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第42卷第8期
·1078 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年8月
进一步了解VDR在细胞核和细胞质中的不同功能, 症小鼠急性肝损伤的保护作用及机制[J]. 南京医科大
为研究相关疾病提供参考依据。 学学报(自然科学版),2021,41(9):1289-1321
根据在线网站预测分析 VDR 的核定位信号位 [3] DUAN A,MA Z,LIU W,et al. 1,25⁃Dihydroxyvitamin D
置,提示VDR的NLS为 RRSMKRKALFLT ,并且通 inhibits osteoarthritis by modulating interaction between
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vitamin D receptor and NLRP3 in macrophages[J]. J In⁃
过序列比对显示在不同种属 VDR 序列里该 NLS 具
flamm Res,2021,14:6523-6542
有很好的保守性。根据NLS保守性分析,针对49/50
[4] VOUTSADAKIS I A. Vitamin D receptor(VDR)and me⁃
位、53/54/55位、49/50/53/54/55位的保守氨基酸进行
tabolizing enzymes CYP27B1 and CYP24A1 in breast
突变,通过 Western blot 和免疫荧光等方法进行检 cancer[J]. Mol Biol Rep,2020,47(12):9821-9830
测,结果显示:当 VD 刺激后,野生型 VDR 能快速入 [5] LAVERNY G,PENNA G,USKOKOVIC M,et al. Synthe⁃
核;而 VDR 的 NLS 突变都能有效抑制 VDR 入核,证 sis and anti⁃inflammatory properties of 1alpha,25⁃dihy⁃
明了这些氨基酸位点参与调控 VDR 的入核。据文 droxy⁃16⁃ene⁃20⁃cyclopropyl⁃24⁃oxo⁃vitamin D3,a hypo⁃
献报道,VD 与 VDR 结合能启动生物反应,启动下 calcemic,stable metabolite of 1alpha,25⁃dihydroxy⁃16⁃
ene⁃20⁃cyclopropyl⁃vitamin D3[J]. J Med Chem,2009,
游基因如 CYP24A1、ATP2B1 等的转录。通过 qPCR
52(8):2204-2213
检测这些下游基因,结果表明突变体VDR明显抑制
[6] LEE S M,MEYER M B,BENKUSKY N A,et al. The im⁃
了 CYP24A1、ATP2B1 的 mRNA 表达,确定了这 5 个
pact of VDR expression and regulation in vivo[J]. J Ste⁃
位点是 VDR 入核并发挥转录调节作用的关键位 roid Biochem Mol Biol,2018,177:36-45
点。基于这些VDR点突变体不能入核的性质,提示 [7] DE ALBUQUERQUE BORBOREMA M E,OLIVEIRA D
这些点突变体可作为研究胞质VDR功能的新工具, C,DE AZEVEDO SILVA J. Down regulation of VDR
应用于VDR的相关研究 。 gene expression in metabolic syndrome and atherosclero⁃
[20]
通常,精氨酸(R)可以被甲基化修饰,赖氨酸 sis’patients:cause or consequence?[J]. Gene,2021,
(K)可以被泛素化修饰,而这些蛋白质的后加工修 771:145341
[8] SHANG M,SUN J. Vitamin D/VDR,probiotics,and gas⁃
饰形式也可以调控蛋白质的核定位行为,例如:
trointestinal diseases[J]. Curr Med Chem,2017,24(9):
Laims 蛋白能发生泛素化调节其核定位 [21] ,PRMT1
876-887
甲基化酶能使p14 ARF 蛋白发生甲基化修饰调节该蛋
[9] CUI C,CUI J,JIN F,et al. Induction of the vitamin D re⁃
[22]
白的核定位 。因此,对于VDR点突变体不能入核 ceptor attenuates autophagy dysfunction ⁃ mediated cell
的现象,推测还存在另一个可能:当精氨酸和赖氨酸 death following traumatic brain injury[J]. Cell Physiol
位点进行点突变后,可能抑制了VDR的泛素化或甲 Biochem,2017,42(5):1888-1896
基化的后加工形式,从而影响VDR的入核行为。是 [10] PELEG S,NGUYEN C V. The importance of nuclear im⁃
否VDR的这些位点会发生后加工修饰参与VDR核定 port in protection of the vitamin D receptor from polyubiq⁃
位的调节呢?这也是一个值得探究的问题。 uitination and proteasome ⁃ mediated degradation[J]. J
Cell Biochem,2010,110(4):926-934
总之,本研究通过预测分析,点突变体的构建,
[11] KLOPOT A,HANCE K W,PELEG S,et al. Nucleo⁃cyto⁃
结合亚细胞定位分析和 qPCR 等方法,确定了 VDR
plasmic cycling of the vitamin D receptor in the enterocyte⁃
的核定位信号为 RRSMKRKALFLT ,并且证明了 like cell line,Caco⁃2[J]. J Cell Biochem,2007,100(3):
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这 5 个位点(49/50/53/54/55)的突变能够影 VD/VDR 617-628
信号的生物学活性,这一发现为探索 VDR 在细胞 [12] KELLERMANN L,JENSEN K B,BERGENHEIM F,et
质和细胞核中的作用提供研究平台,为探讨 VD/ al. Mucosal vitamin D signaling in inflammatory bowel
VDR 相关疾病的预防、诊断和治疗提供了一定的 disease[J]. Autoimmun Rev,2020,19(11):102672
理论基础。 [13] SCHLINGMANN K P,KAUFMANN M,WEBER S,et al.
Mutations in CYP24A1 and idiopathic infantile hypercal⁃
[参考文献]
cemia[J]. N Engl J Med,2011,365(5):410-421
[1] CHRISTAKOS S,DHAWAN P,VERSTUYF A,et al. Vi⁃ [14] CARLBERG C,CAMPBELL M J. Vitamin D receptor sig⁃
tamin D:metabolism,molecular mechanism of action,and naling mechanisms:integrated actions of a well ⁃ defined
pleiotropic effects[J]. Physiol Rev,2016,96(1):365- transcription factor[J]. Steroids,2013,78(2):127-136
408 [15] RAO Z,CHEN X,WU J et al. Vitamin D receptor inhibits
[2] 弓玉祥,倪海锋,张思宇,等. 活性维生素 D3 对脓毒血 NLRP3 activation by impeding its BRCC3⁃mediated deu⁃