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第42卷第8期
·1078 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年8月
进一步了解VDR在细胞核和细胞质中的不同功能， 症小鼠急性肝损伤的保护作用及机制［J］. 南京医科大
为研究相关疾病提供参考依据。 学学报（自然科学版），2021，41（9）：1289-1321
根据在线网站预测分析 VDR 的核定位信号位 ［3］ DUAN A，MA Z，LIU W，et al. 1，25⁃Dihydroxyvitamin D
置，提示VDR的NLS为 RRSMKRKALFLT ，并且通 inhibits osteoarthritis by modulating interaction between
49
61
vitamin D receptor and NLRP3 in macrophages［J］. J In⁃
过序列比对显示在不同种属 VDR 序列里该 NLS 具
flamm Res，2021，14：6523-6542
有很好的保守性。根据NLS保守性分析，针对49/50
［4］ VOUTSADAKIS I A. Vitamin D receptor（VDR）and me⁃
位、53/54/55位、49/50/53/54/55位的保守氨基酸进行
tabolizing enzymes CYP27B1 and CYP24A1 in breast
突变，通过 Western blot 和免疫荧光等方法进行检 cancer［J］. Mol Biol Rep，2020，47（12）：9821-9830
测，结果显示：当 VD 刺激后，野生型 VDR 能快速入 ［5］ LAVERNY G，PENNA G，USKOKOVIC M，et al. Synthe⁃
核；而 VDR 的 NLS 突变都能有效抑制 VDR 入核，证 sis and anti⁃inflammatory properties of 1alpha，25⁃dihy⁃
明了这些氨基酸位点参与调控 VDR 的入核。据文 droxy⁃16⁃ene⁃20⁃cyclopropyl⁃24⁃oxo⁃vitamin D3，a hypo⁃
献报道，VD 与 VDR 结合能启动生物反应，启动下 calcemic，stable metabolite of 1alpha，25⁃dihydroxy⁃16⁃
ene⁃20⁃cyclopropyl⁃vitamin D3［J］. J Med Chem，2009，
游基因如 CYP24A1、ATP2B1 等的转录。通过 qPCR
52（8）：2204-2213
检测这些下游基因，结果表明突变体VDR明显抑制
［6］ LEE S M，MEYER M B，BENKUSKY N A，et al. The im⁃
了 CYP24A1、ATP2B1 的 mRNA 表达，确定了这 5 个
pact of VDR expression and regulation in vivo［J］. J Ste⁃
位点是 VDR 入核并发挥转录调节作用的关键位 roid Biochem Mol Biol，2018，177：36-45
点。基于这些VDR点突变体不能入核的性质，提示 ［7］ DE ALBUQUERQUE BORBOREMA M E，OLIVEIRA D
这些点突变体可作为研究胞质VDR功能的新工具， C，DE AZEVEDO SILVA J. Down regulation of VDR
应用于VDR的相关研究 。 gene expression in metabolic syndrome and atherosclero⁃
［20］
通常，精氨酸（R）可以被甲基化修饰，赖氨酸 sis’patients：cause or consequence?［J］. Gene，2021，
（K）可以被泛素化修饰，而这些蛋白质的后加工修 771：145341
［8］ SHANG M，SUN J. Vitamin D/VDR，probiotics，and gas⁃
饰形式也可以调控蛋白质的核定位行为，例如：
trointestinal diseases［J］. Curr Med Chem，2017，24（9）：
Laims 蛋白能发生泛素化调节其核定位 ［21］ ，PRMT1
876-887
甲基化酶能使p14 ARF 蛋白发生甲基化修饰调节该蛋
［9］ CUI C，CUI J，JIN F，et al. Induction of the vitamin D re⁃
［22］
白的核定位 。因此，对于VDR点突变体不能入核 ceptor attenuates autophagy dysfunction ⁃ mediated cell
的现象，推测还存在另一个可能：当精氨酸和赖氨酸 death following traumatic brain injury［J］. Cell Physiol
位点进行点突变后，可能抑制了VDR的泛素化或甲 Biochem，2017，42（5）：1888-1896
基化的后加工形式，从而影响VDR的入核行为。是 ［10］ PELEG S，NGUYEN C V. The importance of nuclear im⁃
否VDR的这些位点会发生后加工修饰参与VDR核定 port in protection of the vitamin D receptor from polyubiq⁃
位的调节呢？这也是一个值得探究的问题。 uitination and proteasome ⁃ mediated degradation［J］. J
Cell Biochem，2010，110（4）：926-934
总之，本研究通过预测分析，点突变体的构建，
［11］ KLOPOT A，HANCE K W，PELEG S，et al. Nucleo⁃cyto⁃
结合亚细胞定位分析和 qPCR 等方法，确定了 VDR
plasmic cycling of the vitamin D receptor in the enterocyte⁃
的核定位信号为 RRSMKRKALFLT ，并且证明了 like cell line，Caco⁃2［J］. J Cell Biochem，2007，100（3）：
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这 5 个位点（49/50/53/54/55）的突变能够影 VD/VDR 617-628
信号的生物学活性，这一发现为探索 VDR 在细胞 ［12］ KELLERMANN L，JENSEN K B，BERGENHEIM F，et
质和细胞核中的作用提供研究平台，为探讨 VD/ al. Mucosal vitamin D signaling in inflammatory bowel
VDR 相关疾病的预防、诊断和治疗提供了一定的 disease［J］. Autoimmun Rev，2020，19（11）：102672
理论基础。 ［13］ SCHLINGMANN K P，KAUFMANN M，WEBER S，et al.
Mutations in CYP24A1 and idiopathic infantile hypercal⁃
［参考文献］
cemia［J］. N Engl J Med，2011，365（5）：410-421
［1］ CHRISTAKOS S，DHAWAN P，VERSTUYF A，et al. Vi⁃ ［14］ CARLBERG C，CAMPBELL M J. Vitamin D receptor sig⁃
tamin D：metabolism，molecular mechanism of action，and naling mechanisms：integrated actions of a well ⁃ defined
pleiotropic effects［J］. Physiol Rev，2016，96（1）：365- transcription factor［J］. Steroids，2013，78（2）：127-136
408 ［15］ RAO Z，CHEN X，WU J et al. Vitamin D receptor inhibits
［2］ 弓玉祥，倪海锋，张思宇，等. 活性维生素 D3 对脓毒血 NLRP3 activation by impeding its BRCC3⁃mediated deu⁃
