Page 14 - 南京医科大学学报自然科学版

第
第40卷第6期41卷第3期
2021
·320 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2020年6月年3月

模结果显示，AIM2基因敲除小鼠体重增加水平显著 AIM2缺失后，可以显著诱导脂肪合成相关分子脂肪
高于WT小鼠（图2A）。小鼠性腺周脂肪组织HE染 酸结合蛋白4（fatty acid binding protein 4，FABP4）和
色结果表明，相比于 WT 小鼠，AIM2 基因敲除小鼠 过氧化物酶体增殖剂激活受体γ（peroxisome prolif⁃
的脂肪细胞明显增大，脂肪细胞间炎性细胞浸润显 erators⁃activated receptors，PPARγ）的上调表达（图
著增多（图2B、C）。并且AIM2基因敲除小鼠的葡萄 2F、G）。以上结果表明，AIM2在高脂诱导的小鼠肥
糖抵抗能力以及胰岛素敏感性都被破坏，小鼠出现 胖发生过程中发挥保护作用，抑制小鼠肥胖的产生。
了葡萄糖不耐受和胰岛素抵抗（图 2D、E）。由于脂 2.3 脂肪组织巨噬细胞中的AIM2调控高脂诱导的
肪生成受多种脂肪生成相关蛋白的调控，我们分析 肥胖发生
了脂肪生成相关分子的基因表达变化，结果显示 前期研究显示 AIM2 在巨噬细胞中高表达，并

A B C
-/-
60 WT组 WT组 AIM2 组 ***
AIM2 组
-/-
* （ μm 2 ） 15 000
（ g ） 40 10 000
体重
脂肪细胞 5 000
20
0 0
0 5 10 15 20 WT组 AIM2 组
-/-
时间（周）
D WT组 E WT组 F 20 G 15
（ mmol/L） 40 AIM2 组 （ mmol/L） 15 AIM2 组 mRNA 15 *** mRNA 10 **
-/-
-/-
30
10
葡萄糖 20 *** 葡萄糖 5 *** FABP4 相对表达水平 10 5 PPARγ 相对表达水平 5
10
0 0 0 0
0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 WT组 AIM2 组 WT组 AIM2 组
-/-
-/-
时间（min） 时间（min）
A：给予小鼠 60%高脂饲料喂养 15 周，每周对小鼠称重，分析体重变化；B：HE 染色结果分析脂肪组织中脂肪细胞生长差异（×200）；C：
Image J 软件统计脂肪细胞面积；D：葡萄糖耐受检测；E：胰岛素敏感性检测，分析小鼠胰岛素抵抗情况；F、G：Q⁃PCR检测脂肪组织中脂肪生成
相关分子FABP4（F）和PPARγ（G）的基因表达变化。两组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=4）。
***
**
*
图2 AIM2抑制小鼠肥胖的发生
Figure 2 AIM2 inhibits the occurrence of obesity in mice

且发现高脂造模后脂肪组织中巨噬细胞浸润明显 2.4 AIM2 通过调节巨噬细胞极化来调控脂肪组
增多，为了进一步探究 AIM2 调控脂肪发生的作用 织形成
机制，构建了巨噬细胞（Cx3cr1⁃cre）AIM2 条件性敲 为了进一步明确 AIM2 对巨噬细胞的调节作
除小鼠来明确巨噬细胞中的AIM2对高脂诱导的肥 用，首先取出WT和AIM2基因敲除小鼠高脂造模后
胖发生的影响。对同窝FLOX小鼠和条件敲除小鼠 的性腺周脂肪组织，发现相比 WT 小鼠，AIM2 基因
fl/fl
进行高脂饮食造模，与 AIM2 小鼠相比，AIM2 fl/fl 敲除小鼠 M1 型巨噬细细胞促炎细胞因子 IL⁃6、
Cx3cr1⁃Cre 小鼠体重增加更多（图 3A），与此相一 TNF、iNOS 显著上调表达，但是M2型巨噬细胞产生
致，病理结果显示，AIM2 基因敲除小鼠脂肪细胞更 的抑炎细胞因子Arg1、Ym1、Mrc1 没有显著变化（图

fl/fl
大，冠状结构更少（图 3B、C）。并且 AIM2 Cx3cr1⁃ 4A、B）。同时，分离WT 小鼠和AIM2基因敲除小鼠
Cre小鼠对葡萄糖的耐受能力和对胰岛素的抵抗能 的骨髓来源巨噬细胞，分别用 M1 型巨噬细胞促炎
力显著下降（图3D、E）。另外，在巨噬细胞中特异性 极化因子 LPS 和 M2 型巨噬细胞抑炎极化因子 IL⁃4

缺失 AIM2 后，同样可以显著促进 FABP4 和 PPARγ 刺激细胞。流式分析结果显示 AIM2 缺失后，促炎
的表达上调（图3F、G）。上述结果揭示AIM2调控小 巨噬细胞（M1 样巨噬细胞）比例显著增加，但是不
鼠肥胖的发生可能是通过对巨噬细胞的免疫调节 影响抑炎巨噬细胞（M2样巨噬细胞）比例的改变（图
来发挥作用的。 4C、D）。与此相一致，基因表达分析结果表明AIM2