Page 30 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第1期
· 24 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年1月

对照组 caspase⁃3抑制剂组 CTNNB1组
125
125
100
100
100
100
75 75
Count 75 75 P2 Count 50 P2 Count P2
50 50 50
25 25
25 25
0 0 0 0
10 2 10 3 10 4 10 5 10 2 10 3 10 4 10 5 10 2 10 3 10 4 10 5
FITC⁃A FITC⁃A FITC⁃A
2 000 *
caspase⁃3抑制剂+CTNNB1组 caspase⁃3抑制剂+CTNNB1 NC组 *#
100 100 1 500 *
75 75 ROS相对水平 1 000
Count 50 P2 Count 50 P2 500 0

caspase抑制剂+CTNNB1 NC组
caspase抑制剂组
25 25 对照组 CTNNB1组
0 0
10 2 10 3 10 4 10 5 10 2 10 3 10 4 10 5 caspase抑制剂+CTNNB1组
FITC⁃A FITC⁃A

与对照组相比，P < 0.05；与caspase⁃3抑制剂组相比，P < 0.05（n=5）。
#
*
图5 各组细胞ROS检测
Figure 5 Detection of ROS in each group

组降低，提示H2O2诱导的氧化应激具有一定的caspase⁃ 除了CTNNB1，我们还筛选到了其他一些基因可
3依赖性，抑制caspase⁃3能部分减弱HK⁃2细胞的氧 能与caspase⁃3途径调控ROS，参与氧化应激所致肾
化应激损伤。细胞生物行为检测显示，caspase⁃3抑 小管上皮损伤有关。线粒体分裂蛋白1（mitochondrial
制剂联合H2O2处理的HK⁃2细胞增殖率较对照组升 fission protein 1，FIS1）主要调控线粒体融合蛋白和
高，凋亡率降低，且凋亡蛋白水平降低，说明氧化应 视神经萎缩蛋白。FIS1 主要定位在细胞线粒体外
激对肾小管细胞增殖和凋亡的作用具有 caspase⁃3 膜，能促进线粒体分裂，抑制线粒体融合，造成动力
依赖性，caspase⁃3抑制剂能逆转氧化应激对肾小管 学平衡破坏，形成小球或小泡状的异常形态结构，
细胞的增殖和凋亡的效应。用CTNNB1表达载体转 线粒体嵴不清或消失，导致细胞的线粒体受损；呼
染细胞后，caspase⁃3抑制剂+CTNNB1组细胞增殖率 吸链断裂会导致钙离子内流和氧自由基形成，加重
较 caspase⁃3 抑制剂组低（P < 0.05），说明 β⁃catenin 氧化应激损伤 ［15］ 。降低大鼠肺泡巨噬细胞中线粒
对caspase⁃3抑制剂促进氧化应激状态下肾小管上皮 体的 FIS1 水平，能抑制内毒素所致的肺泡内巨噬
细胞增殖有抑制作用；而细胞凋亡率高于caspase⁃3 细胞凋亡，减轻氧化应激和炎症反应 ［16］ 。虽然目
抑制剂组，β⁃catenin能部分抵消caspase⁃3抑制剂对 前尚未见 FIS1 在肾小管上皮氧化应激的研究，但
氧化应激状态下肾小管上皮细胞凋亡的抑制作 以上结果都提示 FIS1 与氧化应激状态下的肾小管
用。caspase⁃3 抑制剂+CTNNB1 组细胞的 ROS 水平 上皮细胞损伤有关。EZR基因编码埃兹蛋白Ezrin，

较 caspase⁃3 抑制剂组高（P < 0.05），表明 caspase⁃3 主要参与细胞骨架重组、细胞内信号转导，并与
抑制剂能降低 H2O2 诱导的 HK⁃2 细胞氧化应激水 细胞存活、黏附、迁移等有关，在肿瘤发生发展和
平，而β⁃catenin 对这一效应有一定逆转作用。我们 转移中有重要作用 ［17］ 。目前尚未见 EZR 与氧化应
也观察到，caspase⁃3抑制剂+CTNNB1组细胞的增殖 激或肾小管损伤的相关报道。有研究报道，糖体蛋
能力减弱，而凋亡增强，但与对照组相比仍有差异， 白 L5（ribosomal protein L5，RPL5）突变与先天性纯
提示除了β⁃catenin，caspase⁃3 途径对氧化应激状态 红细胞再生障碍性贫血有关，并会增加癌症的发病
下肾小管上皮的效应可能还有其他作用途径。 风险 ［18］ 。小核核糖核蛋白肽 B 和 B1（small nuclear