Page 42 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第6期
·794 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年6月

Tr 100 pmol/L+
A 对照组 Tr 100 pmol/L组 NAC 2 mmol/L组 NAC 2 mmol/L组
200
（ % ） 150 * #
划痕愈合率 100

50
0 对照组
NAC 2 mmol/L组
Tr 100 pmol/L组
Tr 100 pmol/L+NAC 2 mmol/L组

Tr 100 pmol/L+
B 对照组 Tr 100 pmol/L组 NAC 2 mmol/L组 NAC 2 mmol/L组
（ % ） 400 *
迁移细胞相对比例 200 0 #
300

100

对照组
Tr 100 pmol/L+NAC 2 mmol/L组
NAC 2 mmol/L组
Tr 100 pmol/L组

A：划痕实验图及半定量分析图（标尺：50 μm）；B：Transwell迁移实验图及半定量分析图（标尺：50 μm）。Tr：类胰蛋白酶；NAC：ROS清除
剂；与对照组相比，P < 0.05；与Tr 100 pmol/L组相比，P < 0.05；n=3。
#
*
图4 NAC抑制类胰蛋白酶诱导的细胞修复与迁移
Figure 4 NAC inhibited cell repair and migration induced by tryptase

失去E⁃cadherin等上皮标记物 ［16］ 。本研究通过体外 重要作用 ［20］ 。多项研究证实，其可促进成纤维细胞
培养 16HBE、建立支气管上皮细胞模型，首次证实 分化 ［21］ 、诱导气道平滑肌细胞增殖 ［22］ ，在肺纤维化
选择性激活 PAR2 可通过氧化还原机制、诱导气道 的发生发展中十分关键。然而，类胰蛋白酶对气道
上皮发生 EMT，细胞表型向间充质转化。PAR2 的 上皮是否存在效应、与气道上皮发生 EMT 是否相
天然激动剂——类胰蛋白酶，通过上调细胞ROS信 关，目前所知甚少。本研究首次观测了PAR2活化对
号、实现促EMT效应，可能是哮喘气道重塑、尤其是 气道上皮表型及功能的影响，探究了 16HBE 细胞
上皮重塑的重要机制之一。 PAR2激活能否诱发EMT及其可能机制。结果显示
肺和气道（包括支气管上皮细胞）存在大量 予气道上皮细胞以类胰蛋白酶处理后，细胞逐步丧
PAR2 表达，但其病理生理功能研究甚少。近期研 失上皮特征而向间充质表型转化，且呈浓度依赖
究发现，肺纤维化患者肺组织PAR2表达上调 ［17］ ；激 性，提示类胰蛋白酶可诱导气道上皮EMT过程。
活 PAR2 可诱导肺部炎症，引发成纤维细胞活化如 支气管上皮细胞 EMT 的潜在机制目前仍未完
增殖、迁移、分化为肌成纤维细胞等 ［18］ ；同时，多项 全阐明。研究表明，PAR2 活化与线粒体 ROS 生成
证据显示 PAR2 可通过介导气道上皮活化，促进基 相关 ［12］ 。事实上，细胞ROS水平是影响EMT过程的
质金属蛋白酶⁃9 的合成与分泌 ［19］ 。上述系列研究 重要因素 ［23］ 。而激活PAR2诱发气道上皮EMT是否
结果均提示，PAR2 的状态与气道结构及功能存在 经由氧化应激通路，至今仍未可知。本研究结果揭
紧密联系。 示，类胰蛋白酶通过激活气道上皮中的 PAR2、促
类胰蛋白酶，作为机体内PAR2的天然激动剂， ROS生成，从而介导细胞EMT的发生。上皮细胞接
主要来源于肥大细胞，在炎症及过敏反应中发挥了 受不同应激如理化因素、细胞因子等，可显著上调