Page 37 - 南京医科大学学报自然科学版
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第41卷第5期 王艺睿,王 皓,刘硕琛,等. NEK7在慢性肝脏炎症及纤维化形成中的作用[J].
2021年5月 南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(05):663-669,689 ·667 ·
脏纤维化时中性粒细胞和巨噬细胞的聚集以及炎 IL⁃1β和 C⁃caspase⁃1 的蛋白表达,结果显示,NEK7⁃
症反应(图 3A、B、C)。通过 ELISA 试剂盒检测各组 siRNA 组中相应表达量明显减少(图3F),因此认为
Oil
小鼠血清中IL⁃1β水平的差异(图3D)。为了验证甘 NEK7可通过NLRP3炎症小体信号通路调控小鼠肝
露糖偶联聚合体体系中NEK7⁃siRNA对肝脏巨噬细 脏纤维化的发生和发展进程。
胞的敲低效率,通过肝脏灌注纯化获取肝脏巨噬细
3 讨 论
胞,并进行了Western blot实验加以验证,结果显示,
NEK7⁃siRNA较NS⁃siRNA组巨噬细胞中的NEK7的 肝脏纤维化是慢性肝脏疾病的常见病理结果 。
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表达明显被抑制(图3E)。同时我们测定了NLRP3、 慢性肝炎的患者常可观察到过度肝脏纤维化。肝
A Oil CCL4
NS⁃siRNA NEK7⁃siRNA NS⁃siRNA NEK7⁃siRNA
HE
Mason
天狼星红
B
5 4 * 4 * 3 相对表达量 5 4 * 4 *
Collagen⁃Ⅰ mRNA相对表达量 3 2 Collagen⁃Ⅱ mRNA相对表达量 3 2 1 2 mRNA相对表达量 3 2 1
0 1 0 TIMP1 mRNA 1 0 TGF⁃β 0
CCI4+NEK7⁃siRNA
Oil+NEK7⁃siRNA
CCI4+NEK7⁃siRNA
Oil+NEK7⁃siRNA
Oil+NS⁃siRNA CCI4+NS⁃siRNA Oil+NS⁃siRNA CCI4+NS⁃siRNA Oil+NS⁃siRNA CCI4+NS⁃siRNA Oil+NS⁃siRNA CCI4+NS⁃siRNA
Oil+NEK7⁃siRNA
CCI4+NEK7⁃siRNA
Oil+NEK7⁃siRNA
CCI4+NEK7⁃siRNA
A:小鼠肝脏组织的HE、Masson和天狼星红染色(×100);B:qRT⁃PCR检测小鼠肝脏组织纤维化相关指标。两组比较,P < 0.05(n=5)。
*
图2 抑制小鼠巨噬细胞中NEK7的表达可减轻肝脏纤维化的程度
Figure 2 NEK7 deficiency in macrophages alleviates CCl 4⁃induced liver fibrosis