Page 35 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第8期 马泽萌，陈允梓. 维生素D受体核定位信号的鉴定［J］.
2022年8月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（08）：1073-1079 ·1077 ·

A
NC VD

NC

R49W/R50G

K53Q/R54G/K55E

R49W/R50G/ K53Q/R54G/K55E

B
0.8 WT VDR
** R49W/R50G
Nuclear/cytoplasmic fluorescence ratio 0.4 R49W/R50G/K53Q/R54G/K55E
K53Q/R54G/K55E
0.6

0.2
0
NC VD NC VD NC VD NC VD
A：HeLa细胞中转染各VDR表达质粒后，收集VD刺激前后的细胞样品进行免疫荧光观察。红色荧光标记的是HA⁃tag 指示VDR系列蛋
白，蓝色 DAPI指示细胞核。标尺为 10 μm；B：根据免疫荧光结果，采用Image J 软件定量分析VDR及其变体蛋白表达的核质比。两组比较，
P < 0.01。
**
图4 VDR点突变影响VDR在细胞内的分布
Figure 4 VDR point mutations affect the spatial distribution of VDR in cells

A B C
WT VDR WT VDR WT VDR
R49W/R50G R49W/R50G R49W/R50G
K53Q/R54G/K55E K53Q/R54G/K55E K53Q/R54G/K55E
R49W/R50G/K53Q/R54G/K55E R49W/R50G/K53Q/R54G/K55E R49W/R50G/K53Q/R54G/K55E
*** 0.6 *** *** 0.3
1.0
***
ATP2B1基因表达水平 0.6 CYP24A1基因表达水平 0.4 CYP27A1基因表达水平 0.2
***
***
0.8
0.4
0.2
0.1
0.2
0
Ethanol VD 0 Ethanol VD 0 Ethanol VD
293T细胞转染系列VDR及其点突变表达载体后，采用VD刺激4 h，收集刺激前后的细胞样品进行qPCR分析各基因Cyp24a1（A）、Atp2b1
（B）和Cyp27A（C）mRNA表达水平。两组比较， P < 0.001。
***
图5 VDR的点突变影响了VDR对下游基因的转录
Figure 5 VDR point mutations affect the transcription of downstream genes by VDR