Page 12 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第9期
·1278 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年9月

A 250 * B 1 2 3 4 2.5
（ pg/mL） 200 *# p⁃Smad3 52 kDa 2.0 * *#
1.5
150
Smad3
52 kDa
TGF⁃β1 100 p⁃Smad3/Smad3 1.0
0.5
50
0 0.0
1 2 3 4 1 2 3 4
A：ELISA 检测细胞分泌TGF⁃β1水平；B：Western blot 检测细中Smad3磷酸化水平。1：常氧组；2：缺氧组；3：缺氧+CDDO⁃Me 组；4：常氧+
CDDO⁃Me组。与常氧组比较，P < 0.05；与缺氧组比较，P < 0.05（n=3）。
*
#
图4 CDDO⁃Me对缺氧诱导的PAAF中TGF⁃β1/Smad3信号通路的影响
Figure 4 Effects of CDDO⁃Me on the TGF⁃β1/Smad3 signaling pathway in PAAF induced by hypoxia
A 常氧组 缺氧组 缺氧+CDDO⁃Me组 常氧+CDDO⁃Me组

p⁃65/DAPI

B C D
1 2 3 4 15 000
（ pg/mL） 10 000 *# *#
p⁃p65 * *
65 kDa （ pg/mL） 400
300
p65 65 kDa
3.0 IL⁃1β 5 000 TNF⁃α 200
100
* 0 0
p⁃p65/p65 2.0 *# 1 2 3 4 1 2 3 4
1.0
0.0
1 2 3 4
A：免疫荧光实验观察细胞内NF⁃κB（p65）核转位情况（×200）；B：Western blot检测p65磷酸化水平；C、D：ELISA检测细胞分泌IL⁃1β（C）和
TNF⁃α（D）水平。1：常氧组；2：缺氧组；3：缺氧+CDDO⁃Me组；4：常氧+CDDO⁃Me组。与常氧组比较，P < 0.05；与缺氧组比较，P < 0.05（n=3）。
*
#
图5 CDDO⁃Me对缺氧诱导的PAAF中NF⁃κB信号通路的影响
Figure 5 Effects of CDDO⁃Me on the NF⁃κB signaling pathway in PAAF induced by hypoxia
氧化应激损伤在缺氧性 PAH 中发挥至关重要 纤维化 ［8-9］ 。此外近年来研究表明，CDDO⁃Me 可改
的作用。缺氧刺激血管壁细胞产生大量 ROS，同时 善内皮细胞功能、抑制平滑肌细胞收缩 ［18］ 。Ⅱ期临
细胞内清除ROS的能力下降，细胞自身的氧化/抗氧 床试验结果显示CDDO⁃Me可改善PAH患者运动耐
化平衡失调造成大量ROS蓄积，诱导细胞发生炎症、 力 ［19］ 。以上研究均提示 CDDO⁃Me 具有较大的 PAH
凋亡、坏死，促进血管重构 。ROS还可以与一氧化 治疗潜力。本课题组前期研究结果表明，CDDO⁃Me
［13］
氮（nitric oxide，NO）相互作用降低NO的生物利用度， 可降低野百合碱诱导的PAH大鼠平均肺动脉压，在
增加血管张力 。Nrf2是细胞抗氧化应激的重要转 PAH 动物模型中具有一定治疗作用 ［20］ 。然而目前
［14］
录因子，调控下游如GSH、硫氧还蛋白、醌氧化还原 CDDO⁃Me对PAAF生物学功能的影响尚不明确。
酶等抗氧化相关蛋白及细胞保护酶的表达，在维持 肺血管外膜纤维化是肺血管重构的一个重要
细胞氧化还原稳态中发挥重要作用。CDDO⁃Me 是 病理改变。在缺氧性PAH早期，肺动脉外膜便出现

一种半合成的齐墩果酸衍生物，可以有效激活Keap1/ 大量表达α⁃SMA 的肌成纤维细胞。肌成纤维细胞
Nrf2/ARE信号通路，诱导抗氧化相关蛋白及酶类的 作为胶原蛋白和其他ECM蛋白的主要产生细胞，在
表达，降低ROS水平，保护细胞功能 ［15］ 。研究显示， 诱导血管外膜纤维化、降低血管顺应性中发挥重要
CDDO⁃Me 可以减轻缺血再灌注引起的大鼠急性肾 作用 ［21］ 。此外，肌成纤维细胞具有更强的收缩和迁
损伤 ［16］ 、保护糖尿病肾病肾小管功能 ［17］ ，也可以减 移能力，参与血管新生内膜的形成 ［22］ 。本研究结果
轻放射线照射和博来霉素诱导的小鼠肺部损伤和 显示，CDDO⁃Me 可以抑制缺氧诱导的PAAF过度增