Page 74 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第2期
·216 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年2月

A 异常膨大（图4）。
2 cell Embryo
3 讨 论
8 cell Embryo
超排卵技术有助于基因工程小鼠的产生及减
B
少动物的使用量，在基因工程小鼠构建、生物净化、
大量扩繁、濒危动物品系保存等领域发挥重要的作
A：注射PMSG 8~32 h胚胎依然在壶腹部中部，并没有靠近子宫
用。小鼠诱导超排技术流程相对成熟，成年小鼠自
端；B：32~48 h 壶腹部消失，PMSG 使输卵管的运动方向依然由子宫
然排卵仅 8~15 枚，而常规超排卵技术也仅能得到
像壶腹部运送精子的状态。少量胚胎停留在原壶腹部位置，近子宫
端输卵管和子宫内均无胚胎。 15~40 枚卵子，因此提高雌鼠超排效果和胚胎发育
图2 注射PMSG后胚胎发育情况 潜能一直是辅助生殖技术所追求的目标。尽管幼
Figure 2 Embryo development after PMSG injection 年小鼠供体受激素刺激会产生更多的卵母细胞，但
价。优化双排卵实验组总共检出异常胚85枚（无法 对于卵细胞质量要求比较高的科学研究以及在拯
区分畸形碎裂胚实际来源于第一次排卵还是第二 救濒危珍贵小鼠模型时使用更多的是成年小鼠。
次排卵，故仅统计异常胚总数），平均每只小鼠检测 本研究以成年小鼠为研究对象进行受精后激素诱
到 4.7 枚，与实验组无统计学差异。优化双排卵实 导超排，在见栓和激素诱导后，平均每只鼠可二次

验组在注射HCG后与雄鼠二次合笼，其中15只（15/ 排卵 25.6 枚，相对于对照组小鼠差异显著（P <
18）二次见栓，清洗输卵管共收集735枚卵母细胞和 0.01）。结果说明，双排卵实验方案能够显著提高成
受 精 卵 母 细 胞 ，其 中 受 精 卵 509 枚 ，受 精 率 为 年雌鼠的超排效果。
69.2%。值得一提的是，有 3 只鼠二次排卵数超过 自然受孕的小鼠受精卵在适宜的条件下，会继续
80枚，排卵最多的1只雌鼠取胚数更是高达 109 枚 发育成为多细胞胚胎。但8只常规双排卵实验组小
（含二次卵母细胞 93 枚、一次胚胎16枚）且壶腹部 鼠体内仅有4只收集到总数16枚正常发育的多细胞

见栓24 h 见栓48 h 见栓80 h

对照组

实验组

图3 不同时期对照组与实验组胚胎发育比较（×25）
Figure 3 Comparison of embryonic development between control group and experimental group at different stages（×25）

表2 双排卵优化实验方案与常规双排卵实验方案排卵数据对比
Table 2 Data comparison between the optimized double ovulation experimental scheme and the conventional double ovula⁃
tion experimental scheme （n）
入组 总卵数（一次 均只 自然见栓一次排卵 异常 超排二次排卵 二次排卵受精率
组别 小鼠 胚+二次卵子 排卵 一次 检出 均只 胚总 超排 二次排 均只 二次见 排卵 受精 受精
总数 +异常胚） 数 胚胎数 小鼠数 排卵数 数 只数 卵总数 排卵数 栓数 数 卵数 率（%）

优化双排卵实验组 18 1 110 61.7 187 16 11.7 85 18 838 46.6 15 735 509 69.2%
常规双排卵实验组 08 0 254 31.8 016 04 04.0 33 08 205 25.6 — — — —