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第42卷第6期 王红玉，顾 浩，葛 爱，等. 蛋白酶激活受体2经ROS信号调控支气管上皮间充质表型转化［J］.
2022年6月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（06）：790-795，829 ·793 ·

A 200 α⁃SMA E⁃cadherin N⁃cadherin *
Tr 100 pmol/L组
Tr 10 pmol/L组
对照组 Tr 1 pmol/L组 Tr 50 pmol/L组 TGF⁃β 10 ng/mL组 B （ % ） 150 * * * * * *

N⁃cadherin 125 kDa 蛋白相对表达量 100 * *
E⁃cadherin 135 kDa 50
α⁃SMA 42 kDa
0
对照组 pmol/L组 pmol/L组 pmol/L组 pmol/L组 ng/mL组 对照组 pmol/L组 pmol/L组 pmol/L组 pmol/L组 ng/mL组 对照组 pmol/L组 pmol/L组 pmol/L组 pmol/L组 ng/mL组
GAPDH 36 kDa
1 10 50 100 10 1 10 50 100 10 1 10 50 100 10
Tr Tr Tr Tr TGF⁃β Tr Tr Tr Tr TGF⁃β Tr Tr Tr Tr TGF⁃β

A：蛋白质免疫印迹结果；B：α⁃SMA、E⁃cadherin、N⁃cadherin蛋白相对表达量定量分析。Tr：类胰蛋白酶；与对照组相比，P < 0.05；n=3。
*
图2 类胰蛋白酶对间充质细胞标志物（N⁃cadherin及α⁃SMA）和上皮细胞标志物（E⁃cadherin）的影响
Figure 2 Effects of tryptase on mesenchymal markers（N⁃cadherin and α⁃SMA）and epithelial marker（E⁃cadherin）

平变化，结果显示与对照组相比，100 pmol/L类胰蛋 生成效应（P < 0.05，图3）。
白酶显著上调了 HBE 细胞 ROS 的水平，其效应与 2.4 ROS 介导类胰蛋白酶促 HBE 细胞修复、迁移
TGF⁃β相近（P < 0.05，图 3）。200 μmol/L 浓度的 效应
PAR2 阻断剂 FS，可有效阻断类胰蛋白酶的促 ROS 为了探讨类胰蛋白酶引起的上皮细胞 ROS 水

Tr100 pmol/L+
A B
对照组 Tr 100 pmol/L组 FS 200 μmol/L组 FS 200 μmol/L组 TGF⁃β 10 ng/mL组 30 * *
平均荧光强度 20 #

10

0 对照组
FS 200 μmol/L组
Tr100 pmol/L+FS 200 μmol/L组
TGF⁃β 10 ng/mL组
Tr 100 pmol/L组

A：DCFH⁃DA 荧光探针实验图（标尺：50 μm）；B：免疫荧光半定量分析图。Tr：类胰蛋白酶；FS：PAR2抑制剂；与对照组相比，P < 0.05；与
*
Tr 100 pmol/L组相比，P < 0.05；n=3。
#
图3 类胰蛋白酶通过激活PAR2上调16HBE ROS水平
Figure 3 Tryptase increased ROS production in 16HBE by activating PAR2

平上调是否是诱导EMT过程的重要信号，应用ROS 袭转移中，EMT 是病程进展的关键环节，可引发后
强效清除剂 NAC 处理细胞，观察类胰蛋白酶的促 续一系列复杂的不良事件，包括细胞骨架重构，
HBE细胞修复、迁移效应是否被抑制。如图4显示， ECM沉积，肿瘤细胞扩散、迁移、分化等 ［13］ 。呼吸系

与类胰蛋白酶单处理组相比，同时给予 2 mmol/L 统疾病中，EMT 作为气道重塑的重要特征，与支气
NAC下调ROS水平，可显著抑制16HBE细胞的修复 管细胞功能及结构损伤密切相关，是肺功能障碍的
及迁移（P < 0.05），提示 ROS 水平增高是类胰蛋白 重要预测因素 ［14］ 。哮喘患者肺组织中，往往出现活
酶上调细胞修复与迁移的重要环节。 化的成纤维/肌成纤维细胞，ECM（如胶原蛋白、纤连
蛋白、基质金属蛋白酶⁃9）堆积、气道重塑 ［15］ 。EMT
3 讨 论
作为肌成纤维细胞的重要来源途径，其事件特征为
多种慢性疾病如器官纤维化、上皮源性肿瘤侵 上皮细胞逐步转化为α⁃SMA阳性的肌成纤维细胞，