Page 12 - 南京医科大学自然版

第46卷第7期
·958 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2026年7月

其命名为shHOXB4。 低。CCK⁃8 结果显示，shHOXB4 转染组的细胞增殖
将 shCTR 和 shHOXB4 质 粒 分 别 转 染 U87 细 水平显著低于shCTR转染组（图3I）。Transwell 实验
胞，48 h 后行 RT⁃PCR 和 Western blot 实验。结果表 表明，shHOXB4 转染组的细胞侵袭数量也明显低
明，与 shCTR 转染组相比，shHOXB4 转染组 HOXB4 于 shCTR 转染组（图 3J、K）。以上结果提示，沉默
的mRNA（图3E、F）和蛋白（图3G、H）水平均明显降 HOXB4基因可抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力。

A C E
shCTR shHOXB4⁃i1 shHOXB4⁃i2 shHOXB4⁃i3 shCTR shHOXB4⁃i1 shHOXB4⁃i2 shHOXB4⁃i3 shCTR shHOXB4

HOXB4 163 bp HOXB4 34 kDa HOXB4 163 bp
GAPDH β⁃actin 42 kDa GAPDH 496 bp
496 bp
B 1.5 D 1.5 F 1.5
Relative HOXB4 mRNA levels 1.0 ** Relative HOXB4 protein levels 1.0 ** Relative HOXB4 mRNA levels 1.0

0.5
0.5
0 0 0.5 **
shCTR shHOXB4⁃i2 shCTR shHOXB4⁃i2 0 shCTR shHOXB4
shHOXB4⁃i1
shHOXB4⁃i3
shHOXB4⁃i1
shHOXB4⁃i3
G I J
1.0 * shCTR shCTR shHOXB4
shHOXB4
shCTR shHOXB4 nm） 0.8
0.6
（450 0.4
HOXB4 34 kDa
β⁃actin 42 kDa D 0.2
0
0 20 40 60
H 1.5 Time（h） K 2 000
Relative HOXB4 protein levels 1.0 ** Cell number 1 000 **
1 500

0.5
500
0 0
shCTR shHOXB4 shCTR shHOXB4

U87 cells were transfected with shCTR，shHOXB4⁃i1，shHOXB4⁃i2，and shHOXB4⁃i3 for 48 h. A，B：RT⁃PCR detected HOXB4 mRNA levels.
C，D：Western blot measured HOXB4 protein levels. E-H：The mRNA and protein levels of HOXB4 were checked via RT⁃PCR（E，F）and Western blot
（G，H）. I：CCK⁃8 assessed cell proliferation at 0，24，and 48 h. J，K：Transwell evaluated cell invasion at 12 h（×100）. Compared with the shCTR
*
**
group，P < 0.05，P < 0.01（n=3）.
图3 沉默HOXB4基因抑制U87细胞增殖和侵袭
Figure 3 HOXB4 silencing on proliferation and invasion of U87 cells

2.4 JNK 促进 HOXB4 的表达以及胶质瘤细胞的增 SP600125（JNK 抑制剂，10 μmol/L）处理胶质瘤细
殖和侵袭 胞 3 h，观察抑制上述信号分子后对 HOXB4 基因
鉴于 AMPK、p38 MAPK 和 JNK 信号通路较为 表达的影响。RT⁃PCR 和 Western blot 实验结果显
常见，且在胶质瘤中能够调控某些转录因子（如 示，与 DMSO 处理相比，Compound C、SB203580 和
HOXB9、MYC 和 p53）的表达，故本研究分别使用 SP600125 处理可分别抑制 U87 细胞中 AMPK、p38
DMSO（溶剂对照）、Compound C（AMPK 抑制剂， MAPK和JNK的磷酸化水平（图4A、B）。此外，使用
10 μmol/L）、SB203580（p38 MAPK抑制剂，10 μmol/L）、 SP600125 处理 U87 细胞后，HOXB4 的 mRNA（图