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第6期 总第125期                           南京医科大学学报（社会科学版）京医科大学学报（社会科学版）                             ·
                                                    南
                 2024年12月                     Journal of Nanjing Medical University（Social Sciences）of Nanjing Medical University（Social Sciences）  · 643
                                              Journal
               露环境基本是无菌实验室，运输中与液氮接触时间                            逐渐被开发，它通过直接浸入冷却剂来快速冷却精
               也较短，只要精子存放的储存管密封性没有问题，                            子，防止致命的细胞内冰结晶和高盐浓度的有害影
               此类污染就会减少。                                         响，但随之而来的问题是，无法对可能被不同病原
                   对于样本处理中精液的优化处理，精子洗涤等                          体污染的商业生产的液氮进行完全灭菌                  ［13］ 。
               通常被认为是除去精液中微生物的方法。一项回顾                                 商业化液氮可能存在微生物污染的情况，使得
               性分析发现在 3 994 名女性的 11 585 个周期的辅助                   近年来不直接与液氮接触的气相存储备受推崇。
               生殖中，通过精子洗涤避免了 HIV 传播，56.3%的夫                      液相存储和气相存储各有优劣，在此笔者建议根据
               妇通过使用洗涤后的精子实现了临床妊娠                     ［11］ 。但    不同的操作环节与使用场景进行选择（表 1）。近年
               是洗涤并非万能，有研究报道采用三种精子洗涤方                            来，气相存储被研究者不断开发，他们使用台式设
               法均无法很好地去除 HPV，并建议在入库前就对供                          备生产与液氮温度相同的无菌液态空气，而不是低
               精者进行HPV感染的筛查           ［12］ 。                     温氮蒸汽，用于对人类精子进行无冷冻保护剂的玻
                   对于存储，目前精子多采用程式化冷冻或玻璃                          璃化冷冻    ［14］ ，从根本上解决了存储介质带入的微生
               化冷冻方法，而近年来无冷冻保护剂的玻璃化冷冻                            物污染。

                                             表1 精子库不同阶段精液标本存放策略的选择
                  类别                 第一阶段                        第二阶段                        第三阶段
                存放区域     捐献区                             待供区                      外供区
                定义       正处于志愿者捐献过程中的标本                  志愿者捐献完成，等待 6 个月 志愿者完成 6 个月潜伏期后复查 HIV
                                                         潜伏期后复查HIV的标本             合格，可以外供用于临床治疗的标本
                存放时间     存放时间短，为 2~3 个月，最长不超过            存放时间为 6 个月，少数超过 长期存放
                         6 个月                            6个月
                存取频率     频繁，3~5天/次                       一般存取各一次                  需不定期存取
                存放策略     小型液相罐                           气相罐                      中型或者大型液相罐
                策略优势     标本存取频繁，采用小型罐便于日常操 标本存取频次最低，但其中存 标本存取频次中等，所存贮标本经过
                         作，降低安全事故发生率，且液相罐保存 贮标本未经过 HIV 复查，采用 HIV 复查为合格标本，不存在交叉污
                         有利于减少存取过程中的温度波动，有 密封管和大型气相罐保存可以 染问题，采用中型或者大型液相罐保
                         利于标本保存，标本存放周期短，采用密 有效防止标本交叉污染                            存，可以提高标本库的空间利用，维
                         封管保存交叉污染可能性低                                             持标本储存温度的恒定，有利于标本
                                                                                  的长期保存
                   对于精子样本的包装，主要通过密封型载体和                          员应接受培训，并根据相应的材料安全数据、实验
               非密封型载体进行保存。目前精子库使用的主要                             室标准操作程序（standard operating procedure，SOP）
               是旋盖冻存管和加热封口冻存管。当冻存管不能                             遵守处理液氮的安全规则。标准操作程序应包括
               完全密闭，液氮和精子标本接触，液氮就成为微生                            在建筑物和实验室内安全运输，以及容器中注入液
               物互相污染的媒介。加热封口冻存管通过加热使                             氮的规则和程序等，遵守这些规则可防止因冷冻解
               冻存管完全密封，液氮不会与精子接触，从而杜绝                            冻标本发生的飞溅与污染风险              ［16］ 。
               通过液氮造成微生物污染的可能。                                       （二）标本库的设备检测与更新
                   用于保存的储存容器，如液氮罐需要定期消毒，                             必须意识到，再好的存储设施都有可能发生故
               以降低交叉污染的风险。尽管用于常规消毒的消                             障，早发现早处理，防患于未然，在精子受损之前及
               毒试剂很多，如过氧化氢、酒精、洗涤剂等，但是目                           早发现故障才是避免损失的最佳方法。这就需要
               前还没有关于消毒剂或清洁剂对液氮罐消毒效果                             预计到故障的发生并随时准备好采取措施，做好定
               的详细研究报道。因此有研究者建议，将洗涤后不                            期监控巡查与检修。应对精子库整体设施进行每
               立即使用的液氮罐干燥储存，同时严格密封，以防                            周一次的全面巡查，同时为了避免设备故障或人员
               止环境微生物的滋生。当罐子再次使用前最好在                             疏忽导致的标本存放危险，需要对液氮罐进行实时
               重新注入新鲜液氮前进行额外的清洗                   ［15］ 。建议对      温度监控，给液氮罐安装温度或者液面监控装置，
               于不含吸附层的液氮罐定期进行清洗消毒后再使                             并提供远程报警，有利于及时处理突发情况。有研
               用，可以先使用中性洗涤剂和温水把液氮罐冲洗干                            究者开发了一种基于重量监测的低温储罐故障报
               净，罐内用 75%的酒精消毒或紫外线照射，注意定                          警系统，他们将液氮罐放置在定制设计的秤上，并
               期更换陈旧液氮，避免液氮中的病毒细菌不断富集                            设置了液氮的慢速、中速和快速三种损失速度，连
               浓缩。                                               续监测重量和温度数据，以模拟储罐故障的三种情
                   为了最大限度地降低污染风险，实验室工作人                          况，然后发现重量的变化快于温度的变化，可以作
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