Page 12 - 第10期

第41卷第10期
·1430 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年10月

A B
B16⁃OVA PBS
（ % ） 4.0 OVA **
3.0
Days 0 7 12 16 2.0 HS⁃OVA ** *
1.5
HS/PEI⁃OVA
i.n. i.V. Immune response 1.0 *
PBS DC⁃PSB CD8 + IFN⁃γ + T细胞
OVA DC⁃OVA 0.5
HS⁃OVA DC⁃HS⁃OVA
HS/PEI⁃OVA DC⁃HS/PEI⁃OVA 0
Vaccination no stimulation SIINFEKL anti⁃CD3
C
3 200
PBS
OVA ***
（ pg/mL） 1 600 HS⁃OVA ***
2 400
HS/PEI⁃OVA
**
IFN⁃γ 800 ***

0
no stimulation SIINFEKL anti⁃CD3
A：皮下接种B16⁃OVA黑色素瘤细胞建立荷瘤小鼠模型，分别进行OVA、HS⁃OVA或HS/PEI⁃OVA免疫；B：流式细胞术检测CD8 IFN⁃γ T细
+
+
胞比率；C：ELISA检测细胞培养上清中IFN⁃γ的水平。两组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001，n=3。
*
***
**
+
+
图5 DC⁃HS/PEI⁃OVA免疫B16⁃OVA荷瘤小鼠后显著增强小鼠体内CD8 IFN⁃γ T细胞比率及特异性T细胞IFN⁃γ的分泌
Figure 5 Vaccination with DC⁃HS/PEI⁃OVA significantly increased the percentage of CD8 IFN⁃γ T cells and IFN⁃γ secre⁃
+
+
tion of specific T cells in the B16⁃OVA tumor⁃bearing mice
胞浆中 Vx3GFP 分离的泛素化抗原蛋白的表达情 OVA 免疫组 CD8 IFN⁃γ T 细胞的比率明显增加，比
+
+
况。结果发现当 OVA 与 HS/PEI 结合后，DC 细胞内 其他组产生更高水平的 IFN⁃γ。这些结果证明了
释放的 Ub⁃OVA 明显增加。成熟 DC 分泌的 Th1 型 HS/PEI在体内能显著增强DC交叉提呈抗原进而诱
细胞因子 IL⁃12 已证实可以促进细胞毒性 T 淋巴细 导特异性T细胞免疫应答。
胞（CTL）应答 ［13-14］ 。通过检测 DC 负载 OVA 联合纳 抗原的高效提呈是诱导有效T细胞免疫应答的
米颗粒后分泌 IL⁃12 的变化，我们发现 DC 负载 HS/ 关键。本研究证明了PEI修饰的氢氧化铝纳米颗粒
PEI⁃OVA后分泌IL⁃12明显增加。表明HS/PEI可通 （HS/PEI）能显著增强DC 抗原提呈作用诱导高效的
过增加 DC 中泛素化蛋白的表达及 IL⁃12 的分泌诱 T 细胞应答。更重要的是，我们进一步证明了 HS/
导高效的细胞免疫应答。 PEI联合抗原后能够在体内诱导抗原特异性的免疫
已证实IFN⁃α/β能有效诱导DC的成熟，增强DC 应答。DC负载HS/PEI联合抗原后在抗肿瘤免疫应
对抗原的交叉提呈从而激活 CD8 T 细胞 ［16-17］ 。DC 答方面的作用还需进一步研究。
+
表达多种TLR，TLR的激活是DC实现有效交叉提呈
［参考文献］
的关键信号 ［21］ 。TLR7/8 激活剂 R848、TLR7 激动剂
Imiquimod刺激DC可显著上调DC表面MHC Ⅱ类分 ［1］ GARDNER A，DE MINGO PULIDO Á，RUFFELL B. Den⁃
子和共刺激分子CD40、CD80、CD86的表达，并增加 dritic cells and their role in immunotherapy［J］. Front Im⁃
IFN⁃α的分泌 ［22-25］ 。本研究结果也证实了 IFN⁃α和 munol，2020，11：924
［2］ SANTOS P M，BUTTERFIELD L H. Dendritic cell⁃based
R848 刺激可进一步促进 HS/PEI 增强 DC 交叉提呈
cancer vaccines［J］. J Immunol，2018，200（2）：443-449
的作用。其他TLR刺激物Poly（I：C）、CpG、LPS等对
［3］ HE P，ZOU Y，HU Z. Advances in aluminum hydroxide⁃
HS/PEI增强DC交叉提呈的作用还有待进一步研究。
based adjuvant research and its mechanism［J］. Hum
为了进一步探讨 HS/PEI 能否在小鼠体内增强
Vaccin Immunother，2015，11（2）：477-488
+
DC对OVA抗原的交叉提呈进而诱导特异性CD8 T
［4］ PIELENHOFER J，SOHL J，WINDBERGS M，et al. Cur⁃
细胞活化，我们用 OVA、HS⁃OVA 或 HS/PEI⁃OVA 负 rent progress in particle ⁃ based systems for transdermal
载 DC 后免疫 B16⁃OVA 荷瘤小鼠，取出小鼠脾脏和 vaccine delivery［J］. Front Immunol，2020，11：266
淋巴结细胞后用 SIINFEKL 再刺激，发现 HS/PEI⁃ ［5］ MOYER T J，KATO Y，ABRAHAM W，et al. Engineered