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第46卷第9期 潘 婷，汪 静，孙晓琦，等. Pin1负向调控Notch1信号通路抑制神经干细胞增殖［J］.
2026年9月 南京医科大学学报（自然科学版），2026，46（9）：1315-1322，1330 ·1321 ·

A -/- -/- C
WT Pin1 Pin1 +DAPT Ki67 DAPI Merge
NICD 110 kDa
WT
β⁃actin 42 kDa

B 1.5 *** ** ** Pin1 -/-
NICD relative protein level 1.0 Pin1 -/- +DAPT

0.5
0
WT
Pin1 Pin1 -/- -/- +DAPT 100 μm
D （%） 1.5 * E 5 4 *** ** **
Percentage of Ki67 + positive cells 1.0 ** Relative expression level of Hes1 mRNA 3 2

0.5

0 1 0
WT Pin1 -/- +DAPT WT Pin1 -/- +DAPT
Pin1 -/- Pin1 -/-

-/-
A：Western blot analysis of NICD protein expression in Pin1 NSC following DAPT treatment（n=3）. B：Quantitative analysis of relative NICD pro⁃
-/-
-/-
tein levels in DAPT⁃treated Pin1 NSC（n=3）. C：Representative immunofluorescence images of Ki67 staining in Pin1 NSC following DAPT treatment
-/-
-/-
（n=3）. D：Quantification of Ki67⁃positive signals in DAPT⁃treated Pin1 NSC（n=3）. E：qRT⁃PCR analysis of Hes1 expression in Pin1 NSC following
*
**
DAPT treatment（n=3）. P < 0.05，P < 0.01，and *** P < 0.001.
图5 Pin1敲除通过激活Notch1信号通路促进NSC增殖及挽救实验
Figure 5 Pin1 knockout promoted NSC proliferation via Notch1 pathway activation and rescue experiments
下对Notch1通路具有负向调控作用。 著增强。RNA⁃Seq 及实验验证表明，Pin1 细胞中
-/-
Notch1受体及其下游靶基因Hes1表达显著上调，且
3 讨 论
使用 DAPT 阻断 Notch 通路可逆转 Pin1 缺失引起的
NSC的自我更新与分化平衡是神经系统发育及 促增殖表型。既往研究多报道 Pin1 在多种肿瘤
损伤修复的基础 ［13-17］ 。而相比原代胚胎干细胞分离 （如乳腺癌、膀胱癌）中过表达，通过稳定Cyclin D1、
自囊胚内细胞团，C17.2 细胞系则来源于新生小鼠 β⁃catenin 等癌蛋白促进细胞增殖，因此Pin1常被视
小脑，来源不同；同时 C17.2 细胞系增殖速度、稳定 为促癌因子 ［6-9，22］ 。然而，本研究结果显示 Pin1 在
性等更适合细胞特性、初步分子机制研究，而原代 C17.2 神经干细胞中扮演了相反的角色——即“增
胚胎干细胞更适用于全能性调控、胚胎发育机制等 殖刹车”的角色。这种组织或细胞特异性的功能差
研究方向。因此 C17.2 细胞系是经典的小鼠胚胎 异可能与底物蛋白及其磷酸化状态的差异有关。
NSC模型，又因其遗传背景清晰且具备多向分化潜 Pin1 特异性识别磷酸化的丝氨酸/苏氨酸⁃脯氨酸
能，被广泛用于解析神经发育早期的分子机制。本 （pSer/Thr⁃Pro）基序并催化其发生顺反异构。因此
研究利用CRISPR/Cas9技术构建了Pin1 稳定敲除的 推测，在 C17.2 细胞中，NICD 或其上游调控因子可
C17.2 细胞系，首次揭示了肽基脯氨酰顺反异构酶 能存在 Pin1 识别位点，Pin1 结合后可能诱导了
Pin1 在 NSC 中作为一种负向调控因子，通过抑制 Notch1 的构象改变，从而促进其泛素化降解或抑制
Notch1信号通路来限制细胞的过度增殖。这一发现 其入核转录活性；当Pin1缺失时，这种抑制被解除，
丰富了Pin1在神经系统中的功能图谱。 导致 Notch 信号持续激活。这与近期有文献报道
本 研 究 的 核 心 发 现 在 于 Pin1 缺 失 导 致 了 Pin1 在某些特定背景下（如早幼粒细胞白血病）可
Notch1 信号通路的异常激活及 NSC 增殖能力的显 作为抑癌因子的发现相呼应 ，提示 Pin1 的功能具
［3］