1
β⁃actin 42 kDa β⁃actin 42 kDa 0 0
pIRES2⁃HOXB4
pIRES2⁃EGFP pIRES2⁃EGFP
pIRES2⁃HOXB4
F
pIRES2⁃EGFP
1.5 U87 pIRES2⁃HOXB4 H
U87
* 3 000 **
nm） 1.0 G pIRES2⁃EGFP pIRES2⁃HOXB4
（450 D 0.5 Cell number 2 000

U87 1 000
0
0 20 40 60
Time（h） 0
pIRES2⁃EGFP pIRES2⁃HOXB4
pIRES2⁃EGFP U251
1.5 U251 pIRES2⁃HOXB4 U251 1 500
** *
（450 nm） D 1.0 Cell number 1 000

0.5
500
0
0 20 40 60 0
pIRES2⁃EGFP pIRES2⁃HOXB4
Time（h）
U87 and U251 cells were transfected with empty vector pIRES2⁃EGFP or HOXB4⁃overexpressing vector pIRES2⁃HOXB4 for 48 h respectively.
A：Plasmid transfection efficiency in U87 and U251 cells（×100）. B，C：RT⁃PCR detected HOXB4 mRNA levels. D，E：Western blot measured HOXB4
protein levels. F：CCK⁃8 assessed cell proliferation at 0，24，and 48 h；G，H：Transwell evaluated cell invasion at 12 h（×100）. Compared with the
*
**
pIRES2⁃EGFP group，P < 0.05，P < 0.01（n=3）.
图2 过表达HOXB4基因促进U87和U251细胞增殖和侵袭
Figure 2 Over expression of HOXB4 promoted proliferation and invasion of U87 and U251 cells