Page 49 - 南京医科大学自然版

第46卷第9期 潘 婷，汪 静，孙晓琦，等. Pin1负向调控Notch1信号通路抑制神经干细胞增殖［J］.
2026年9月 南京医科大学学报（自然科学版），2026，46（9）：1315-1322，1330 ·1319 ·

A B Pin1 DAPI Merge
t c a c c a a c g c c a g c c a g t g g g a g c g g c c c a g c g g c g g c a g c
TCACCAACGCCAGCCAGTGGGAGCGGCC ⁃ AGCGGCGGCAGC
WT

Pin1 -/-
410 400 390 380
200 μm
C -/- D
WT Pin1 Nestin DAPI Merge
β⁃actin 42 kDa
WT
Pin1 17 kDa

Pin1 -/-

200 μm
-/-
A：Sequencing analysis of single⁃cell colony 8#. B：Immunofluorescence staining for Pin1 in Pin1 NSCs（n=3）. C：Western blot analysis of Pin1
-/-
-/-
expression in Pin1 NSC（n=3）. D：Immunofluorescence staining for Nestin in Pin1 NSC（n=3）.
图2 Pin1敲除的NSC的基因型和表型鉴定
-/-
Figure 2 Genotyping and phenotyping of Pin1 NSC
Pin1缺失未损害C17.2细胞的干性特征。 评估。BrdU 检测结果显示，Pin1 敲除的 C17.2 NSC

2.3 Pin1敲除显著增强NSC的增殖能力 的 BrdU 阳性细胞比例显著高于 WT 对照（图 3A、
为了明确 Pin1 敲除对 NSC 增殖能力的具体影 B）。同时，细胞增殖标志物Ki67的免疫荧光分析也
响，采用 BrdU 掺入实验和 Ki67 免疫荧光染色进行 证实，Pin1 敲除的 C17.2 NSC 的 Ki67 阳性细胞数较

A BrdU DAPI Merge B 1.5
Percentage of BrdU + positive cells 0.5
WT （%） 1.0 **

Pin1 -/- 0 WT Pin1 -/-

10 μm
C D
Ki67 DAPI Merge 1.5
Percentage of Ki67 + positive cells 0.5
WT （%） 1.0 **

Pin1 -/- 0 WT Pin1 -/-

200 μm
A：Representative immunofluorescence images of BrdU staining in NSC. B：Quantification of the percentage of BrdU⁃positive cells（n=3）. C：Repre⁃
**
sentative immunofluorescence images of Ki67 staining in NSC. D：Quantification of the percentage of Ki67⁃positive cells（n=3）. P < 0.01.
图3 Pin1 NSC增殖能力增强
-/-
Figure 3 Pin1 knockout enhanced the proliferation ability of NSC